Tema 5.2. Selección del sexo Flashcards
Motivos por los que realizamos la
selección del sexo
(2)
- Valor económico significativo en la producción de leche y carne
- Incremento de la mejora genética
Nombres de los diferentes tipos de técnicas de
selección del sexo
según sean antes o después de la fecundación
- Después de la fecundación: pre-implantacionales (invasivas o no invasivas)
- Antes de la fecundación: separación de espermatozoides
Selección del sexo después de la fecundación:
Técnicas pre-implantacionales invasivas y no invasivas
(2 de cada)
INVASIVAS
* Análisis citogenético
* Detección de secuencias del cromosoma Y
NO INVASIVAS
* Detección del antígeno H-Y
* Cuantificación de enzimas ligadas al cromosoma X
Técnicas pre-implantacionales invasivas: en qué consiste el
Análisis citogenético
y qué desventajas tiene
Cariotipado: dimorfismos entre cromosomas X e Y
- Daño en zona pelúcida
- Difícil preparación
Técnicas pre-implantacionales invasivas: cuáles son los pasos (2) de la
Detección de secuencias del cromosoma Y
y cuales son las desventajas de cada uno
- Hibridación in situ (difícil preparación)
- PCR con primers específicos de Y (tener en cuenta tipo de célula, tamaño y método de biopsia (corte/aspiración))
Técnicas pre-implantacionales NO invasivas: distintas formas de
Detección del antígeno H-Y
en la membrana celular
- Citotoxicidad (Ab H-Y)
- Inmunofluorescencia directa (Ab 1º + Ab conjugado) Reacciones cruzadas
Técnicas pre-implantacionales NO invasivas: qué enzimas se emplean en la
Cuantificación de enzimas ligadas al cromosoma X
- G6PD
- galactosidasa
mayor nivel de expresión durante el desarrollo embrionario
Qué diferencias encontramos en los
espermatozoides de diferente sexo
(6)
- Morfología (no en todas las especies)
- Velocidad
- Sensibilidad al pH
- Carga eléctrica -
- Presencia de antígeno H-Y
- Contenido en ADN → Citometría de flujo
Cómo es el pH de un esperma X con respecto a un Y
X es más ácido
Cómo es la carga del esperma X con respecto al Y
X tiene más carga negativa
Quién determina el
sexo de la descendencia
¿el espermatozoide o el óvulo?
Espermatozoide
el óvulo es siempre X porque viene de una hembra XX
Pasos de la
separación de espermatozoides
(4)
- Dilución
- Tinción Hoechst 33342
- Análisis (citometría)
- Separación (según cargas)
Pureza media en la
separación de espermatozoides
90%
Formas de preservación del
esperma sexado
(2)
- estado líquido
- congelados
Eficacia en la
separación de espermatozoides
(espermatozoides / hora)
15 x 10⁶ espermatozoides / hora
Estrés debido a la
separación de espermatozoides
(5)
- Tiempo de separación
- Alta dilución
- Tinción nuclear
- Alta presión
- Exposición ultravioleta
Otras causas:
* Transporte al citómetro
* Almacenamiento de muestras separadas
* Congelación de muestras separadas
En ciervo, el sorting produce
Un efecto subletal
↑ % marcadores apoptóticos tras congelación-descongelación
Se puede sexar esperma Y con éxito en ciervo rojo
pero las muestras tienen una desventaja
Peor fertilidad in vivo que muestras convencionales
viabilidad corta, inseminación intrauterina cerca de la ovulación
Al sexar esperma Y en ciervo rojo
se obtuvo un mayor % de machos
en comparación con
- muestras convencionales
- muestras pasadas por citómetro pero no sexadas
Qué tipo de espectroscopía es la
espectroscopía de Raman
y en qué consiste
Espectroscopía vibratoria: analiza químico no invasivo, mediante luz, para excitar la muestra e interpretar estas interacciones después
En qué consiste el
efecto Raman
Se basa en la dispersión inelástica de la luz monocromática, que interacciona con la muestra y una pequeña parte cambia de longitud de onda, lo cual se puede detectar para obtener información de la muestra