Tema 6. ICSI, IA, TE Flashcards
3 aplicaciones de la
microinyección
y mediante qué 2 procesos se consiguen
- Transfección de células
- Introducción de células madre modificadas en un blastocisto
- Fertilización mediante ICSI (Inyección IntraCitoplasmática de Espermatozoides)
- Inyectar mecánicamente células, material genético…
- Eliminar material de la muestra (enucleación)
Qué significa
ICSI
y año de su invención
Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides
1992
Su invención fue el comienzo de una nueva era en medicina reproductiva
Intracitoplasmic Sperm Injection
Pasos en la realización de
ICSI
(9)
- Decumulación ovocitaria (hialuronidasa / pipeta) 🔴
- Preparación pipetas sujeción + microinyección
- Preparación placa con gotas de medio
- Selección espermática a x400 (10⁶ spz/ml) 🔷
- Inmovilización y aspiración esperma 🔷
- Sujeción y orientación ovocito 🔴
- Inyección intracitoplasmática
- Valoración rotura óvulo (por presión sin salto) 🔴
- Cultivo embriones (24 h comprobar fertilización) 🟪
🔴 Ovocito / 🔷 Esperma / 🟪 Embrión
Desventajas
IMSI
(2)
- Teratozoospermia severa (malformaciones)
- Niveles elevados de fragmentación de DNA del esperma
A cuantos aumentos se hace la selección espermática en
IMSI
8000 aumentos
Frente a 400 en ICSI
Qué significa
IMSI
Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides Morfológicamente seleccionados
Intracytoplasmic Morphologically selected Sperm Injection
Al contrario que durante la fase folicular,
qué hormona aumentará su expresión en la fase lútea y cual la disminuirá
- ↑ Progesterona
- ↓ Estrógeno (+ LH + FSH)
Qué hormonas se emplean en la
sincronización de la ovulación
(5)
- GnRH natural o análogos
- Gonadotropinas (FSH, LH, eCG)
- Progesterona natural o sintética
- Prostaglandinas
- Melatonina
Cómo actúa
GnRH o sus análogos
para sincronizar la ovulación
- ↑ liberación LH y FSH
- Inducción estro y ovulación
Sus análogos:
* ↑ afinidad por receptor
* ↑ vida media
Cuáles son (3) y cómo actúan las
Gonadotropinas
en la sincronización de la ovulación
FSH, LH y eCG: inducen estro y ovulación
eCG: doble efecto FSH y LH
Cómo actúa la
Progesterona (o análogos)
en la sincronización de la ovulación
- Suprime secreción GnRH y por tanto FSH y LH
- Induce y sincroniza la ovulación
Cómo actúan las
Prostaglandinas (PGF₂α o análogos)
en la sincronización de la ovulación
Regresión del cuerpo lúteo
No sirve para controlar la reproducción de animales en anestro (no celo)
Cómo actúa la
Melatonina
en la sincronización de la ovulación
- Modifica la percepción del fotoperiodo
- En especies que se reproducen en días cortos: liberación GnRH
Tipos de
Inseminación Artificial
según el lugar de deposición del semen (3)
- Vaginal: fondo de vagina / inicio cérvix
- Transcervical: cuello útero
- Intrauterina: interior del útero
Diferentes formas de realizar la
Inseminación Artificial Intrauterina
en función del uso de anestesia (2)
- Con dispositivos especiales: sin anestesia
- Con laparoscopia: con anestesia
Particularidad de la
Laparotomía
en cuanto a la colocación del animal
Animal patas arriba
para evitar perforar órganos del torax
Factores que afectan a los resultados de la
Inseminación Artificial
(3)
- Lugar de deposición: según fisiología del cérvix de cada raza (longitud, anchura, nº pliegues)
- Tipo de muestra seminal (refrigerado / descongelado / sexado-descongelado)
- Nº espermatozoides/dosis seminal
Qué significa
MOET
y en qué consiste
Transferencia de Embriones tras Múltiples Ovulaciones
