Staphylococcus et Streptococcus (Microbiologie) Flashcards
Quelles sont les genres de Micrococcaceae
- Staphylococcus2. Micrococcus3. Planococcus4. Stomatococcus
Gram des Staphylococcus aureus
Positif
Gram des Staphylococcus epidermidis
Positif
Gram des Staphylococcus saprophyticus
Positif
Gram des Micrococcus luteus
Positif
Morphologie des Staphylococcus aureus
Cocci
Morphologie des Staphylococcus epidermidis
Cocci
Morphologie des Staphylococcus saprophyticus
Cocci
Morphologie des Micrococcus luteus
Cocci
Grosseur sur gélose sang des Staphylococcus aureus
Moyenne
Grosseur sur gélose sang des Staphylococcus epidermidis
Moyenne
Grosseur sur gélose sang des Staphylococcus saprophyticus
Moyenne
Grosseur sur gélose sang des Micrococcus luteus
Petite
Couleur des Staphylococcus aureus
Blanche
Couleur des Staphylococcus epidermidis
Blanche
Couleur des Staphylococcus saprophyticus
Blanche dans le contrôle mais jaunâtre chez les patients
Couleur des Micrococcus luteus
Jaune
Hémolyse des Staphylococcus aureus
bêta
Hémolyse des Staphylococcus epidermidis
Non-hémolytique
Hémolyse des Staphylococcus saprophyticus
Gamma
Hémolyse des Micrococcus luteus
Non-hémolytique
Staphylococcus aureus sur MacConkey
Inhibé
Staphylococcus epidermidis sur MacConkey
Inhibé
Staphylococcus saprophyticus sur MacConkey
Inhibé
Micrococcus luteus sur MacConkey
Inhibé
Type respiratoire du Staphylococcus aureus
- aérobie2. anaérobie facultative
Type respiratoire du Staphylococcus epidermidis
- aérobie2. anaérobie facultative
Type respiratoire du Staphylococcus saprophyticus
- aérobie2. anaérobie facultative
Quels sont les tests de routine fait sur Staphylococcus aureus?
- catalase (positif)2. coagulase (positif)3. DNase (positif)4. novobiocine sur l’urine (sensible)
Quels sont les tests de routine fait sur Staphylococcus epidermidis?
- catalase (positif)2. coagulase (négatif)3. DNase (négatif)4. hypersalé (pousse mais couleur blanche)5. novobiocine (sensible)
Quels sont les tests de routine fait sur Staphylococcus saprophyticus?
- catalase (positif)2. coagulase (négatif)3. DNase (négatif)4. hypersalé (positif)5. novobiocine (résistant)
Quels sont les tests de routine fait sur Micrococcus luteus%?
- catalase (positif)2. coagulase (positif)3. DNase (négatif)4. oxydase (positif)5. bacitracine (résistant)
O-F glucose sur Staphylococcus epidermidis
Fermentatif
O-F glucose sur Micrococcus luteus
Oxydatif
Site d’isolement des Staphylococcus aureus
- sang2. voies respiratoires supérieures3. plaies profondes et cavités4. tractus gastro-intestinal5. LCR
Site d’isolement du Staphylococcus epidermidis
Aux cathéters
Site d’isolement du Staphylococcus saprophyticus
Dans l’urine surtout des jeunes filles actives sexuellement
Site d’isolement du Micrococcus luteus
Pas considéré pathogène
Facteurs virulentes des Staphylococcus aureus
- entérotoxines: causes diarrhée et vomissement2. syndrome du choc toxique3. toxine cytolytique4. enzymes: coagulase, protéase, lipase, DNase5. Protéine A
Infections causées par Staphylococcus aureus
- infections de la peau: folliculite, abcès cutané2. syndrome du choc toxique3. nécrolyse épidermique toxique (mortel)4. intoxication alimentaire5. impétigo
Pouvoir pathogène des Staphylococcus epidermidis
- cathéter2. implantations médicales3. thérapie immunosupresseur4. shunt du LCR
Pouvoir pathogène du Staphylococcus saprophyticus
Associé avec des infections urinaires cherz les jeunes femmes.
Pouvoir pathogène du Micrococcus luteus
Il n’est pas souvent responsable pour des infections
Nature de la gélose sang
Solide
Couleur de la gélose sang
Rouge-cerise
Présentation de la gélose sang
Pétri
Méthode d’ensemencement de la gélose sang
Par épuisement
Atmosphère de la gélose sang
O2 et CO2
Température de la gélose sang
35oC
Durée d’incubation de la gélose sang
24-48 heures
Type de la gélose sang
Enrichie
Indicateur de pH de la gélose sang
Aucun
Inhibiteur de la gélose sang
Aucun
Intérêt diagnostique de la gélose sang
Différencier les types d’hémolyse.
Principal ingrédient de gélose sang
5% de sang de mouton
Nature de la gélose MacConkey
Solide
Couleur de la gélose MacConkey
Rose-violet
Présentation de la gélose MacConkey
Pétri
Méthode d’ensemencement de la gélose MacConkey
Par épuisement
Atmosphère de la gélose MacConkey
O2
Température de la gélose MacConkey
35oC
Durée d’incubation de la gélose MacConkey
24-48 heures
Type de la gélose MacConkey
Sélectif et différentiel
Indicateur de pH de la gélose MacConkey
Rouge neutre1. acide: rouge2. basique: jaune
pH final de la gélose MacConkey
7.1
Inhibiteurs de la gélose MacConkey
- sels biliaires2. violet de cristal
Inhibition de la gélose MacConkey
- la plupart des bactéries Gram positif - bacilles Gram négatifs à croissance difficile- voile du Proteus
Fermentation du lactose de la gélose MacConkey
Fermentation: colonie roseNon fermentation: colonie incolore ou transparente
Intéret diagnostique de la gélose MacConkey
Très utilisé dans l’identification des bactéries entériques.
