Section Laboratoire de Microbiologie Flashcards
Quelle précaution doit-on prendre avant de stériliser d’un milieu contenu dans des tubes a bouchons qui vissent?
–>Il faut dévisser les bouchons un quart de tour pour laisser pénétrer la vapeur. On doit saturer l’intérieure des tubes en eau pour obtenir une stérilisation efficace. Dégradation des enzymes, protéines, etc.
–> Pour pas pouvoir participer à des réactions chimiques
Combien de temps dure un cycle complet de stérilisation d’un milieu de culture liquide à l’autoclave?
–> Entre 30 min et 60 min
Pourquoi est-ce que si long, puisqu’un temps de 20 minutes à 121 C est suffisant pour tuer les microorganismes courants les plus résistants?
–> Car il faut attendre que la température de l’autoclave augmente
De quels moyens dispose-t-on pour s’assurer de l’efficacité des autoclaves?
–>Les bactéries : Geobacillus Stearothermophilus, Clostridium (voir si on les tues)
Mais aussi manière chimique et physique
Comment sont stériliser les boîtes de Petrie en plastique?
–> Radiation (UV) ou Oxyde d’éthylène
Comment sont stériliser les pipettes sérologiques en verre?
–> Four de Pasteur (chaleur sèche 160 C 2-3 heures) pour assurer qu’il n’y a pas de trace d’eau, N’UTILISE PAS autoclave (utilise l’eau) car il y a de l’humidité et donc peut laisser des traces d’eau dans les pipettes
Doit-on stériliser le sang de mouton avant d’en ajouter à la gélose?
–> Non, car le sang déjà stérile et on ne veut pas dénaturer les protéines du sang
Pourquoi attendre que la gélose atteigne 45 C avant de le faire? Peut-on attendre 35C?
À 45 C –> Solidifie mais aussi pour ne pas dénaturer les protéines
À 35 C –> Non car la gélose se gélifie (pas encore solide) avant 45 C
Pour stériliser de l’huile minérale, devrait-on utiliser l’Autoclave ou le four Pasteur
–> Four Pasteur (160 C 2-3 heures) : Pour ne pas avoir l’eau qui se mélange avec l’huile
Pourquoi le volume de milieu ne doit-il pas dépasser 75% (3/4) de la capacité du contenant, lors de la stérilisation a l’autoclave?
–> Pour ne pas avoir de dégâts, la pression est légèrement supérieure à la pression atmosphérique dans l’autoclave fermé
Quels sont les inconvénients à distribuer la gélose dans les boîtes de Pétri immédiatement après sa stérilisation a l’autoclave?
Température élevé –> Bulle d’air –> Évaporation–> Diminue H20 dans le milieu –> Affecte c l’Agar
= AFFECTE LA CROISSANCE BACTERIENNE
Comment décontamine-t-on les géloses en boite de Petri et les bouillons usagés déposés dans les contenants à décontamination à la fin de chaque séance de travaux pratiques?
–> Autoclave
Comment sont traitées les pipettes contamines provenant des cylindres a pipettes?
–> Autoclave
Que fait-on du matériel contaminé non récupérable?
–> Autoclave + on les jette