Régulation transcriptionnelle chez les eucaryotes Flashcards

1
Q

vrai ou faux. La machinerie transcriptionnelle eucaryote est plus élaborée que chez la bactérie

A

Vrai

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Q

Par quoi est régulée la transcription par Pol II?

A

Par des activateurs et des répresseurs

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3
Q

En quoi la transcription chez les eucaryotes est plus complexe que chez les procaryotes?

A

Chez les eucaryotes, l’ADN est entourée autour de nucléosomes, masquant les promoteurs et de nombreux gènes ne peuvent pas être exprimés en l’absence de protéines régulatrices. Il y a ainsi plus de régulateurs et de plus grandes séquences régulatrices

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4
Q

vrai ou faux. Chez les eucaryotes, les sites sont plus nombreux et plus rapprochés.

A

Faux. Ils sont plus éloignés.

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5
Q

Sur combien de nucléotides peuvent s’étendre les séquences régulatrices?

A

1000 nucléotides en amont ou en aval du promoteur

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6
Q

Qu’est-ce qu’un enhancer?

A

Plusieurs sites activateurs regroupés en une seule unité.

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7
Q

Étant donné que les sites sont plus éloignés, qu’est-ce qui est nécessaire pour permettre les actions à distances ?

A

L’intervention de boucles d’ADN facilitant les intéractions entres les protéines.

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8
Q

Vrai ou faux. Un activateur lié à un enhancer peut contrôler plusieurs gènes à sa porter.

A

Vrai

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9
Q

Que requiert l’activation à distance?

A

D’autres séquences régulatrices, comme des isolateurs ou des éléments frontières.

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10
Q

Où sont situées les isolateurs ou les éléments frontières?

A

Entre les enhancers et les promoteurs.

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11
Q

Qu’est-ce qui bloque l’activation du promoteur?

A

La liaison des activateurs à l’enhancer.

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12
Q

Nommez 2 domaines fonctionnels présents chez les activateurs transcriptionnels des eucaryotes.

A

Domaine de liaison à l’ADN (DLA) et un domaine d’activation

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13
Q

Quel est l’activateur eucaryote le plus étudié?

A

Gal4

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14
Q

Quel est le rôle de Gal4?

A

Il active la transcription du gène galactose chez S. cerevisiae

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15
Q

Où se lie Gal4?

A

Lie 4 sites situés 275ob en amont de GAL1

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16
Q

Qu’arrive-t-il lorsque Gal4 se retrouve en présence de galactose?

A

Gal4 active la transcription de GAL1 +1000 fois.

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17
Q

Vrai ou faux. Le DLA et le domaine d’activation (DA) sont interchengeables et distincts.

A

Vrai

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18
Q

Est-ce que le DLA seul peut activer la transcription et pourquoi?

A

Un fragment du gène Gal4 code uniquement pour le tiers N-terminal de la protéine qui peut se fixer à l’ADN, mais qui n’active pas la transcription.

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19
Q

Est-ce que le domaine d’activation de Gal4 peut fonctionner même s’il est associé à un autre DLA?

A

En créant un gène hybride en fusionnant les 3/4 C-terminaux de Gal4 (DA) avec un DLA provenant du répresseur bactérien LexA, il a été vu que la protéine acitve la transcription de lacZ portant des sites LexA, donc le DA de Gal4 peut fonctionner même s’il est attaché à un autre DLA.

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20
Q

Vrai ou faux. Un DLA bactérien (LexA) ne peut pas remplacer un DLA eucaryote (GAL4).

A

Faux. Il peut.

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21
Q

Vrai ou faux. La plupart des régulateurs bactériens lient l’ADN sous forme de dimères.

A

Vrai

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22
Q

vrai ou faux. La grande majorité des protéines régulatrices bactériennes utilisent le motif hélice-coude-hélice comme DLA.

A

Vrai

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23
Q

Quel est le premier DLA à être caractérisé?

A

motif HCH (hélice-coude-hélice)

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24
Q

Par qui est découvert le motif HCH?

