Técnicas de biología molecular Flashcards

1
Q

En biología molecular, se conoce como astringencia

A

Al grado de interés o afinidad de la sonda por su ácido nucleico diana

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1
Q

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

A

Consiste en la replicación del DNA sin usar plásmidos ni vectores.

Requiere: dNTP (nucleotidos), cebadores (primers, iniciadores o oligonucleótidos), magnesio y potasio (Mg2+ es cofactor de la TaqPol), solución tampón o buffer, DNA polimerasa (TaqPol), DNA molde que se quiere amplificar. (y obviamente un termociclador)

Consta de 3 fases
1- Desnaturalización: Calentando el DNA a 95 ºC se separan las dos hebras.
2- Hibridación: Se une el oligo con su cadena complentaria.
3- Elongación: La TaqPol elonga la cadena a partir del oligo

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2
Q

PCR anidada o nestPCR

A

El producto de una amplificación es usado como molde para una segunda amplificación.

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3
Q

PCR multiplex o múltiple

A

PCR en la que se amplifican varias secuencias de DNA diferentes a la vez usando múltiples primers.

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4
Q

RT-PCR

A

PCR de transcripción inversa

Se basa en la transcripción inversa de una cadena de RNA en una cadena de DNA complementario (DNAc) y la posterior replicación de este.

No confundir con PCR en tiempo real o qPCR

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5
Q

qPCR

A

PCR en tiempo real o PCR cuantitativa.

Esta reaccion se basa en el uso de dNTP marcados con fluorocromos y la medición de la fluorescencia en uno o varios canales tras cada ciclo de replicación.

Puede ser cuantitativa o semicuantitativa.

No confundir con PCR de transcripción inversa o RT-PCR

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6
Q

Secuenciación de alto rendimiento o next-generation sequencing NGS

A

Técnica de secuenciación masiva para mapear los nucleótidos de grandes cantidades genoma.

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7
Q

Northern blot

A

Técnica de detección de moléculas de RNA de una secuencia dada en una mezcla compleja.

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8
Q

Western blot, inmunoblot o electrotransferencia

A

Técnica para identificar proteínas concretas en una mezcla compleja de proteínas.

Se basa en la separación de proteínas por electroforesis y luego la acción especifica de anticuerpos anti-proteína marcados.

Es la técnica usada para confirmación de VIH positivo.

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9
Q

Southern blot o hibridación Southern

A

Técnica para detectar la presencia de una secuencia concreta de DNA en una mezcla compleja de DNA.

Se basa en la separación del DNA por electroforesis en gel y su posterior hibridación con una sonda.

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10
Q

Hibridación in-situ cromogénica o CISH

A

Es una técnica que usa una hebra de DNA o RNA marcado para localizar un DNA o RNA específico en una muestra de tejido.

Es similar a la tecnica FISH pero esta es en el espectro visible en lugar de fluorescencia.

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11
Q

Hibridación fluorescente in-situ o FISH

A

Se usan sondas de DNA clonado que se unen de manera específica a cromosomas. La fluorescencia característica permite que la coloración sea selectiva.

Se puede usar para detectar alteraciones genéticas, aneuploidías, delecciones, etc

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