Nature de la gélose XLD
Solide
Couleur de la gélose XLD
Rouge-orangé
Présentationde la gélose XLD
Pétri
Méthode d’ensemencement de la gélose XLD
Par épuisement
Atmosphère de la gélose XLD
O2
Température de la gélose XLD
35oC
Durée d’incubation de la gélose XLD
18-24 heures
Type de la gélose XLD
Sélectif et différentiel
Indicateur de pH de la gélose XLD
Rouge de phénol1. acide: jaune2. basique: rouge
pH final de la gélose XLD
7.4
Indicateur de H2S de la gélose XLD
- citrate d’ammonium ferrique2. thiosulfate de sodium
Inhibiteur de la gélose XLD
Désoxycholate de sodium
Inhibition de la gélose XLD
Bactéries Gram positif
Quels sont les colonies jaunes de la gélose XLD
Les colonies faisant partie de la flore normale.
Quels sont les colonies incolores ou rouges de la gélose XLD
Bactéries pathogènes dans les selles.
Quels sont les colonies incolores transparentes de la gélose XLD
Ne dégrade aucun sucre
Quels sont les colonies rouges de la gélose XLD
Dégradation possible du xylose et dégradation de la lysine.
Centre noir de la gélose XLD
H2S positif
Intéret clinique de la gélose XLD
Recommandé pour l’isolation et la différentiation des bactéries pathogènes dans les spécimens de selles.
Nature de la gélose SS
Solide
Présentation de la gélose SS
Pétri
Méthode d’ensemencement de la gélose SS
Par épuisement
Atmosphère de la gélose SS
O2
Température de la gélose SS
35oC
Durée d’incubation de la gélose SS
24-48 heures
Type de la gélose SS
Sélectif et différentiel
Indicateur de pH de la gélose SS
Rouge neutre1. acide: rouge2. basique: jaune
pH final de la gélose SS
7.0
Indicateur de H2S de la gélose SS
- citrate ferrique2. thiosulfate de sodium
Inhibiteur de la gélose SS
- sels biliaires2. vert brillant
Inhibition de la gélose SS
- la plupart des bactéries Gram positif2. le voile de Proteus
Colonie rose sans centre noir de la gélose SS
Lactase positif, H2S négatif
Colonie rose avec centre noir de la gélose SS
Lactase positif, H2S positif
Colonie incolore sans centre noir de la gélose SS
Lactase négatif, H2S négatif
Colonie incolore avec centre noir de la gélose SS
Lactase nétagif, H2S positif
Intérêt clinique de la gélose SS
Isolation primaire et identification des bacilles entériques pathogènes, plus particulièrement des Salmonella à partir des spécimens de selles.
Nature de la gélose sang Columbia
Solide
Couleur de la gélose sang Columbia
Rouge-cerise
Présentation de la gélose sang Columbia
Pétri
Méthode d’ensemencement de la gélose sang Columbia
Par épuisement
Température de la gélose sang Columbia
35oC
Durée d’incubation de la gélose sang Columbia
24-48 heures
Type de la gélose sang Columbia
Enrichi
Indicateur de pH de la gélose sang Columbia
Aucun
Indicateur de H2S de la gélose sang Columbia
Aucun
Inhibiteur de la gélose sang Columbia
Aucun
Intérêt clinique de la gélose sang Columbia
- Différencier les types d’hémolyses2. utilisés pour faire des API strep.
Habitat naturel des Staphylococcus
- Dans la nature (sol, eau, air)2. Cutanée3. Épithélium nasal
Combien d’espèces de Staphylococcus infectent les humains.
20 espèces
Quels sont les espèces de Staphylococcus les plus significatifs?
- Staphylococcus aureus2. Staphylococcus epidermidis3. Staphylococcus saprophyticus
Quels sont les infections superficielles que les Staphylococcus aureus peuvent causer?
- impétigo2. folliculite3. abscès4. furoncles
Quels sont les infections profondes que les Staphylococcus aureus peuvent causer?
- endocardite2. méningite3. pneumonie4. syndrome du choc toxique
Quel type de bactérie est le Staphylococcus aureus
Il est pathogène opportuniste de la flore normale.
Quels sont les modes de transmission du Staphylococcus aureus?
- à partir d’un porteur sain au niveau des narines2. par contact de personne à personne3. par contact de sécrétions purulentes ou de lésions avec écoulement4. par ingestion d’aliments contenant de l’entérotoxine staphylococcique5. par contact mère-enfant
Précaution de transport du Staphylococcus aureus
Ils résistent bien aux variations de température et à la dessication donc aucune précaution spéciale.
Les Staphylococcus aureus sont inhibés par quelle gélose?
MacConkey et SS
Sur quels milieux nutritifs croissent les Staphylococcus aureus?
- TSA2. BHI3. MH4. milieu enrichie
Sur quels milieux sélectives croissent les Staphylococcus aureus?
- PEA2. CNA
Les Staphylococcus aureus ont la capacité de croitre à quelle température?
Entre 10-45oC avec 35oC la température optimale.
Quelles sont les caractéristiques communes à toutes les espèces de Staphylococcus?
- Forme: cocci en amas irréguliers2. Catalase: positive3. Oxydase: négative4. Fermentation: glucose5. Sel: jusqu’à 12%6. Mobilité: immobile
Le Staphylococcus aureus produit et libère plusieurs enzymes:
- coagulase liée2. coagulase libre3. fibrinolysine ou staphylokinase4. hyaluronidase5. protéase6. lipase7. nucléase
Le Staphylococcus aureus produit et libère plusieurs toxines:
- hémolysine2. leucocidines3. entérotoxines4. toxine du choc toxique5. toxine exfoliatrices A et B
Quel est le pouvoir pathogène des Staphylococcus à coagulase négative?
Ils produisent et libèrent peu de toxines et d’enzymes.
Quand les Staphylococcus à coagulase négative sont-ils significatifs?
