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Histología > Técnica Histológica > Flashcards

Técnica Histológica Flashcards

1
Q

Serie de pasos con los que obtenemos muestras de tejidos que alguna vez estuvieron vivos

A

Técnica histológica

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Q

¿Qué requiere el estudio morfológico de los tejidos?

A
  • Obtención de muestras
  • Preparación de laminillas
  • Observación al microscopio
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Q

Conforman la técnica histológica

A
  • Obtención de muestras

- Preparación de laminillas

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4
Q

¿Cuál es el estudio de rutina?

A

Tinción con hematoxilina y eosina de muestras fijadas en formalina

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5
Q

Estudios especializados:

A
  • Histoquímica y citoquímica
  • Inmunocitoquímica y técnicas de hibridación
  • Radioautografía
  • Cultivo tisular y celular
  • Centrifugación diferencial
  • Técnicas especializadas de microscopia
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6
Q

Pasos de la técnica histológica

A
  1. Fijación
  2. Inclusión
  3. Corte
  4. Tinción
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7
Q

¿Qué son los artefactos?

A

Como repliegues o rebordes

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8
Q

¿Por qué es importante la fijación?

A
  • Abolir metabolismo celular
  • Impedir autólisis
  • Destruir microorganismos patógenos
  • Endurecer el tejido
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9
Q

Trata de mantener la misma estructura de las células cuando estaban vivas aunque ahora estén muertas

A

Fijación

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10
Q

VERDADERO O FALSO: Si la muestra no se fija bien, se puede volver a tratar de fijar

A

Falso

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11
Q

¿Cuál es el propósito de la fijación?

A

Llevar al microscopio un preparado en donde los tejidos estén perfectamente preservados, presentando la misma estructura y composición química que tenían cuando estaban vivos

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12
Q

¿Por qué el ideal de la fijación no se alcanza?

A

Porque en todos los preparados histológicos siempre se presentan ciertos artefactos como consecuencia del proceso que sufrieron

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13
Q

Factores físicos que se utilizan en la fijación para conservar la estructura

A
  • Calor: bacteriología

- Congelación

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14
Q

¿Qué hace el calor en las células eucariotas?

A

Desnaturaliza las proteínas

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15
Q

¿Cuál es el factor físico [fijación] que se usa en cirugías y es muy rápido?

A

Congelación

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16
Q

¿Cuál es la técnica estándar para fijar?

A

Química

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17
Q

Factores químicos que se usan en la fijación para conservar la estructura

A
  • Formaldheído*
  • Alcohol etílico
  • Ácido pícrico
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18
Q

Los enlaces cruzados se hacen en:

A

Fijación química

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19
Q

Acción mediante la creación de uniones covalentes entre las proteínas de un tejido

A

Fijación química

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20
Q

Pasos para la fijación química (enlaces cruzados)

A
  1. Proteínas solubles se anclan al citoesqueleto
  2. Adicionalmente, endurece el tejido
  3. Formaldehído, paraformaldehido: puentes entre residuos de lisina, reversible
  4. Glutaraldehído: deforma las estructuras alfa-hélice en las proteínas. No apto para tejido gruesos, irreversible. Amplio uso en microscopia electrónica
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21
Q

En la fijación química ¿qué hacen los precipitantes desnaturalizantes?

A

Reducen la solubilidad de las moléculas protéicas interrumpiendo las interacciones hidrofóbicas que dan estructura terciaria

por tanto, las proteínas (enzimas) ya no hacen su función

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22
Q

Se utilizan en fijación de muestras congeladas

A
  • Etanol

- Metanol

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23
Q

Técnica que se usa para una fijación más fina

A

AMEX

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24
Q

¿En qué consiste la técnica AMEX?

A

Acetona-Metilbenzoato-Xileno

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25
Q

Tipo de fijadores que raramente se usan solos a menos que se quiera estudiar ácidos nucléicos

A
  • Etanol
  • Metanol
  • Acetona
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26
Q

¿Con qué se pueden usar en conjunto etanol, metanol y acetona? Y ¿para qué?

