TECNICAS HISTOLOGICAS Flashcards
¿Cuál es el primer paso en la técnica histológica de rutina?
Obtención de muestra (Biopsia o Necropsia).
¿Qué función tiene la fijación en la técnica histológica?
Evita la autólisis y preservar la muestra.
¿Cuáles son los fijadores químicos más comunes en microscopia óptica (MO) y electrónica (ME)?
• MO: Formaldehído
• ME: Glutaraldehído
¿Cuáles son los fijadores físicos más comunes en microscopia electrónica (ME)?
Congelación
¿Qué proceso se usa para eliminar el agua en la técnica histológica?
Deshidratación con alcoholes en concentraciones crecientes.
¿Cuál es el grosor aproximado del corte en un micrótomo?
5 µm
¿Cómo se cortan las muestras congeladas?
Se usan criostatos para realizar los cortes.
¿Qué dos colorantes se usan en la tinción histológica estándar?
Hematoxilina y eosina (H&E).
¿Qué tipo de carga tiene la eosina y con qué estructuras reacciona?
Carga neta negativa (ácida), reacciona a componentes catiónicos. (Proteínas, mitocondrias, citoesqueleto, fibras musculares, REL.)
¿Qué tipo de carga tiene la hematoxilina y con qué estructuras reacciona?
Carga neta positiva (básica), reacciona a componentes aniónicos. (Ácidos nucleicos, ribosomas (RER), aparato de Golgi, GAGs.)
¿Qué tinción se usa para hidratos de carbono?
PAS (ácido periódico de Schiff).
¿Qué tinción se usa para lípidos?
Sudán
¿Qué tinción se usa para tejido nervioso?
Técnica de Nissl, impregnación argéntica, técnica de osmio.
¿Qué técnica se usa para identificar células y tejidos mediante anticuerpos específicos?
Inmunohistoquímica
La tinción de ______ se utiliza para identificar lípidos en tejidos.
Sudán
El paso de la ______ permite que la muestra se endurezca en parafina y pueda cortarse en micrótomo.
Inclusión
¿Cuál de los siguientes métodos de tinción es útil para observar fibras elásticas?
a) Tricrómico de Mallory.
b) PAS.
c) Orceína.
d) Hematoxilina-eosina.
c) Orceína.
¿Qué es la histología?
Es el estudio de las estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo
¿Cuáles son los pasos principales en la preparación de una muestra histológica?
- Obtención de la muestra (biopsia, autopsia o necropsia).
- Fijación para conservar la estructura.
- Deshidratación y aclarado.
- Inclusión en parafina.
- Corte en secciones delgadas.
- Tinción para resaltar estructuras.
- Montaje para observación microscópica.
¿Cuál es el propósito de la fijación en la preparación de tejidos?
Preservar la estructura del tejido y prevenir la autólisis y descomposición.
¿Qué sustancia se utiliza comúnmente para la fijación de tejidos?
Formaldehído al 37% en solución acuosa, conocido como formalina
¿Por qué se realiza la deshidratación del tejido antes de la inclusión en parafina?
Para eliminar el agua del tejido y permitir que se infiltre con parafina, facilitando su corte.
¿Qué es la tinción de Hematoxilina y Eosina (H&E)?
Es una técnica de tinción donde la hematoxilina tiñe estructuras ácidas (como núcleos) de azul y la eosina tiñe componentes básicos (como citoplasma) de rosa.
¿Qué es la microscopía electrónica de transmisión (MET)?
Es una técnica que utiliza electrones para visualizar estructuras internas de las células con alta resolución.
¿Qué es la inmunocitoquímica?
Es una técnica que utiliza anticuerpos específicos para detectar antígenos en células o tejidos, permitiendo la localización de proteínas específicas.
¿Cuál es la función del montaje en la preparación de muestras histológicas?
Proteger y preservar la muestra teñida entre un portaobjetos y un cubreobjetos para su observación y almacenamiento.
¿Qué es la técnica de congelación en histología?
Es un método rápido de preparación de muestras donde el tejido se congela y se corta sin necesidad de inclusión en parafina.
¿Cuál es la diferencia entre biopsia y necropsia?
La biopsia es la obtención de tejido de un organismo vivo, mientras que la necropsia es la obtención de tejido de un organismo fallecido.
¿Qué es el aclarado en la preparación de tejidos?
Es el proceso de reemplazar el agente deshidratante por una sustancia miscible con parafina, como el xileno.
¿Cuál es la función principal del núcleo?
Contiene el material genético (ADN), regula la expresión génica y la replicación.
¿Qué sintetiza el nucleolo?
Sintetiza ARNr y ensambla ribosomas.
