Citogenética Flashcards
Bandeo G
La digestión parcial con tripsina del cromosoma y la posterior tinción con colorante Giemsa. Las partes del cromosoma menos condensadas (eucromatina, con más genes y de transcripción más activa) aceptan menos colorante y aparecen claras y las más condensadas (heterocromatina, más compacta y con menos genes funcionales) aceptan más colorante y aparecen oscuras.
Bandeo R
Si los cromosomas se tratan con calor previo a la tinción de Giemsa las bandas claras o oscuras son opuestas a las que se obtienen por los bandeos G y Q. Es el método estándar en Europa.
Bandeo Q
Se usa una tinción fluorescente con mostaza de quinacrina y examen con microscopia de fluorescencia. Los cromosomas con heterocromatina se tiñen intensamente (similar al bandeo G)
Se usa específicamente para la tinción del cromosoma Y.
Bandeo C
Similar al bandeo G, pero con una denaturalización alcalina previa del DNA que permite teñir intensamente los centrómeros y regiones adyacentes y menos los cromosomas.
Bandeo de alta resolución
AKA bandeo de profase o prometafase
Bandeo G o R detenidos en una etapa temprana (profase o prometafase) cuando estos aun no se han condensado.
Bandeo NOR
Se utiliza el nitrato de plata y se tiñen las
regiones organizadoras nucleolares (tallos y satélites de cromosomas acrocéntricos).
El bandeo NOR es una técnica de tinción cromosómica que permite visualizar las regiones organizadoras nucleolares (NOR), que son las zonas donde se encuentran los genes que codifican el ARN ribosómico. Estas regiones se localizan normalmente en los brazos cortos de los cromosomas acrocéntricos. El bandeo NOR se realiza con nitrato de plata y puede revelar cambios en la actividad de los genes ribosómicos.
Cultivos celulares
- Se necesitan células capaces de crecer y dividirse con rapidez. Las más usadas son los linfocitos T.
- Se obtienen de una venopunción a la que se separa la capa leucocitaria.
- Los leucocitos se inoculan en un cultivo tisular y se estimulan con la adición de un mitógeno (fitohemaglutinina).
- Se incuba ~72horas y se agrega una solución de colchicina para interrumpir la división celular en metafase (afecta al huso mitotico).
- Con las células acumuladas en metafase se lisan con solución hipotónica y se liberan los cromosomas, que ahora se pueden fijar y teñir.
- Los cultivos celulares de linfos T tienen una vida media corta (3-4 días), para largo plazo de usan fibroblastos a través de biopsia cutánea, células fetales, …
Cariotipo/Cariograma
El cariotipo es una representación fotográfica de los cromosomas de una célula, clasificados por pares y según su tamaño. Se realiza generalmente para detectar anomalías cromosómicas y signos de enfermedades genéticas
En el cultivo de células de líquido amniótico, al hacer el subcultivo, la sustancia que se añade para
romper las uniones intercelulares y poder seleccionar un solo tipo celular, es
Tripsina