A

Ácido acético

Para impedir el endurecimiento y encogimiento excesivo que se genera con alcohol, metanol o acetona solo

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27
Q

VERDADERO O FALSO: el fijador depende de lo que queramos ver

A

Verdadero

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28
Q

Se usan para ver la formación lipídica del tejido (membranas celulares, organitos membranosos)

A

Agentes oxidantes

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29
Q

[fijación química] los agentes oxidantes pueden reaccionar con… formando uniones que estabilizan la estructura tisular

A

Proteínas y otras biomoléculas

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30
Q

Ejemplos de agentes oxidantes

A
  • tetróxido de osmio - fijador secundario en ME

- Dicromato de potasio, ácido crómmico, permanganato de potasio

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31
Q

Principalmente se usan como fijadores secundarios, ya que solos pueden causar desnaturalización extensa y no penetran bien en secciones gruesas de tejido

A

Agentes oxidantes: tetróxido de osmio y dicromato de potasio

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32
Q

Otros tipos de fijadores químicos

A
  • Mercuriales
  • Pícratos
  • HOPE
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33
Q

El mecanismo de acción de este fijador es desconocido. Su uso aumenta el brillo de la tinción y permite un excelente detalle de núcleos. Se usa en la fijación de tejido hematopoyético y reticuloendotelial

A

Mercuriales

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34
Q

Este tipo de fijador reacciona con histonas y otras proteínas básicas para formar picratos cristalinos con aminoácidos y precipitar las proteínas. Preserva bien el glucógeno, extrae lípidos pero puede causar Basofilia en los tejidos

A

Pícratos

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35
Q

Este fijador es excelente para preservar antígenos en IHQ, buen mantenimiento de RNA y DNA

A

HOPE

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36
Q

¿Qué significa HOPE?

A

Hepes-glutamic acid buffered-mediated organic solvent protection effect

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37
Q

Factores que pueden interferir con la fijación

A
  • pH
  • Osmolaridad
  • Tamaño de la muestra
  • Volumen
  • Temperatura
  • Duración
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38
Q

Rango de pH que se debe de tener en la fijación

A

7.2 - 7.4

se debe de mantener en rangos fisiológicos [normales]

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39
Q

¿Qué pasa en las soluciones hipertónicas?

A

Encogimiento celular

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40
Q

El edema celular sucede en…

A

Soluciones hipotónicas

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41
Q

El tamaño de la muestra debe de ser:

A

<0.5cm3 → grosor suficiente para que el fijador pueda entrar

42
Q

El volumen debe de ser…

A

15 veces el volumen de la muestra

43
Q

Las temperatura debe de ser…

A

Ambiente

44
Q

¿De cuánto es la duración?

A

1 hora / 1mm de tejido

normalmente nos llevamos 5 horas de fijación

45
Q

Prepara el tejido para corte

A

Inclusión

46
Q

¿En qué consiste el tren alcohol-xilol-parafina

A
  • alcohol = deshidratación
  • Xilol = aclarado (se saca el alcohol y se reemplaza con xilol)
  • parafina = reemplaza las moléculas de xilol
47
Q

VERDADERO O FALSO: el alcohol es miscible en parafina

A

Falso

48
Q

¿Qué se usa para cortar las muestras?

A

Microtomo

49
Q

Las laminillas ¿cuánto tienen de grosor?

A

5-15 μm

50
Q

¿A cuántos grados se derrite la cera?

A

64°C

51
Q

¿Qué es la coloración?

A

Proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante, sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado para preparar la solución de tinción

52
Q

Sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos

A

Colorantes

53
Q

Componentes de los colorantes

A
  • Esqueleto incoloro
  • Cromóforo
  • Auxocrómo
54
Q

Propiedad de los colorantes que posee un anillo aromático de benceno

A

Esqueleto incoloro

55
Q

Propiedad de los colorantes que aporta el ,,color”

A

Cromóforo

56
Q

Propiedad de los colorantes que es lo que hace que se una a elementos del tejido

A

Auxocrómo

57
Q

COMPLETA:

La mayoría de los colorantes usados en histología se comportan como _______ o ________ y tienden a formar ______________________________________________________

A

Ácidos; bases

sales con los radicales ionizables presentes en los tejidos

58
Q

Colorante presente en el citoplasma

A

Eosina

59
Q

Colorante presente en el núcleo

A

Hematoxilina

60
Q

¿Con qué reaccionan los colorantes básicos?

A

Con los componentes aniónicos (tienen carga negativa)

[esto es porque las bases tienen carga positiva, entonces se unen a componentes con carga negativa]

61
Q

Ejemplo de componentes aniónicos y rxn con colorantes básicos

A

Grupos fosfato de los ácidos nucléicos, grupos sulfato de los glucosaminoglucanos

62
Q

¿Con qué reaccionan los colorantes ácidos?

A

Con los componentes catiónicos de las células (son positivos)

63
Q

Pierde electrones, tiene carga positiva

A

Catión

64
Q

Gana electrones, tiene carga negativa

A

Anión

65
Q

¿Qué es acidófilo?

A

Afín al colorante ácido

66
Q

¿Qué es basófilo?

A

Afín al colorante básico

67
Q

¿Qué estructuras son acidófilas?