¿Cuál es la función de los ribosomas?
Sintetizan proteínas a partir del ARNm.
¿Qué sintetiza y modifica el RER (Retículo Endoplasmático Rugoso)?
Síntesis y modificación de proteínas para secreción o membranas.
¿Cuál es la función del REL (Retículo Endoplasmático Liso)?
Síntesis de lípidos, metabolismo de carbohidratos y detoxificación.
¿Qué hace el aparato de Golgi?
Modifica, empaqueta y distribuye proteínas y lípidos.
¿Cuál es la función de las mitocondrias?
Generan ATP por fosforilación oxidativa, regulan apoptosis.
¿Qué contienen los lisosomas?
Contienen enzimas digestivas para degradar macromoléculas y organelas dañadas.
¿Cuál es la función de los peroxisomas?
Metabolizan ácidos grasos y detoxifican sustancias (ej. H2O2).
¿Qué función tiene el citoesqueleto?
Mantiene la forma celular, permite el movimiento intracelular y la división celular.
¿Qué organizan los centrosomas/centriolos?
Organizan los microtúbulos y participan en la división celular.
¿Cuál es la función de la membrana plasmática?
Regula el intercambio de sustancias y comunicación celular.
¿Qué es el transporte intracelular de proteínas y otras moléculas?
Vesículas.
¿Qué función tienen los cilios y flagelos?
Movimiento celular y desplazamiento de fluidos extracelulares.
¿Qué tipo de orgánelas son aniónicos?
- ADN y ARN
- Proteínas ácidas
- Membrana plasmática
- Ribosomas
- Nucleoplasma
- Retículo Endoplasmático Rugoso (RER)
- Matriz mitocondrial
¿Qué orgánelas son catiónicos?
- Proteínas básicas
- Histonas
- Lisosomas
- Peroxisomas
¿Cuáles son los orgánelas neutros o variables?
- Aparato de Golgi
- Retículo Endoplasmático Liso (REL)
- Citoesqueleto
- Centrosoma/Centriolos
- Membrana plasmática (cara extracelular)
- Cilios y flagelos
Justificación: ¿Qué grupos en su estructura generan carga negativa en los aniónicos?
Grupos fosfato (-PO4) en su estructura.
¿Qué efecto tiene el pH bajo en los lisosomas?
Genera acumulación de protones (H+).
¿Qué es la diabologia?
Toldo de las estructuras microscópicas de los tejidos
La diabologia se refiere al estudio de las estructuras a nivel microscópico en los tejidos biológicos.
¿Cuál es el fundamento químico de la tinción?
Interacción de la afinidad de cargas (+/-)
Este principio es esencial para la visualización de estructuras celulares en histología.
¿Qué define el poder de resolución (d)?
Distancia mínima entre dos puntos del objeto que pueden ser visualizados separados por el respectivo objetivo
El poder de resolución es crucial para determinar la claridad de las imágenes en microscopía.
¿Qué es la necropsia?
Examen post-mortem de un organismo
La necropsia se realiza para determinar causas de muerte y estudiar enfermedades.
¿Qué implica la deshidratación en el proceso histológico?
Pasaje creciente en alcoholes
La deshidratación es fundamental para la preparación de muestras antes de la inclusión en resinas o para cortes.
¿Qué es el corte en histología?
Este proceso permite obtener secciones finas de tejido para análisis microscópico mediante un microtomo
¿Cuál es la función de la hematoxilina en la tinción?
Tinción de estructuras basofílicas
La hematoxilina tiñe componentes celulares que tienen carga negativa, como ácidos nucleicos.
¿Qué se utiliza para teñir lípidos en histología?
Sudán
El Sudán es un colorante específico para detectar la presencia de lípidos en las muestras.
¿Qué son los GAGS?
Glicosaminoglicanos
Los GAGS son componentes importantes en la matriz extracelular y en la estructura de tejidos conectivos.
¿Para que se utiliza para la impregnación argentica?
Se utiliza para visualizar fibras reticulares en tejidos
La impregnación argentica es una técnica especial que permite observar estructuras específicas en la histología.
¿Qué son los componentes de la inmunocitoquímica?
Anticuerpos específicos para localizar células y tejidos
Esta técnica es esencial para estudiar la expresión de proteínas en diferentes tipos celulares.
¿Qué carga tienen las proteínas basicas o cationicas?
Carga positiva
Estas proteínas tienden a unirse a estructuras con carga negativa en las células.
¿Qué es el citoesqueleto?
Estructura que proporciona soporte y forma a la célula
El citoesqueleto está compuesto por filamentos que permiten el movimiento celular y la organización interna.