- dans les spécimens normalement stériles2. dans les cathéters
MRSAn
Staphylococcus aureus résistant à la méthiciline nosocomiale (développé dans les hopitaux).
Une épidémie de MRSAn peut se développé où?
- en pouponnière2. dans l’unité des grands brulés3. dans les unités de soins chirurgicaux et autres procédures invasives
MRSAc
Staphylococcus aureus résistant à la méthiciline communautaire.
Combien d’espèces de Micrococcus existe-il?
9 espèces
Quels sont les espèces de Micrococcus les plus courantes?
- Micrococcus luteus2. Micrococcus varians
Habitat du Micrococcus
- dans la nature2. au niveau de la peau et des muqueuses des humains et des animaux
Gram des Micrococcus
Cocci en tétrade ou en paire.
Oxydase des Micrococcus
Positive
Quels sont les tests performés au laboratoire (Staphylococcus)?
- KOH 3%2. Catalase3. Coagulase4. DNase5. Thermonucléase DNase test6. Thermonucléase7. Disques d’identifications8. Sensibilité à la novobiocine9. Sensibilité à la furazolidone10. Oxydase modifiée11. Staphaurex12. Staphylase
Utilité du test KOH 3%
Méthode rapide pour différencier les bactéries Gram positif des bactéries Gram négatives.
Le test KOH 3% est basé sur:
Les différences biochimiques de la paroi cellulaire bactérienne.
Le principe du test KOH 3%?
- La paroi cellulaire des bactéries Gram est facilement brisée quand on l’expose à une solution alcaline diluée2. La suspension des Gram négatifs lorsque exposée à la solution de KOH 3% devient alors visqueuse, contrairement aux bactéries Gram positif où ce phénomène n’est pas détecté
Réactif du test KOH 3%
Solution de KOH à 3% conservé dans une bouteille brunâtre au réfrigérateur.
Interprétation du test KOH 3%
- positif: apparition d’un fil visqueux2. négatif: absence d’un fil visqueux
Limites du test KOH 3%
Il peut arriver qu’on obtienne des résultats faussés avec les bactéries anaérobiques.
Catalase
Une enzyme qui décompose le peroxyde d’hydrogène en oxygène et en eau. Elle est similaire à la structure de l’hémoglobine mais les 4 atomes de fer sont à l’état oxydé (Fe+++) et non réduit (Fe++)
Qu’est ce qui contient la catalase?
La plupart des bactéries aérobies et anaérobies facultatives sauf les Streptococcus.
Qu’est ce que les Streptococcus contiennent à la place du catalase?
Une peroxydase, similaire à la catalase mais n’ayant qu’un atome de fer par molécule.
Le test de catalase est surtout utilisé pour?
Différencier les Streptococcus qui possèdent une peroxydase (catalase négative) des Staphylococcus qui possèdent une catalase.
Principe du test de catalase?
Chez certaines bactéries, la respiration peut conduire à la production d’H2O2, lorsque la flavoprotéine est présente dans la chaine respiratoire. Cette protéine s’oxyde directement au contact de l’air pour produire du H2O2.
Pourquoi des bactéries doivent posséder une catalase ou une peroxydase?
La peroxydase d’hydrogène ne peut s’accumuler dans les cellules bactériennes car c’est un composé toxique pour la cellule. Le catalase ou le peroxydase est capable de dégrader le peroxyde d’hydrogène.
Réactifs du test de catalase
- aérobies et facultatifs: solution de H2O2 à 3%2. anaérobiques: solution de H2O2 à 15%
Interprétation test de catalase
- positif: production rapide et soutenue de bulles de gaz2. négatif: aucune formation de bulles 20-30 secondes après l’addition du peroxyde sur la bactérie
Quel est l’espèce du groupe A?
Streptococcus pyogenes
Quel est l’espèce du groupe B?
Streptococcus agalactiae
Quel est l’espèce du groupe D?
Entérococcus faecalis
Bile esculine et NaCl du Streptococcus pneumoniae?
Négatif, négatif
Bile esculine et NaCl du Aerococcus?
Négatif, positif
Bile esculine et NaCl de Enterococcus faecalis?
Positif, positif
Bil esculine et NaCl du Streptococcus du groupe viridans?
Positif, négatif
Sensibilité à la péniciline des Streptococcus
- Les Strep alpha et beta hémolytique sont sensibles à la péniciline2. Pneumoniae et enterococcus, on va faire un antibiogramme
Bile esculine positif et NaCl positif.
Enterococcus faecalis
Bile esculine positifNaCl négatif
Strep du. Groupe viridans
Bile esculine négatifNaCl négatif
Strep bêta hémolytique du groupe A, B, C, F, G
Limites test de catalase
- éviter d’utiliser des bactéries provenant d’une gélose snag2. une boucle de platine contenant du fer peut donner des tests faussement positifs
Bile esculine négatifNaCl positif
Aerococcus
Coagulase
Une enzyme de nature protéique qui a la capacité de catalyser la transformation du firinogène en fibrine, ce qui amène la formation d’un caillot.
La coagulase est produite par:
Staphylococcus aureus
La coagulase se présente sous deux formes
Forme liée ou la forme libre.
La coagulase liée
Enzyme attachée à la paroi bactérienne et elle n’est pas présente dans les filtrats de culture. Elle est testé sur la lame.
Principe de la coagulase liée
Cet enzyme agit directement sur la fibrinogène du plasma et forme des liens de fibrine entre les cellules bactériennes, ce qui amène une agglutination des agrégats visibles par le test sur lame.
Ce qu’on doit faire si le test de la coagulase liée est négatif?
On doit faire le test en tube.
La coagulase libre
Enzyme qui agit sur la prothrombine pour former une substance sembalble à la thrombine présent dans les filtrats de culture. Elle est testé en tube.
Synonymes pour coagulase libre
- reacting factor2. Staphylocoagulase extracellulaire
Réactif de la coagulase?