Producción de embriones a partir de hembra donante superovulada y transferirlos a una receptora
Objetivo: aumentar descendencia de hembras genéticamente mejores
Fases de la
Transferencia de Embriones
(5)
- Selección de donantes
- Superovulación de donantes
- Recolección y valoración de embriones
- Selección de receptoras
- Transferencia a receptoras
Selección de donantes en ET
Criterio de selección genético
Y método que se emplea para obtenerlo
Método BLUP - Modelo Animal (obtenemos índices genéticos fiables): nos indica la mayor posibilidad de evaluar los animales de forma correcta
Índice genético: indica lo que el animal transmite a la descendencia
Selección de donantes en ET
Criterios de selección NO genéticos
(4)
- Edad: vacuno 2-5 años (importante condición corporal)
- Estado fisiológico: intervalo parto-superovulación (vacas 3-4 meses, ovejas y cabras 2-5 meses)
- Alimentación: índice corporal 3,5 (ni gordas ni flacas)
- Estrés: cualquier factor estresante influirá negativamente en la superovulación
Superovulación de donantes en ET
Importante conocer que durante el ciclo estral existen ondas de…
Crecimiento folicular
Superovulación de donantes durante ET:
Frecuencia de administración de Gonadotropinas
eCG y FSH
- eCG: 1 inyección (vida media larga en sangre), 48 horas antes del final del tratamiento con progesterona.
- FSH: 2 dosis intramusculares diarias durante 4-5 días
Qué hormona puede producir
Retención de ovocitos y embriones en los oviductos
si se administra una dosis demasiado alta en la superovulación
Gonadotropinas
Con respecto a la relación FSH/LH
Qué puede ocurrir si hay un exceso de LH
en la superovulación de donantes (3)
- ↓ ovulación
- ↓ fecundación
- ↓ % embriones transferibles
Diferente duración y formas de aplicación (2) de
Progestágenos en diferentes especies
para controlar en celo en la superovulación de donantes
- CIDR: 9-11 días (vaca🐄)
- Esponjas vaginales: 12-14 días (oveja🐑)
Cuántos días tras la inseminación se realiza la
recolección de embriones
en vacas y ovejas
- Vacas: 5-7 días tras inseminación
- Ovejas: 6-7 días tras inseminación
Diferentes métodos de
recolección de embriones (o de transferencia de embriones a receptoras)
(3)
- Transcervical (no quirúrgico)
- Laparoscopia + laparotomía (quirúrgico)
- Laparoscopia (quirúrgico)
Son los mismos para recolectar o transferir
Qué nomenclatura tiene cada una de las 4 clases en
valoración de embriones
y qué porcentaje mínimo de la masa celular debe estar intacto y viable
- Excelente / buena 85% intacto y viable
- Regular 50%
- Pobre 25%
- Muerto / degenerado
3 Criterios empleados en la
selección de receptoras
en ET
- Edad: hembras jóvenes presentan tasas de gestación superiores a adultas
- Nutrición: buena condición corporal
- Estrés: evitar el estrés
Qué requisito deben cumplir receptoras y donantes para poder realizar la
transferencia del embrión
Deben estar sincronizadas, ya que el embrión transferido necesita un ambiente uterino lo más similar posible al que soportaba en la donante
Pasos en la laparoscopia + laparotomía para la
transferenia de embriones a receptoras
(2)
- Búsqueda del CU ipsilateral al ovario con CL
- Exteriorización del extremo del CU por una incisión de 2 cm y aplicación de los embriones
CU: Cuerno Uterino
CL: Catéter Líquido
Ipsilateral: más cercano a algo
2 Fases del
ciclo estral
y etapas que las componen (2 etapas cada fase)
Fase folicular
- Proestro
- Estro
Fase lútea
- Metaestro
- Diestro