A
  • citoplasma
  • Pared celular
  • Colágeno
  • Tejido conjuntivo
  • Estructuras que rodean y sostienen a la célula
68
Q

¿Qué estructuras son basófilas?

A
  • ribosomas
  • Cromatina
  • Material genético dentro del núcleo
69
Q

¿De dónde se extrae la hematoxilina?

A

Haematoxylum campechianum.

70
Q

VERDADERO O FALSO: la hematoxilina es estrictamente un colorante básico

A

Falso, se usa con un mordiente (intermediario) no se une por enlace electrostático

71
Q

La hematoxilina es ideal cuando…

A

Le siguen tinciones acuosas ácidas

72
Q

¿Cómo se produce la eosina?

A

Mediante una rxn entre la bromina y la fluoreceina

73
Q

Variantes de la eosina

A
  • Eosina Y (amarillenta)

- Eosina B (azul)

74
Q

Variante de eosina más usada

A

Eosina Y

75
Q

VERDADERO O FALSO: alcohol y agua son miscibles entre ellos

A

Verdadero

76
Q

¿De qué color pinta hematoxilina?

A

Morado, es base

77
Q

¿De qué color pinta eosina?

A

Rosa, es ácida

78
Q

¿De qué color son: núcleos, citoplasma, colágena I, rRNA con H&E?

A
  • Núcleos = morado
  • Citoplasma = rosa
  • Colágena I = rosa
  • rRNA = morado
79
Q

Otras tinciones aparte de H&E

A
  • tricrómico de Masson
  • PAS
  • Carmín de Best
  • Feulgen
  • Azul de toluidina
  • Argentafines y argilófilas
80
Q

Con tricrómico de Masson de qué color se ven: núcleos, músculo, colágena, citoplasma

A
  • núcleos = café
  • Músculo = rojo
  • Colágena = azul
  • Citoplasma = rojo
81
Q

¿Qué tiñe PAS?

A

Carbohidratos y biomoléculas ricas en carbohidratos

82
Q

¿De qué color tiñe PAS?

A

Magenta

83
Q

Estructuras que son ricas en carbohidratos

A
  • glucógeno
  • Moco
  • Membrana basal subyacente a epitelios
  • Fibras reticulares
84
Q

Carmín de Best tiñe principalmente…

A

Zonas ricas en glucógeno

85
Q

Con carmín de best, de qué color se ven los núcleos y el glucógeno

A
  • núcleos = azul

- Glucógeno = rojo

86
Q

¿Para qué sirve la tinción de Feulgen?

A

Ver ácidos nucléicos

87
Q

¿De qué color se ven los ácidos nucléicos y el fondo en la tinción de Feulgen?

A
  • Ácidos nucléicos = magenta

- Fondo = verde

88
Q

¿De qué color se tiñen las estructuras con azul de toluidina? (Núcleo, citoplasma, eritrocitos, colágeno, gránulos mastocitos)

A
  • Ńúcleo = azul
  • Citoplasma = azul
  • Eritrocitos = azul
  • Colágena = azul
  • Gránulos mastocitos = púrpura
89
Q

Metacrosoma…

A

Cambio de color en zonas de tejidos con presencia de polianiones (se terminan viendo de otro color)

90
Q

Estas tinciones dependen de la presencia en el tejido de grupos fenólicos (catecolaminas o indolaminas) que reducen las sales de plata (u otros metales)

A

Argentafines

91
Q

En estas tinciones se añade un agente reductor como la hidroquinona o la formalina

A

Argilófilas

92
Q

Tanto las argentafines como las argilófilas se usan para:

A
  • células neuroendrocrinas
  • Fibras de reticulina
  • Melanina
93
Q

¿Dónde están las fibras elásticas?

A

Tejido conectivo

94
Q

Tinciones para ver fibras elásticas

A
  • Verhoeff
  • Reyes
  • Orceína
  • Fuscina resorcina
95
Q

Ejemplo de tinción especializada del estudio tisular

A

Inmunohistoquímica

96
Q

¿Qué es un antígeno?

A

Molécula que puede ser reconocida por el sistema inmune

Mayormente son proteínas

97
Q

¿Qué es la inmunohistoquímica?

A

Reacción de un antígeno con un anticuerpo

98
Q

Método directo de inmunohistoquímica

A

Se marca el anticuerpo específico. Donde se pega el anticuerpo se colorea

99
Q

Método indirecto inmunohistoquímica

A

Se marca un anticuerpo común contra un epítopo común del anticuerpo específico

100
Q

¿Qué es PCNA en inmunohistoquímica?

A

Es cuando se pueden observar a las células en proliferación

101
Q

¿Qué es la hibridación in situ?

A

Cuando buscamos un gen

Histología (10 decks)

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