Plasma de lapin sur EDTA
Interprétation sur la lame de la coagulase?
- positif: précpité granulaire ou formation d’agrégats en 15-20 secondes. 2. négatif: absence d’agrégats après 2-3 minutes
Interprétation dans le tube de la coagulase?
- positif: caillot dans le tube.2. négatif: aucun formation de caillot. Si le test est négatif, il faut incuber de nouveau à la température de la pièce.
Limites du coagulase
- il faut vérifier s’il y a auto-agglutination avant d’ajouter le plasma2. on peut avoir un faux négatif si on incube trop longtemps car la fibrinolysine va détruire le caillot
Test de DNase est à faire si:
La coagulase ne fonctionne pas.
Principe du test de DNase:
Déterminer la capacité d’un microorgansime à produire l’exoenzyme DNase pouvant dégrader l’ADN en formant des nucléotides ou des nucléosides. L’ADN est insoluble dans le HCl alors que les nucléosides ou nucléotides sont solubles et forment une zone claire.
La mise en évidence de l’enzyme DNase est utilisée pour l’identification des:
Staphylococcus
Quels sont les différents milieux et réactifs utilisés pour le test de DNase:
- milieu composé de bleu de toluidine: le bleu de toluidine peut inhiber la croissance de bactéries Gram positif2. milieu composé de vert de méthyle3. milieu à l’ADN sans colorant et avec HCl
Interprétation du test de DNase
Consiste à observer un changement de coloration du milieu autour de la strie d’ensemencement.
Limite du test de DNase
Le bleu de toluidine peut inhiber la croissance de bactéries Gram positif.
Quand fait-on le test de thermonucléase DNase
Quand le résultat de la coagulase en tube est douteux ou que l’on soupconne un résultat faussement négatif.
Interprétation du test de thermonucléase DNase
- positif: zone claire rosée autour du puits2. négatif: milieu inchangé, zone opaque autour du puits
Quel est la sensibilité des Staphylococcus et Micrococcus?
- novobiocine2. furazolidone3. bacitracine (0.04 unités)
Principe des disques d’identifications
La sensibtilité d’une bactérie à un antibiotique est déterminée par la mesure d’une zone d’inhibition de croissance autour du disque sur une gélose en boite de pétri.
Principe du test de la sensibilité à la novobiocine
Test différentiel pour distinguer le Staphylococcus saprophyticus du Staphylococcus epidermidis d’un échantillon urinaire.
Interprétation des résultats du test de la sensibilité à la novobiocine
Sensible: la zone d’inhibition est supérieure à 16mmrésistant: la zone d’inhibition est inférieur ou égale à 16 mm
Limite du test de la sensibilité à la novobiocine
S’assurer que la souche bactérienne à tester est bien un Staphylococcus cocci Gram positif, catalase positif, fermentation du glucose positif.
Rôle du test de la sensibilité à la furazolidone
Il s’agit d’un test servant à différencier les Staphylococcus des Micrococcus
Principe du test de la sensibilité à la furazolidone
Les Staphylococcus sont sensibles à la furazolidone alors que les Micrococcus sont résistants.
Quel est le disque de furazolidone utilisé
10 ug
Interprétation des résultats du test de la sensibilité à la furazolidone
- sensible: le diamètre d’inhibition est 15 mm ou plus, il s’agit donc d’un Staphylococcus2. résistant: si la zone est inférieure à 14 mm, il s’agit donc d’un Micrococcus.
Rôle du test d’oxydase modifiée
Test rapide pour différencier les Staphylococcus des Micrococcus.
Principe du test d’oxydase modifiée
Permet de distinguer la présence du cytochrome de type-C dans la cellule bactérienne, retrouvé chez les Micrococcus mais absent chez les Staphylococcus.
Réactif du test d’oxydase modifiée
tétraméthyl-para-phénylenediamine à 6%
interprétation des résultats du test d’oxydase modifiée
- positif: apparition d’une couleur bleu foncée en deux minutes ou moins2. négatif: aucun changement de couleur deux minutes après avoir déposé l’inoculum sur le papier
Rôle du test Staphaurex
Sert à identifier Staphylococcus aureus par la mise en évidence de la coagulase et/ou la protéine A.
Rôle du test Staphylase
Sert à identifier Staphylococcus aureus par la mise en évidence de la coagulase liée.
Streptocoques à l’étude:
- Streptococcus pyogenes2. Streptococcus agalactiae3. Streptococcus pneumoniae4. Streptococcus du groupe viridans5. Enterococcus faecalis
Groupe Lancefield du Streptococcus pyogenes
A
Groupe Lancefied du Streptococcus agalactiae
B
Groupe Lancefield de l’Enterococcus faecalis
D
Groupe Lancefield du Streptococcus pneumoniae
Non-groupable
Hémolyse du Streptococcus pyogenes
Bêta
Hémolyse du Streptococcus agalactiae
Bêta
Hémolyse du Streptococcus pneumoniae
Alpha
Hémolyse de l’Enterococcus faecalis
Gamma
Habitat humain normal du Streptococcus pyogenes
Pharynx, peau
Habitat humain normal du Streptococcus agalactiae
Pharynx, vagin, selles, nouveau-né
Habitat humain normal de l’Enterococcus faecalis
Gros intestin
Habitat humain normal du Streptococcus pneumoniae
Pharynx, bouche, trachée
Maladies causés par le Streptococcus pyogenes
- pharyngite aigue2. érysipèle3. impétigo4. septicémie5. scarlatine6. Fasciite nécrosante
Maladies causées par le Streptococcus agalactiae
- fièvre puerpérale2. endocardite3. pneumonie
Maladies causées par l’Enterococcus faecalis
- infection urinaire2. péritonite3. endocardite
Maladies causées par le Streptococcus pneumoniae
- pneumonie lobaire2. septicémie3. otite moyenne4. méningite5. endocardite
Distribution des Streptococcus chez les humains:
Ils sont des saprophytes des cavités naturelles.
