Stratégie d'amélioration des AcM Flashcards
Ac les plus fréquemment utilisés en thérapeutique ?
Comment choisir quel Ac à produire ?
IgG : 4 sous-classes = Ig1 - Ig2- Ig3- Ig3
dualité fonctionnelle :
- Fab lie l’antigène
- FcR est reconnu par la cellule FcR positive
• Les récepteurs au fragments Fc des IgG n’ont pas les mêmes effets
-Fc γ IIb (CD32b) est un inhibiteur alors que les autres FcγR seront activateurs
- La liaison Fc γ à son récepteur n’a pas la même affinité : souvent faible sauf pour FcγRI (CD64) qui n’est les seul à ne pas être sujet au polymorphisme. (les autres en ont)
- Distributions cellulaires différentes
=> compréhension du mécanisme d’action des Ac thérapeutiques ainsi que les variations interindividuelles chez les malades
- Masse moléculaire : IgG3 légèrement plus importante
- concentration sérique : IgG1 la + importante
- demi-vie : 21 jours (sauf pour Ig3 qui peut être inférieure)
-reconnaissent différents types d'Ag IgG1 : principalement Ag protéiques IgG2 : polysaccharides +++ IgG3 : Ag protéiques IgG4 : Protéiques et Allergènes
-activent plus ou moins le complément
=> IgG1 ++
=> IgG3 : +++
- forte affinité des fixations des IgG1 à tous les récepteurs FcγR (y compris FcRn qui permet le recyclage). Moindre affinité pour le Fc γIIb/c (CD32b = le seul FcγR inhibiteur)
=> En fonction du mécanisme d’action rechecrhé, l’Ac thérapeutique à produire sera différent
Pourquoi améliorer les AcM théapeutiques ?
- diminuer l’immunogénicité
- augmenter l’affinité pour la cible
- améliorer les propriétés pk
- amélirer l’activité thérapeutique
Stratégies pour modifier ces propriétés ?
1) Ingénierie Fab pour augmenter l’affinité pour la cible
- cribalge, sélection d’Ac ayant une région Fab mutée
- puis tests in vitro : détermination de l’impact sur les affinités pour la cible
2) Ingénierie de la région Fc
- criblage et sélection d’Ac ayant une région Fc mutée
- tests in vitro : détermination de l’impact sur les propriétés biologiques
=> modifictaion de la glycosylation de la région Fc des Ac IgG1 pour augmenter l’ADCC des IgG1 monoclonales humaines
- absence de fucose
- présence de galactose +/- acide sialique à l’extrémité de GlcNAc terminale
- présence d’une GlcNAc intercalaire
Biobetters du rituximab ?
-amélioration de la tolérance par humanisation
ex : veltuzumab, ofatumumab
-amélioration de l’efficacité
(ex : obinituzumab)
↪ glyco-ingénierie (Fc) : moduler la capacité ADCC
↪ augmenter l’affinité pour l’antigène (Fab)
Obinutuzumab : biobetter ? :
-amélioration de l’efficacité et de la tolérance
=> technologie GlycoMab - AcM non fucosylé = liaison Fc γ R modifiée
→ augmente la capacité d’ADCC du fragment Fc
=> anti-CD20 humanisé
→ diminution de l’immunogénicité
=> mécanisme d’action : toujours le même épitope mais configuration 3D différente (mécanisme de type II : laisse les CD20 distribuées sur toute la surface des cellules B)
→ induction mort directe plus élevée (↑ CDC)
- infections et évènement hémorragiques équivalente
⚠ incidence neutropénies et thrombopénies supérieure
⚠ incidence de réactions liées à la perfusion supérieures : déplétion LB hyper rapide explique cet EI
AMM 2014
Fragments monovalents
✯ Fragments monovalents fragments Fv (domaine VH associé à un domaine VL)
+ accès à la cible plus facile : ciblage plus efficace
+ immunogénicité faible, grande capacité à diffuser dans les tissus
- 1 seul site de liaison or augmentation de la valence permet d’accroître leur affinité grâce au phénomène d’avidité
- t1/2 très courte
-dissociation à faible concentration (pas de liaison covalente)
↪ stabilisation par un peptide de liaison
=> (scFv : Fv avec un peptide de liaison)
✯ DsAb = single domain antibody ou Nanobody
→ un seul domaine variable : bonne affinité et spécificité
AcM bispécifiques
+ capables de se lier de façon simultanées à 2 antigènes différents
+ petite taille des fragments scFv => uniét de base pour contruire des molécules + élaborées
=> plus facile de produire des Ac bivalents (2 sites de liaisons contre un même épitope)
ou
=> Ac bispécifiques (se lie à 2 antigènes différents)
… bispécifiques, trispécifiques
Production des anticorps bispécifiques ?
