Sema 9 y sem 10 (FISH Y SUS VARIANTES) Flashcards
Técnica empleada para localizar secuencias específicas de ADN en células o cromosomas.
FISH
Aplicación citogenética de FISH
Detección de anomalías cromosómicas, identificación de cromosomas homólogos, análisis de la evolución cromosómica.
Distinguir cromosomas de diferentes progenitores.
Hibridación in situ genómica (GISH)
Amplificación de secuencias específicas de ADN o ARN.
PCR con hibridación in situ genómica (PCR - ISH)
Identificación y diferenciación de cromosomas con sondas de diferentes colores.
Multicolor FISH (M - Fish)
Uso de sondas marcadas con enzimas para una señal visible con microscopía óptica.
Hibridación cromogénica in situ (CISH)
Uso de sondas marcadas con fluorocromos para visualización en microscopía de fluorescencia.
Hibridación fluorescente in situ (FISH)
Tipo de marcaje de sonda:
- Marcaje directo
- Marcaje indirecto
Sonda unida directamente a un fluoróforo:
Marcaje directo
Sonda marcada con una molécula que requiere una reacción secundaria para su detección
Marcaje indirecto
Fragmento de ADN o ARN marcado con un fluorocromo que se una a una secuencia específica de ácido nucleico en la muestra
Sonda FISH.
Técnica de microscopía que permite la visualización de muestras marcadas con fluorocromos
Epifluorescencia.
Compuesto que emite luz fluorescente cuando se excita y se utiliza para marcar sondas en técnicas de hibridación
Fluorocromo.
Patrones de señales en sondas FISH:
- Variación en el número de copias.
- Reordenamiento génico: Translocación, fusión
_____________ utiliza sondas Fish específicas de cromosomas marcadas con diferentes fluorocromos.
Cariotipo espectral (SKY)
_______ es realizado en preparaciones de fibras de cromatina extendida para identificar pequeñas reorganizaciones.
Fiber FISH
_______ es la técnica de hibridación in situ fluorescente para analizar ganancias y pérdidas de material genómico.
Hibridación genómica comparada (CGH)
________ utiliza ADN genómico como sondas para detectar cadenas complementarias.
Hibridación Genómica In Situ (GISH)
_________ emplea sondas marcadas con restos antigénicos, visibles mediante microscopía de campo brillante.
Hibridación In Situ Cromogénica (CISH)
_____________ es la variante de CISH que utiliza sales de plata para amplificación del marcaje.
Hibridación In Situ con Plata (SISH)
Permite la identificación de anomalías cromosómicas: Translocaciones, aneuploidías.
Cariotipo espectral (SKY)
Función: Detección de deleciones en clones, estimación de huecos en proyectos
Fiber FISH
Función: Detección de duplicaciones y deleciones.
Hibridación genómica comparada (CGH)
Función: Detección de híbridos y aberraciones
Hibridación Genómica In Situ (GISH)
Función: Evaluación de sobreexpresión del gen HER2 en carcinomas humanos.
Hibridación In Situ Cromogénica (CISH)
Función: Detección de genes del cáncer.
Hibridación In Situ con Plata (SISH)
Relacione:
1) Cariotipo espectral (SKY) (____) Emplea sondas marcadas con restos antigénicos, visibles mediante microscopía de campo brillante.
2) Fiber Fish (____) Realizado en preparaciones de fibras de cromatina extendida para identificar pequeñas reorganizaciones.
3) Hibridación genómica comparada (CGH) (____) Técnica de hibridación in situ fluorescente para analizar ganancias y pérdidas de material genómico.
4) Hibridación genómica In Situ (GISH) (____) Variante de CISH que utiliza sales de plata para amplificación del marcaje.
5) Hibridación In Situ Cromogénica (CISH) (____) Utiliza sondas Fish específicas de cromosomas marcadas con diferentes fluorocromos.
6) Hibridación In Situ con Planta (SISH) (____) Utiliza ADN genómico como sondas para detectar cadenas complementarias.
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(1)
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Relacione, la variación FISH y su función:
1) Cariotipo espectral (SKY) (__) Detección de duplicaciones y deleciones.
2) Fiber Fish (__) Identificación de anomalías cromosómicas, translocaciones, aneuploidías.
3) Hibridación genómica comparada (CGH) (__) Detección de genes del cáncer.
4) Hibridación genómica In Situ (GISH) (__) Detección de deleciones en clones, estimación de huecos en proyectos genómicos, mapeo de la metilación del ADN.
5) Hibridación In Situ Cromogénica (CISH) (__) Detección de híbridos y aberraciones.
6) Hibridación In Situ con Planta (SISH) (__) Evaluación de sobreexpresión del gen HER2 en carcinomas mamarios.
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El síndrome de Wolf- Hirschorn se origina por
translocación
La señal crítica en 7q11.23 se usa en FISH para la detección de
Síndrome de williams
Sus aplicaciones:
Análisis de la estructura y organización de secuencias repetitivas
Mapeo de cromosomas artificiales bacterianos
-ver el # de repeticiones en tandem con mayor precisión
-analizar las marcas epigenéticas como la metilación del ADN y la modificación de histonas
Fiber FISH
En el cariotipo espectral SKY:
Rosa
Rojo
son producidos por
rodamina
texas red
En el cariotipo espectral SKY:
FITC
CY5
producen
Verde amarillo intenso
verde
Cy5.5 da el color
amarillo
el PNA está constituido por unidades de
aminoetil-glicina AEG