Quelle était l’ancienne appellation d’Enterococcus faecalis
Streptococcus du groupe D non entérocoque.
Prélèvement d’une pharygite
A partir du pus produit par les amygdales.
Étapes d’une infection à Streptococcus
- adhésion de la bactérie aux cellules épithéliales2. germes se multiplient de manière à ne pas être balayés par les sécrétions3. l’acide lipotechoique fourni de l’adésine dans la colonisation du pharynx
Apparence de la scarlatine
Ressemble à la varicelle à l’exception qu’il est de cause bactérienne et de l’aspect clinique de la langue.
Fasciite nécrosante communément appelé:
Maladie mangeuse de chair.
Les stretpcoques diffusent rapidement grâce à la sécrétion d’enzymes:
- protéases2. hyaluronidase3. DNase4. Streptokynase
Commenht la streptokynase fonctionne
Elle se lie au plasminogène de la cellule hôte pour se convertir en plasmine. La plasmine la dégrade en fibrine.
Lequel de la famille des Streptococcaceas que l’on ne peut pas prédire une sensibilité à la péniciline
Enterococcus feacalis
Séquelles d’une infection non traitée du Streptococcus pyogenes
- le rhumatisme articulaire aigu2. la glomérulonéphrite aigue
Danger pour le personnel de laboratoire du Streptococcus pyogenes
5e rang des infections les plus souvent acquises au laboratoire
Dangers primaires de l’Enterococcus faecalis
Inoclulation parentérale accidentelle, ingestion
Arrangement au gram des Streptococcus
- direct du spécimen: cocci plus en chaine2. en culture: cocci plus en amas3. culture en bouillon: cocci plus en chaine
Bile esculine +, NaCl - chez les Streptococcus
Streptococcus viridans
Bile esculine + NaCl + chez les Streptococcus
Enterococcus faecalis
Bile esculine - NaCl - chez les Streptococcus
Streptococcus pneumoniaeStreptococcus viridansStreptococcus bêta hémolytiques
Bile esculine - NaCl + chez les Streptococcus
Aerococcus
Résultats de tests de l’hydrolyse à l’hippurate
- positif: violet2. négatif: clair
Structure antigénique des streptocooques
- capsule2. paroi cellulaire3. cytoplasme
Ce que contient la capsule des Streptococcus
Acide hyaluronique
Ce que contient la paroi cellulaire des Streptococcus
- substance C2. substance M3. substance T4. substance R
Ce que contient le cytoplasme des Streptococcus
Substance P
La substance C est composé de:
Glucide aminé
Antigénécité de la substance C
Antigénique spécifique aux groupes
Pathogénicité de la substance C
Non toxique et non relié à la virulence
Extraction de la substance C
- physique: chaleur2. chimique: HCl3. enzymatique: enzyme
La substance M est composé de
Protéines
Antigénécité de la substance M
Anticorps protecteur. Après une infection , on fabrique une protéine M qui nous protège contre une prochaine infection.
Toxicité de la substance M
Nécessaire à l’expression de la virulence.
La substance T est composé de
Protéines commune à plusieurs types d’un même groupe
La substance T est détruite par
Hydrolyse en HCl
Toxicité de la substance T
non toxique
Antigénécité de la substance T
peu antigénique
Importance de la substance T
3-6-12 néphrotogènes
La substance R est composé de
Protéines
Antigénécité de la substance R
Très antigénique donc peut causer des agglutinations
La substance R comprend quels groupes
3-28 du groupe A
Quelle est la classification actuelle des Streptococcus bêta-hémolytiques
Lancefield
Il y a deux différents types de Streptococcus bêta-hémolytiques
- Streptococcus sérologiquement groupables2. Streptococcus sérologiquement non groupables
Combien de groupes de Streptococcus sérologiquement groupables sont connus:
19 dû à la présence dans la paroi cellulaire d’un antigène propre à chaque groupe, le polyoside C
Quelle est la base de la procédure de Lancefield
Extraction par hydrolyse à chaud en présence d’HCl et la précipitation entre l’antigène et l’anticorps.
Ancienne apellation des Streptococcus sérologiquement non-groupables
Streptococcus viridans
Caractéristiques des Streptococcus sérologiquement non-groupables
Ils sont dépouvus de polyoside C donc non groupables.
Production de toxine par Streptococcus pyogenes
Toxine érythrogène
Production d’enzymes par Streptococcus pyogenes
- hémolysine (streptolysine O et S)2. hyaluronidase3. streptokinase4. streptodornase
Types sérologiques de la toxine érythrogène
A-B-C
Quels sont les tests possibles pour la toxine érythrogène
- test de Dick2. test de Schultz-Charlton
Test de Dick
Si rougeur au point d’inoculation (pyogenes), absence d’anticorps
Test de Schultz-Charlton
Provoque (pyogenes) la disparition chez un scalartineux.
Caractéristiques de la Streptolysine O
- thermostable2. oxydénolabile3. antigénique: produit des ASLO
Caractéristiques de la Streptolysine S
- thermolabile2. oxydénostable3. non ou très peu antigénique
La hyaluronidase produit des
antihyaluronidases plus spécifiques que le ASLO
Rôle des hyaluronidases
Ils dépolymérisent l’acide hyaluronique (substance fondamentale du tissu conjonctif).
Caractéristiques du streptokinase
- thermostable2. antigénique3. lyse des caillots de fibrine (Varidase et Elase)
Caractéristiques des streptodornases
- désoxyribonucléases2. 4 types antigéniques (A, B, C, D)
Tests d’identifications pour les alpha-hémolytiques
- Tests de Quellung2. antigène capsulaire
Aspect des colonies et cultures des Streptococcus pneumoniae
Colonie lisse, plate ou concave, transparente, muqueuse.
