Scéance I

Question 1

Définition :

ELISA

Answer 1

Enzyme linked immunosorbent assay

Méthode quantitative de dosage de protéines basée sur l’interaction entre la protéine à doser (l’antigène) et un anticorps levé dans un animal (lapin, souris ou chèvre) contre cette protéine

Question 2

3 types d’ELISA

Answer 2

Directe
Indirecte
Sandwich

Question 3

Étapes de ELISA indirecte

Answer 3

1. Ajout antigène et période d’incubation : adsorption antigène
2. Phase de lavage pour éliminer tout produit non spécifiquement adsorbé
3. Ajout anticorps primaire et période d’incubation
4. Phase lavage pour éliminer les anticorps non liés
5. Ajout anticorps secondaire: interaction anticorps primaire
6. Ajout substrat de l’enzyme: réaction de détection
7. Ajout NaOH : arrêt réaction et développement coloration jaune

Question 4

Monoclonaux vs polygonaux

Answer 4

Monoclonaux :
- Production indéfinie via les hybridomes et spécificité élevée

• Spécificité élevée réduit bruit de fond et élimine les possibilités de
  réactions croisées

Polyclonaux :
- Faciles et rapides à produire donc moins coûteux

• Moins sensibles aux changements sur l’antigène à cause de leur capacité à reconnaître plusieurs épitopes
• Utile lorsque la nature de l’Ag n’est pas connue