1) ingénierie cellulaire : hybridome produit potentiellement des Ac bispécifiques
2) ingénierie biochimique : liaison entre 2 F(ab)’
3) ingénierie moélculaire
Séquences insérées dans un vecteur lui-même inséré dans des cellules
productrices de protéine recombinante (ex : cellules CHO). On insère le fragment variable de la chaîne lourde et de la chaîne
légère et in fine la cellule productrice produit des fragments variables qu’on relie par la suite via une liaison peptidique.
Aujourd’hui on utilise beaucoup l’ingénierie moléculaire.
blinatumomab
- anticorps bispécifique produit par CHO par la technique de l’ADN recombinant
- cible CD19 et CD3 (lymphome B non hodginien en rechute après traitement standard)
2 gènes recombinants
- 1 gène codant pour la chaîne lourde scFv de CD19 + linker + chaîne légère de scFv de CD3
- 1 gène codant pour la chaîne lourde scFv de CD3+ linker + chaîne légère de scFv de CD19
AcM couplés
=> immunoconjugué propriétés additionlles conférées aux AcM thérapeutiques par couplage à des agents actifs tels que -toxines -radioisotopes -agents biologiques -cytotoxiques ou encore des enzymes
+efficacité repose sur l’agent couplé : l’Ac joue le rôle de vecteur
+ majoration de la toxicité locale, limitation des effets secondaires systémiques
- dégrédation des drogues par les lysosomes après endocytose
- résistance à la chimiothérapide des cellules tumorales
application en cancérologie
- toxines
- chimiothérapies
- radio-isotopes émetteurs de particules bêta -
difficulté pour standardiser la dose de cytotoxique
=> peu d’application en clinqiue
MECANISME D’ACTION
- des AcM couplés immunodrogues et immunotoxines
-Fixation de l’Ac au récepteur par Fab
-Endocytose : pH = 6
-Dégradation dans le lysosome : pH = 4
-Relargage dans le cytoplasme du médicament
=> effets cytotoxiques: inhibition de la synthèse protéique - des AcM radioisotopes
- capables d’irradier efficacement des cellules tumorales voisines de celles sur lesquelles ils sont fixés mais qui n’expriment pas l’antigène tumoral spécifique de l’anticorps radiomarqué
=> rayons bêta moins suscite le plus d’intéret : longueur de parcous convent pour le traitement de tumeurs volumineuses > 0,5 cm et/ou mal vascularisées
(yttrium 90 et iode 131 utilisés)
=> rayons alpha pour les petites tumeur
+ signal détectable par imagerie (scintigraphie)
+ irradiation localisée et dose plus faible que par externe
- persistance radionucléide (t1/2 augmente) : risque de lyélosuppression
- toxicité rénale potentielle par accumulation radionucléide
exemple : ZEVALIN - Ibritumomab tiuxétan - cible CD20
lymphome non hodkinien
traitement de consolidation
Intrabodies
Fragment d’anticorps ont été exprimés dans des cellules tumorales et dans des cellules infetées par des virus pour bloquer ou moduler les fonctions de protéines intracellulaires (intrabodies)
rien de validé à ce jour