La souche des alpha-hémolytiques peuvent avoir trois phases
- phase R: rugueuse, absence de capsule2. phase S: lisse, concave, souches virulentes3. phase M: aspect d’eau, souches capsulés et très virulentes
Aspects microcopiques des Streptococcus alpha-hémolytique
- Cocci gram positif2. paires lancéolés3. immobile
Identification d’un ERV
- production de pigment2. fermentation du xylose3. mobilité4. API strep
Caractéristiques des Aerococcus
- Gram cocci seuls ou en tétrades2. catalase négative3. bile esculine négative4. NaCl positif
Gram des Streptococcus pyogenes
Positif
Gram des Streptococcus agalactiae
Positif
Gram des Streptococcus pneumoniae
Positif
Gram des Streptococcus du groupe viridans
Positif
Gram des Enterococcus faecalis
Positif
Morphologie des Streptococcus pyogenes
Cocci
Morphologie des Streptococcus agalactiae
Cocci
Morphologie des Streptococcus pneumoniae
Diplocoque
Morphologie des Enterococcus faecalis
Cocci
Morphologie des Streptococcus viridans
cocci
Autre coloration utilisés sur Streptococcus pneumoniae
Encre de chine (capsule)
Grossesur des colonies des Streptococcus pyogenes
Petite
Grosseur des colonies des Streptococcus agalactiae
Petite
Grosseur des colonies des Streptococcus pneumoniae
Moyenne
Grosseur des colonies des Enterococcus faecalis
Petite
Grosseur des colonies des Streptococcus viridans
Petite
Couleur des Streptococcus pyogenes
Transparente
Couleur des Streptococcus agalactiae
Grise
Couleur des Streptococcus pneumoniae
Verdâtre
Couleur des Streptococcus viridans
Verdatre
Couleur des Enterococcus faecalis
Grise
Hémolyse des Streptococcus pyogenes
bêta
Hémolyse des Streptococcus agalactiae
Bêta
Hémolyse des Streptococcus pneumoniae
Alpha
Hémolyse des Enterococcus faecalis
Gamma
Hémolyse des Streptococcus viridans
Alpha
Croissance sur MacConkey des Streptococcus pyogenes
Inhibé
Croissance sur MacConkey des Streptococcus agalactiae
Inhibé
Croissance sur MacConkey des Streptococcus pneumoniae
Inhibé
Croissnce sur MacConkey des Enterococcus faecalis
Inhibé
Croissance sur MacConkey des Streptococcus viridans
Inhibé
Quels streptococcus sont boosté par le CO2
- Streptococcus pneumoniae2. Streptococcus viridans
Type respiratoire des Streptococcus pyogenes
Anaérobie facultative
Type respiratoire des Streptococcus agalactiae
Anaérobie facultative
Type respiratoire des Streptococcus pneumoniae
Anaérobie facultative
Type respiratoire des Enterococcus feacalis
Anaérobie facultative
Type respiratoire des Streptococcus viridans
Anaérobie facultative
Tests faits sur Streptococcus pyogenes
- bacitracine sensitif2. bile esculine négatif3. catalase négatif4. hypersalé négatif5. prolex A
Tests faits sur Streptococcus agalactiae
- bacitracine résistant2. bile esculine négatif3. CAMP positif4. catalase négatif5. hippurate positif6. hypersalé négatif7. PYR négatif8. prolex B
Tests faits sur Streptococcus pneumoniae
- bile esculine négatif2. catalase négatif3. hypersalé négatif4. optochin sensible
Tests faits sur Enterococcus feacalis
- bile esculine positif2. catalase négatif3. hypersalé positif4. PYR positif
Tests faits sur Streptococcus viridans
- bile esculine pos ou nég2. catalase négativ3. hypersalé négative4. optochin: résistant5. PYR négatif
Solubilité à la bile du Streptococcus pneumoniea
Soluble
Solubilité à la bile du Streptococcus viridans
Insoluble
O-F du Streptococcus viridans
Fermentatif
Sites d’isolement du Streptococcus pyogenes
- plaies superficielles2. voies respiratoires supérieures
Sites d’isolement du Streptococcus agalactiae
- urine2. voies génito-urinaires
Sites d’isolement du Streptococcus pneumoniae
- urine2. poumons3. LCR
Sites d’isoluement de l’Enterococcus feacalis
- urine2. sang
Site d’isolements de Streptococcus viridans
- sang
Pathogène de l’Enterococcus feacalis
Toxine: cytolysine
Maladies causés par Streptococcus pyogenes
- pharyingite2. maladie mangeuse de chair3. impiétigo4. scarlatine
Maladies causées par Streptococcus agalactieae
Méningite chez le bébé qui est donné par la maman lors de l’accouchement
Maladies causées par Streptococcus pneumonieae
- Méningite2. Pneumonie
Maladies causées par Enterococcus feacalis
- endocardite2. UTI
Maladies causées par Streptococcus viridans
endocardite
Le test de bile-esculine est basé sur
La capacité de certaines bactéries à croitre en présence de 40% bile et d’hydrolyser l’esculine.
Le test de bile-esculine est utile pour l’idendification de
Streptococcus du groupe D et Enterococcus, puisque seuls eux sont capables à la fois de croitre sur le milieu bile-esculine et d’hydrolyser l’escuilne.
Qu’est ce que le Streptococcus agalactiae fait dans le milieu bile-esculine?
Il peut croitre sur ce milieu mais ne sera pas capable d’hydrolyser l’esculine.
Principe du test de bile-esculine
- Les bactéries qui sont capable vont former du glucose et de l’esculétine2. L’esculétine va réagir avec un sel de fer contenu dans le milieu pour former un complexe noir
Certains milieux bile-esculine contiennent aussi un ingrédient d’extra
l’azide de sodium pour inhiber la croissance des bactéries Gram négatif, rendant le milieu sélectif pour Streptococus et Enterococcus.
