Tema 6. ICSI, IA, TE

Question 1

3 aplicaciones de la

microinyección

y mediante qué 2 procesos se consiguen

Answer 1

• Transfección de células
• Introducción de células madre modificadas en un blastocisto
• Fertilización mediante ICSI (Inyección IntraCitoplasmática de Espermatozoides)

• Inyectar mecánicamente células, material genético…
• Eliminar material de la muestra (enucleación)

Question 2

Qué significa

ICSI

y año de su invención

Answer 2

Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides
1992

Su invención fue el comienzo de una nueva era en medicina reproductiva

Intracitoplasmic Sperm Injection

Question 3

Pasos en la realización de

ICSI

(9)

Answer 3

1. Decumulación ovocitaria (hialuronidasa / pipeta) 🔴
2. Preparación pipetas sujeción + microinyección
3. Preparación placa con gotas de medio
4. Selección espermática a x400 (10⁶ spz/ml) 🔷
5. Inmovilización y aspiración esperma 🔷
6. Sujeción y orientación ovocito 🔴
7. Inyección intracitoplasmática
8. Valoración rotura óvulo (por presión sin salto) 🔴
9. Cultivo embriones (24 h comprobar fertilización) 🟪

🔴 Ovocito / 🔷 Esperma / 🟪 Embrión

Question 4

Desventajas

IMSI

(2)

Answer 4

• Teratozoospermia severa (malformaciones)
• Niveles elevados de fragmentación de DNA del esperma

Question 5

A cuantos aumentos se hace la selección espermática en

IMSI

Answer 5

8000 aumentos

Frente a 400 en ICSI

Question 6

Qué significa

IMSI

Answer 6

Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides Morfológicamente seleccionados

Intracytoplasmic Morphologically selected Sperm Injection

Question 7

Al contrario que durante la fase folicular,

qué hormona aumentará su expresión en la fase lútea y cual la disminuirá

Answer 7

• ↑ Progesterona
• ↓ Estrógeno (+ LH + FSH)

Question 8

Qué hormonas se emplean en la

sincronización de la ovulación

(5)

Answer 8

• GnRH natural o análogos
• Gonadotropinas (FSH, LH, eCG)
• Progesterona natural o sintética
• Prostaglandinas
• Melatonina

Question 9

Cómo actúa

GnRH o sus análogos

para sincronizar la ovulación

Answer 9

• ↑ liberación LH y FSH
• Inducción estro y ovulación

Sus análogos:
* ↑ afinidad por receptor
* ↑ vida media

Question 10

Cuáles son (3) y cómo actúan las

Gonadotropinas

en la sincronización de la ovulación

Answer 10

FSH, LH y eCG: inducen estro y ovulación

eCG: doble efecto FSH y LH

Question 11

Cómo actúa la

Progesterona (o análogos)

en la sincronización de la ovulación

Answer 11

• Suprime secreción GnRH y por tanto FSH y LH
• Induce y sincroniza la ovulación

Question 12

Cómo actúan las

Prostaglandinas (PGF₂α o análogos)

en la sincronización de la ovulación

Answer 12

Regresión del cuerpo lúteo

No sirve para controlar la reproducción de animales en anestro (no celo)

Question 13

Cómo actúa la

Melatonina

en la sincronización de la ovulación

Answer 13

• Modifica la percepción del fotoperiodo
• En especies que se reproducen en días cortos: liberación GnRH

Question 14

Tipos de

Inseminación Artificial

según el lugar de deposición del semen (3)

Answer 14

• Vaginal: fondo de vagina / inicio cérvix
• Transcervical: cuello útero
• Intrauterina: interior del útero

Question 15

Diferentes formas de realizar la

Inseminación Artificial Intrauterina

en función del uso de anestesia (2)

Answer 15

• Con dispositivos especiales: sin anestesia
• Con laparoscopia: con anestesia

Question 16

Particularidad de la

Laparotomía

en cuanto a la colocación del animal

Answer 16

Animal patas arriba

para evitar perforar órganos del torax

Question 17

Factores que afectan a los resultados de la

Inseminación Artificial

(3)

Answer 17

• Lugar de deposición: según fisiología del cérvix de cada raza (longitud, anchura, nº pliegues)
• Tipo de muestra seminal (refrigerado / descongelado / sexado-descongelado)
• Nº espermatozoides/dosis seminal