¿Qué se observa en el aparato de Golgi?
Modificación y empaquetamiento de proteínas
El aparato de Golgi es crucial para la distribución de proteínas a diferentes partes de la célula.
¿Qué caracteriza a las mitocondrias?
Producción de energía celular
Las mitocondrias son conocidas como las ‘centrales energéticas’ de la célula debido a su papel en la respiración celular.
¿Qué tipo de carga tienen los ribosomas?
Carga negativa
Los ribosomas son esenciales para la síntesis de proteínas y tienen una carga que les permite interaccionar con otras estructuras celulares.
¿Qué son los ácidos nucleicos?
Contenidas en el ADN y ARN
Los ácidos nucleicos son las moléculas que almacenan y transmiten información genética en los organismos.
¿Qué es el LR (límite de resolución)?
La mínima distancia a que se puede ver dos puntos como separados
¿Cuál es el LR del ojo humano?
0,2 mm
¿Cuál es el LR de un microscopio óptico?
0,2 µm
¿Cuál es el LR de un microscopio electrónico?
0,2 nm
¿Cuál es la utilidad principal de un microscopio óptico?
Estudio de la estructura de tejidos y células
¿Cuál es la utilidad principal de un microscopio electrónico?
Estudio de la ultraestructura
¿Cuál es el principio de funcionamiento de un microscopio óptico?
Absorción de la luz
¿Cuál es el principio de funcionamiento de un microscopio electrónico?
Dispersión de los electrones
¿Qué tipo de iluminación utiliza un microscopio óptico?
Luz visible
¿Qué tipo de iluminación utiliza un microscopio electrónico?
Haz de electrones
¿Cómo son las imágenes obtenidas con un microscopio óptico?
Mayor, virtual e invertida
¿Cómo son las imágenes obtenidas con un microscopio electrónico?
Mayor, invertida y en blanco y negro
¿Se pueden observar tejidos vivos con un microscopio óptico?
Sí
¿Cuál es la técnica histológica de rutina más común?
Hematoxilina y Eosina (HyE)
La técnica HyE es fundamental para la observación de tejidos en microscopía óptica.
¿Qué reactivo se utiliza en la técnica de PAS?
Reactivo de Schiff
El reactivo de Schiff se utiliza para detectar carbohidratos en los tejidos.
Menciona tres tipos de técnicas tricrómicas
- Mallory
- Masson
- Van Gieson
Estas técnicas se utilizan para diferenciar componentes del tejido.
¿Cuál es el objetivo de la fijación en la técnica histológica?
Evitar la autolisis y preservar la estructura y composición celular
Es crucial para mantener la integridad del tejido durante el proceso.
¿Qué método de fijación se utiliza en inmunohistoquímica?
Fijación por congelación
Este método preserva la actividad de las enzimas y evita alteraciones antigénicas.
¿Cuáles son los pasos de la deshidratación en la técnica histológica?
- Pasajes en alcoholes de gradación creciente
- Sumerge en xileno
La deshidratación es necesaria para embebir el tejido en parafina.
¿Qué se utiliza para obtener secciones delgadas de tejido?
Micrótomo
Permite obtener cortes de tejido con un espesor de 5 micrómetros.
¿Qué se hace en la etapa de inclusión?
Imbibición en parafina o sintético análogo
Esta etapa es crucial para preparar el tejido para el corte.
¿Cómo se realiza la desparafina y hidratación del tejido?
- Quitar la parafina sumergiendo en xileno
- Hidratar con alcoholes de gradación decreciente
Esto es necesario para la posterior coloración de la muestra.
¿Cuál es un fijador químico comúnmente utilizado en microscopía óptica?
Formaldehído 4% P/V
Este fijador se utiliza por su eficacia en preservar la estructura celular.
¿Qué tipo de fijadores existen?
- Fijadores químicos
- Fijadores físicos
Ambos tipos tienen funciones específicas en la preservación del tejido.
Verdadero o Falso: La parafina es hidrofóbica.
Verdadero
Esto significa que no se mezcla con agua, lo que afecta la coloración.
¿Qué se debe evitar en un buen fijador?
- Extraer componentes químicos de las células
- Agregar elementos cristales
Estas condiciones son necesarias para mantener la integridad del tejido.
Completa la frase: Para observar el tejido con microscopía óptica, es necesario que se obtenga secciones delgadas de la muestra y para hacerlo el tejido debe ser ______.
embebido en parafina
Esto permite la observación clara de las estructuras celulares.
¿Qué se utiliza para el montaje de un tejido?
1 gota de Bálsamo de Canadá o sintético y un cubreobjeto
Se utiliza para preparar la muestra para observación.