Les sels biliaires dans test de bile-esculine inhibent:
Les bactéries Gram positif
Interprétation du test de bile-esculine
- positif: croissance sur la pente du milieu avec noircissement à plus de 40% du milieu2. négatif: absence de croissance ou croissance sur la pente sans noircissement du milieu ou peu de noircissement du milieu
Afin de confirmer l’espèce bactérienne, que doit-on faire apès le test de bile-esculine
On doit combiner ce résultat avec celui du NaCl 6.5%
Composition de l’esculine
La moitié est composée d’une molécule de glucose et l’autre moitié de l’esculétine.
Le test NaCl 6.5% est utile pour
L’identification des Enterococcus
Principe du test NaCl 6.5%
Les Enterococcus peuvent être différenciés des Streptococcus du groupe D par leur capacité de croitre dans un bouillon contenant 6.5% de NaCl.
Interprétation du test NaCl 6.5%
- positif: changement de couleur du violet au jaune ou turbidité du milieu2. négatif: aucun changement de couleur et aucune croissance après 48 heures d’incubation
Limite du test NaCl 6.5%
Les bactéries testés doivent être catalase Gram positif en paires ou en chainettes.
On met la mise en évidence de l’enzyme PYRase chez:
- Enterococcus2. Streptococcus pyogenes3. Staphylococcus lugdunensis
Principe du test PYR
Les espèces possédant l’enzyme PYRase capable d’hydrolyser le substrat PYR libère une substance qui peut être détecté en ajoutant un réactif qui produit une couleur rouge.
Deux facons de faire le test PYR
- Test sur disque: Murex PYR2. Test sur écouvillon: PathoDx PYR
Interprétation des résultats du test PYR
- positif: production d’une couleur rose à rouge cerise. Ceci indique la production de l’enzyme PYRase par la bactérie.2. négatif sur disque: absence de coloration ou développement d’une coloration crème ou jaune3. négatif sur écouvillon: coloration légère du jaune au vert ou une absence de coloration
Utilité du Prolex Streptococcal select Grouping Latex Kit
C’est un test rapide pour déterminer le type d’antigène possédé par un Streptococcus bêta-hémolytique en culture.
Quels sont les groupes Lancefield
A, B, C, D, F, G
Principe du Prolex Streptococcal select Grouping Latex Kit
- la majorité des espèces de Streptococcus possèdent des antigènes spécifiques de groupe2. ces antigènes sont mis en présence de particules de latex recouvertes d’anticorps spécifiques3. ces particules s’agglutinent en présence de l’antigène homologue alors qu’elles restent en suspension en l,absence de celui-ci
Faux positifs du Prolex Streptococcal select Grouping Latex Kit
- quantité insuffisante de colonies est utilisés2. si les bactéries ne sont pas bêta-hémolytiques
Utilité du test Streptex
Test rapide permettant une détermination du groupe Lancefield.
Résultats du test Streptex
- positif: agglutination des particules de latex à l’intérieur d’une minute2. négatif: aucune agglutination
Utilisation du test de Bacitracine
Pour distinguer de facon présomptive le Streptococcus pyogenes des autres Streptococcus bêta-hémolytiques.
Principe du test de Bacitracine
Les Streptococcus pyogenes sont sensibles au disque de bacitracine à une concentration de 0.02-0.04 unités
Interprétation du test de Bacitracine
- positif: Inhibition de croissance donc Streptococcus pyogenes2. négatif: croissance jusqu’au disque.
Utilisation du test de Camp
Utilisé pour mettre en évidence une protéine extracellulaire produite par le Streptococcus du groupe B.
Principe du test de Camp
L’activité hémolytique de la bêta-hémolysine de Staphylococcus aureus sur les GR de mouton est augmentée de façon synergique par le Streptococcus du groupe B.
Interprétation des résultats du test de Camp
- positif: la zone d’hémolyse prend la forme d’une pointe de flèche. Présomptif des Streptococcus du groupe B2. négatif: la zone d’hémolyse n’est pas augmentée
Principe du test de Camp inversée
L’activité hémolytique de Clostridium perfringens sur les GR de mouton est augmentée de façon synergique par le Streptococcus du groupe B
Utilisation du test de l’Hydrolyse de l’hippurate
Il permet la différenciation du Campylobacter jéjuni des autres Campylobacters. Il permet aussi de différencier les Streptococcus bêta hémolytiques du groupe B.
Principe du test de l’Hydrolyse de l’hippurate
Déterminer la présence de l’hippuricase qui produit l’hydrlyse de l’hippurate de sodium en benzoate de sodium et glycine.
L’hydrolyse de l’acide hippurique dans le test de l’Hydrolyse de l’hippurate peut être détectée selon deux méthodes
- test de benzoate par l’utilisation du chlorure ferrique 7%2. test de la glycine utilisant le réactif Ninhydrine
Interprétation des résultats pour la méthode Benzoate du test de l’Hydrolyse de l’hippurate
- positif: si le précipité persiste au-delà de 10 minutes, du benzoate de sodium a été formé, indiquant l’hydrolyse de l’hippurate2. négatif: si la solution s’éclaircit en 10 minute ou moins
Interprétation des résultats pour la méthode de la glycine du test de l’Hydrolyse de l’hippurate
L’apparition d’une couleur pourpre foncée après l’addition du réactif indique la présence de glycine dans le milieu.
Utilistion du test de l’Optochin
L’optochin est un dérivé de la quinine, qui inhibe de façon sélective la croissance du Streptococcus pneumoniae.
Interprétation test de l’Optochin
- zone de plus de 14 mm: Streptococcus pneumonieae2. zone entre 10-14 mm: résultat douteux, faire le test de lyse de la bile3. aucune zone d’inhibition: Streptococcus du groupe viridans donc flore normale
Utilisation du test de solubilité dans la bile
Différenciation des Streptococcus pneumoniae des autres Streptococcus alpha-hémolytiques.