Question 18

Qué significa

MOET

y en qué consiste

Answer 18

Transferencia de Embriones tras Múltiples Ovulaciones
Producción de embriones a partir de hembra donante superovulada y transferirlos a una receptora

Objetivo: aumentar descendencia de hembras genéticamente mejores

Question 19

Fases de la

Transferencia de Embriones

(5)

Answer 19

1. Selección de donantes
2. Superovulación de donantes
3. Recolección y valoración de embriones
4. Selección de receptoras
5. Transferencia a receptoras

Question 20

Selección de donantes en ET

Criterio de selección genético

Y método que se emplea para obtenerlo

Answer 20

Método BLUP - Modelo Animal (obtenemos índices genéticos fiables): nos indica la mayor posibilidad de evaluar los animales de forma correcta

Índice genético: indica lo que el animal transmite a la descendencia

Question 21

Selección de donantes en ET

Criterios de selección NO genéticos

(4)

Answer 21

• Edad: vacuno 2-5 años (importante condición corporal)
• Estado fisiológico: intervalo parto-superovulación (vacas 3-4 meses, ovejas y cabras 2-5 meses)
• Alimentación: índice corporal 3,5 (ni gordas ni flacas)
• Estrés: cualquier factor estresante influirá negativamente en la superovulación

Question 22

Superovulación de donantes en ET

Importante conocer que durante el ciclo estral existen ondas de…

Answer 22

Crecimiento folicular

Question 23

Superovulación de donantes durante ET:

Frecuencia de administración de Gonadotropinas

eCG y FSH

Answer 23

• eCG: 1 inyección (vida media larga en sangre), 48 horas antes del final del tratamiento con progesterona.
• FSH: 2 dosis intramusculares diarias durante 4-5 días

Question 24

Qué hormona puede producir

Retención de ovocitos y embriones en los oviductos

si se administra una dosis demasiado alta en la superovulación

Answer 24

Gonadotropinas

Question 25

Con respecto a la relación FSH/LH

Qué puede ocurrir si hay un exceso de LH

en la superovulación de donantes (3)

Answer 25

• ↓ ovulación
• ↓ fecundación
• ↓ % embriones transferibles

Question 26

Diferente duración y formas de aplicación (2) de

Progestágenos en diferentes especies

para controlar en celo en la superovulación de donantes

Answer 26

• CIDR: 9-11 días (vaca🐄)
• Esponjas vaginales: 12-14 días (oveja🐑)

Question 27

Cuántos días tras la inseminación se realiza la

recolección de embriones

en vacas y ovejas

Answer 27

• Vacas: 5-7 días tras inseminación
• Ovejas: 6-7 días tras inseminación

Question 28

Diferentes métodos de

recolección de embriones (o de transferencia de embriones a receptoras)

(3)

Answer 28

• Transcervical (no quirúrgico)
• Laparoscopia + laparotomía (quirúrgico)
• Laparoscopia (quirúrgico)

Son los mismos para recolectar o transferir

Question 29

Qué nomenclatura tiene cada una de las 4 clases en

valoración de embriones

y qué porcentaje mínimo de la masa celular debe estar intacto y viable

Answer 29

1. Excelente / buena 85% intacto y viable
2. Regular 50%
3. Pobre 25%
4. Muerto / degenerado

Question 30

3 Criterios empleados en la

selección de receptoras

en ET

Answer 30

• Edad: hembras jóvenes presentan tasas de gestación superiores a adultas
• Nutrición: buena condición corporal
• Estrés: evitar el estrés

Question 31

Qué requisito deben cumplir receptoras y donantes para poder realizar la

transferencia del embrión

Answer 31

Deben estar sincronizadas, ya que el embrión transferido necesita un ambiente uterino lo más similar posible al que soportaba en la donante

Question 32

Pasos en la laparoscopia + laparotomía para la

transferenia de embriones a receptoras

(2)

Answer 32

1. Búsqueda del CU ipsilateral al ovario con CL
2. Exteriorización del extremo del CU por una incisión de 2 cm y aplicación de los embriones

CU: Cuerno Uterino
CL: Catéter Líquido
Ipsilateral: más cercano a algo

Question 33

2 Fases del

ciclo estral

y etapas que las componen (2 etapas cada fase)

Answer 33

Fase folicular

• Proestro
• Estro

Fase lútea

• Metaestro
• Diestro