¿Qué tipo de colorante es la hematoxilina y a qué se une en el tejido?
Es un colorante básico y posee carga positiva. Se une a sustancias con carga negativa como los ácidos nucleicos
Esto ocurre debido a la presencia de grupos fosfato en su composición.
¿Qué tipo de colorante es la eosina y a qué se une en el tejido?
Es un colorante ácido y posee carga negativa. Atrae a sustancias con carga positiva como las proteínas
Esto se debe a los grupos amino presentes en las proteínas.
¿Qué significa el concepto de basofilia?
Interacción entre la sustancia y el colorante que se tiñe de azul/violeta por colorantes básicos
Las estructuras teñidas por colorantes básicos presentan basofilia.
¿Qué significa el concepto de acidofilia?
Interacción entre la sustancia y el colorante que se tiñe de rojo/rosa por colorantes ácidos
Las estructuras teñidas por colorantes ácidos presentan acidofilia.
¿Qué estructuras presentan basofilia?
- Ácidos nucleicos
- Ribosomas
- RER
- Aparato de Golgi
- GAGS
Estas estructuras se tiñen de azul/violeta por colorantes básicos.
¿Qué estructuras presentan acidofilia?
- Proteínas
- Mitocondrias
- Citoesqueleto
- Fibras musculares
- REL
Estas estructuras se tiñen de rojo/rosa por colorantes ácidos.
¿Qué es el reactivo de Schiff y qué color toma al contacto con grupos aldehídos libres?
Es un reactivo que toma un color magenta intenso al contacto con grupos aldehídos libres
Se utiliza en las técnicas de PAS y Feulgen.
¿Cuál es el propósito de la técnica de PAS?
Visualizar los hidratos de carbono
Los hidratos de carbono no se tiñen con HyE debido a su carga neta nula.
¿Qué tipo de células se tiñen de magenta en la técnica de PAS?
Células caliciformes
Estas son glándulas de secreción glucoproteica que contienen hidratos de carbono.
¿Qué son las células caliciformes?
Son células que se tiñen pálidamente con la técnica de HyE o incluso pueden ser HyE negativas
Se encuentran en el epitelio y son responsables de la producción de moco.
¿Cuál es el propósito de la técnica de Feulgen?
Permite la demostración de ADN en el núcleo de las células
Se basa en la hidrolisis con ácido clorhídrico para liberar grupos aldehído que se tiñen con el reactivo de Schiff.
¿Qué permite visualizar la técnica de Sudán?
Visualización de lípidos
Se basa en la solubilidad diferencial de los sudanes en los lípidos.
¿Qué tres colorantes se utilizan en el tricrómico de Mallory?
- Fucsina ácida
- Azul de anilina
- Naranja G
Tiñe diferentes estructuras celulares en colores distintivos.
¿Qué tiñe el tricrómico de Masson de color fucsia?
El músculo
También tiñe los núcleos de azul y los citoplasmas de rojo.
¿Cuál es una técnica específica para el estudio del sistema nervioso?
Técnica de Nissl
Existen otras como la impregnación argéntica y las técnicas para mielina.
¿Qué son las técnicas inmunocitoquímicas?
Métodos que permiten localizar componentes químicos en células y tejidos mediante anticuerpos específicos
Se basan en la especificidad antígeno-anticuerpo.
¿Cuáles son los cuatro tejidos básicos del cuerpo humano?
- Tejido epitelial
- Tejido conectivo
- Tejido muscular
- Tejido nervioso
Estos tejidos tienen funciones específicas y características morfológicas diferentes.
¿Cuál es la función del tejido epitelial?
Cubre superficies corporales, reviste cavidades del cuerpo y forma glándulas
El tejido epitelial tiene un papel crucial en la protección y secreción.
¿Qué función cumple el tejido conectivo?
Otorga sostén estructural y funcional a los otros tejidos
Este tejido es fundamental para mantener la integridad de los órganos.
¿De qué está compuesto el tejido muscular?
Células contráctiles
Estas células permiten el movimiento del cuerpo y de los órganos internos.
¿Cuál es la función del tejido nervioso?
Recibe, transmite e integra información del medio interno y externo para controlar las actividades del organismo
Este tejido es esencial para la comunicación y el control del cuerpo.
Defina parénquima.
Porción funcional de un órgano constituida por las células y tejidos que realizan la función de dicho órgano
El parénquima es crucial para el funcionamiento específico de cada órgano.
Defina estroma.
Porción de sostén de un órgano, compuesta por células y tejidos que auxilian al parénquima
El estroma permite que el parénquima cumpla su función adecuadamente.
