Sondes moléculaires

Question 1

Qu’est-ce qu’une sonde ?

Answer 1

Composé qui a une affinité spécifique pour la molécule que l’on veut détecter ou quantifier. Cette sonde est munie d’un traceur qui permet sa détection de manière stable, sensible et spécifique.

Question 2

Qu’est-ce qu’un traceur ?

Answer 2

Cette sonde est munie d’un traceur qui permet sa détection de manière stable, sensible et spécifique. Ne modifie pas l’affinité de la sonde pour sa cible. il n’est pas présent naturellement dans l’échantillon analysé.

Question 3

Quels sont les traceurs usuels utilisés pour marquer les sondes ?

Answer 3

• isotopes (instable = radioacti) ou (stable = utilisés en RMN et spectro. de masse)
• Fluorochromes
• Enzymes (colorimétrie, luminescence)

Question 4

Qu’est-ce qu’un rayonnement alpha ?

Answer 4

• Noyau éjecte 2 neutrons et 2 protons

Question 5

Qu’est-ce qu’un rayonnement bêta ?

Answer 5

• Noyau éjecte 1 électron (négatron) et un antineutrino

- la majorité des traceurs radioactifs utilisés en biochimie sont des émetteurs de rayonnement bêta

Question 6

Qu’est-ce qu’un rayonnement gamma et un rayon X

Answer 6

• Rayonnement très énergétique (car courte longueur d’onde)

- Seulement de l’énergie qui sort du noyau

Question 7

Comment peut-on détecter la radioactivité ?

Answer 7

• Autoradiographie (rayon X et rayons bêta)
• Compteur Geiger (efficace pour 32P surtout)
• Compteur de scintillations liquides

Question 8

Quel la différence entre la fluorescence et a phosphorescence ?

Answer 8

• Fluorescence : l’Émission de lumière est arrêté dès que cesse l’illumination
• Phosphorescence : L’émission de lumière continue après l’illumination.

Question 9

Comment fonctionne les traceur colorimétriques ?

Answer 9

• Le traceur est une enzyme liée de façon covalente à la sonde. La réaction enzymatique est spécifique et génère un produit coloré mesurable (spectrophotomètre)
• Intensité de la couleur est habituellement proportionnelle à la quantité de sondes fixées à la cible.

Question 10

Quelle est la différence entre un essai direct, un essai indirecte et une capture d’essai ?

Answer 10

• essai direct : anticorps primaire
• essais indirect : anticorps primaire et anticorps conjugué
• Capture essai : anticorps capture et anticorps primaire + anticorps conjugué (augmente la spécificité)

Question 11

Qu’est-ce qu’un traceur luminescent ?

Answer 11

• Au lieu d’employer un réactif qui génère un produit coloré lorsqu’il est transformé par l’enzyme de la sonde, certains substrats de ces enzymes produisent de la lumière lorsqu’ils sont hydrolysés (chimioluminescence)
• Intensité du signal lumineux est habituellement proportionnelle à la quantité de sondes fixées à la cible.

Question 12

Comment fonctionne le marquage des sondes ?

Answer 12

Conjugaison chimique : couplage par lien chimique stable entre un traceur et une molécule froide pour générer la sonde (On crée un lien covalent.)