Interprétation des résutlats pour la méthode en tube test de solubilité dans la bile
- positif: la clarification du milieu2. négatif: turbidité du tube
Interprétation des résutlats pour la méthode sur la gélose test de solubilité dans la bile
- positif: la disparition de la colonie2. négatif: les colonies demeurent intactes
Sels utilisés dans le test de solubilité dans la bile
- Désoxycholate de sodium ou 2. taurocholate de sodium
Nature du contrôle décarboxylase
liquide
Couleur du contrôle décarboxylase
mauve
Présentation du contrôle décarboxylase
tube droit
Méthode d’ensemencement du contrôle décarboxylase
Inoculer la bactérie dans le bouillon et ajouter de l’huile.
Atmosphère du contrôle décarboxylase
Oxygène
Température du contrôle décarboxylase
35oC
Durée d’incubation du contrôle décarboxylase
24-48 heures
Indicateur de pH du contrôle décarboxylase
Bromocrésol pourpre1. acide: jaune2. basique: pourpre
Pourquoi on ajoute de l’huile après l’inoculation du bouillon du contrôle décarboxylase
Car la réaction doit se passer en anaérobiose.
Interprétation des résutlats du contrôle décarboxylase
- positif: le milieu tourne du mauve au jaune ou trouble, activation des enzymes décarboxylase2. négatif: pas de changement de couleur ni trouble
Nature du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Liquide
Couleur du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Mauve
Présentation du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Tube droit
Méthode d’ensemencement du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Inoculer la bactérie dans le bouillon et ajouter de l’huile.
Atmosphère du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
oxygène
Température du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
35oC
Durée d’incubation du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
24-48 heures
Indicateur de pH du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Bromocrésol pourpre1. acide: jaune2. basique: pourpre
Intérêt clinique du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Identification des entérobactéries, de certains bacilles Gram négatifs.
Principe du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Basé sur la capacité des bactéries à déhydrolyser ou non l’arginine.
Produit de dégradation final du milieu d’Arginine déhydrolase (ADH)
Putrescine
Nature du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Liquide
Couleur du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Mauve
Présentation du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Tube droit
Méthode d’ensemencement du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Inoculer la bactérie dans le bouillon et ajouter de l’huile.
Atmosphère du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
oxygène
Température du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
35oC
Durée d’incubation du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
24-48 heures
Indicateur de pH du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Bromocrésol pourpre1. acide: pourpre2. basique: jaune
Principe du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Basé sur la capacité des bactéries à décarboxyler ou non la lysine.
Intérêt du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Identification des entérobactéries et quelques bacilles Gram négatifs.
Produit de dégradation finale du milieu de Lysine décarboxylase (LDC)
Cadavérine
Nature du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Liquide
Couleur du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Mauve
Présentation du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Tube droit
Méthode d’ensemencement du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Inocouler la bactérie dans le bouillon et ajouter de l’huile.
Atmosphère du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Oxygène
Température du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
35oC
Durée d’incubation du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
24-48 heures
Indicateur de pH du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Bromocrésol pourpre1. acide: pourpre2. basique: jaune
principe du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Basé sur la capacité des bactéries à décarboxyler ou non l’ornithine.
Produit de dégradation finale du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Putrescine
Intérêt du milieu Ornithine décarboxylase (ODC)
Identification des entérobactéries et quelques bacilles Gram négatifs.
Nature du milieu TSI (triple sugar iron agar)
solide
couleur du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Orange brulé
Présentation du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Tube avec pente
Méthode d’ensemencement du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Piqure centrale et striation de la pente.
Atmosphère du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Oxygène
Température du milieu TSI (triple sugar iron agar)
35oC
Durée d’incubation du milieu TSI (triple sugar iron agar)
18-24 heures
Indicateur de pH du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Rouge de phénol1. acide: jaune2. basique: rouge
Indicateur de H2S du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Sulfate d’ammonium ferreux et thiosulfate de sodium
Inhibiteur du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Aucun
La présence de couleur noir dans le milieu TSI (triple sugar iron agar) indique
La présence de H2S
La présence de gaz dans le du milieu TSI (triple sugar iron agar)
Indiqué par tout craquement du milieu ou présence de bulles.
Intérêt du milieu TSI (triple sugar iron agar)
- dépistage rapide des bactéries pathogènes dans les spécimens de selles2. utilisé avec le test d’urée, permet la différenciation présomptive des Salmonella des espèces Proteus
Nature du milieu Urée de Christensen
Solide
Couleur du milieu Urée de Christensen
Chamois
Présentation du milieu Urée de Christensen
Tube avec pente
Méthode d’ensemencement du milieu Urée de Christensen
Striation de la pente
Atmosphère du milieu Urée de Christensen
O2
Température du milieu Urée de Christensen
35oC
Durée d’incubation du milieu Urée de Christensen
30 minutes à 24 à 48 heures
Indicateur de pH du milieu Urée de Christensen
Rouge de phénol1. acide: jaune2. basique: rose magenta
Indicateur d’H2S du milieu Urée de Christensen
Aucun
Inhibiteur du milieu Urée de Christensen
Aucun
Intérêt du milieu Urée de Christensen
Recherche de l’uréase chez les bactéries autrs qu’entérobactéries.
du milieu Urée de Christensen utilisé en tandem avec:
TSI pour l’identification présomptives des entérobactéries dans les selles.
Nature du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Semi-solide
Couleur du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Vert foncé
Présentation du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Tube droit
Méthode d’ensemencement du milieu de Hugh Leifson (O-F)
piqure centrale
Atmosphère du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Oxygène et anaérobie
Température du milieu de Hugh Leifson (O-F)
35oC
Durée d’incubation du milieu de Hugh Leifson (O-F)
48 heures et plus jusqu’à 3 jours
Indicateur de pH du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Bleu de bromothymol1. acide: jaune2. basique: bleu
du milieu de Hugh Leifson (O-F) est utilisé en paire
Un des deux tubes doit avoir de l’huile.
Intérêt du milieu de Hugh Leifson (O-F)
Étude de la voie métabolique des sucres des bactéries.