A

Par McKay et Steitz (1981) et Pabo et Lewis (1982)

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25
Comment est structuré le motif HCH?
Il y a 2 hélices alpha séparé par un court coude. 1er hélice est de reconnaissance, elle s'insère dans le grand sillon et reconnait des pb spécifiques. 2eme hélice crée un contact avec le squelette de l'ADN.
26
Vrai ou faux. Plusieurs régulateurs eucaryotes lient sous forme hétérodimère et parfois monodimère
Vrai
27
Qu'est-ce l'homéodomaine?
La classe de DLA de type HCH
28
À quoi ressemble la structure HCH (homéodomaine)?
Aux HCH bactériens
29
Chez qui est découverte en premier la structure HCH?
Chez la drosophile
30
Quelle est la fonction des homéodomaines chez la drosophile?
L'embryogenèse.
31
Vrai ou faux. L'homéodomaine contient une région très conservée de 60 acides aminés.
Vrai
32
Quelle est la séquence consensus de l'homéodomaine (HD)?
TAATNN
33
Quelles peuvent êtres les 2 fonctions des protéines à homéodomaines?
Activateurs ou répresseurs.
34
Quel est le domaine le plus commun des DLA?
Le domaine à doigtsde Zn
35
Chez qui a été identifié en premier le domaine à doigts de Zn?
Chez TFIIIA
36
De quoi est constitué le domaine à doigts de Zn?
D'environ 30 acides aminés parmi lesquels se trouvent 2 résidus cystéines et 2 résidus histidine. Il y a 12 AA entre les paires cystéines-histidine, et il y a des résidus basiques et hydrophobes. La structure de 30 AA se replie pour former 2 barreaux bêta antiparallèles suivis d'une hélice alpha
37
De quoi est constitué l'activateur Sp1?
De 3 structures en doigts de Zn consécutives
38
Par quoi est coordonn. le Zn?
Par 4 résidus cystéines.
39
Quel est le rôle du Zn dans le DLA?
De stabiliser le DLA (Ressemble au motif HCH mais présente différences structurales)
40
De quoi est constitué le récepteur glucocorticoïde?
De 8 cystéines pouvant lier 2 atomes de zinc
41
Qu'est-ce que la fermeture à glissière de leucines?
motif structurel trouvé dans certains facteurs de transcription qui leur permet à la fois de se dimériser et de se lier à l’ADN.
42
Quels sont les 2 rôles de la fermeture à glissière de leucines?
Dimérisation (permet à 2 protéines de se lier ensemble pour former un dimère) et liaison à l'ADN (liaison du dimère à l'ADN)
43
Par qui a été identifié la fermeture à glissière de leucines?
Steven L.McKinght
44
De quoi est composé la fermeture à glissière de leucines?
🔹 Composée d’une région d’environ 30 acides aminés, chargée positivement. 🔹 Contient une hélice α qui interagit avec le grand sillon de l’ADN. 🔹 Région clé : une séquence de leucines répétées (4 à 6 leucines) séparées par 7 acides aminés chacune.
45
Comment se fait la dimérisation par les leucines?
Les leucines s’alignent sur un même côté de l’hélice α, ce qui favorise leur interaction hydrophobe avec une autre hélice α du même type.
46
Vrai ou faux. Un facteur peut former un homodimère ou un hétérodimère
Vrai
47
Comment se forme la structure coiled-coil?
Quand deux protéines possédant le motif de 7 résidus qui sépare les hélice alpha interagissent, elles s’enroulent l’une autour de l’autre
48
Qu'est-ce que le facteur de transcription GCN4?
Présent chez la levure, il possède une fermture à glissière de leucines lui permettant de former un dimère stable
49
Quelle est la plus grosse similarité entre le motif HCH et le motif fermture-leucine?
Les 2 possèdent des régions basiques essentielles à la liaison à l'ADN et une région permettant la dimérisation.
50
De combien de pb est constitué le site de reconnaissance dans l'ADN?
12 paires de bases inversées répétées ayant une région conservée (boîte E = CAXXXGT)
51
Quel est le rôle de MyoD?
Différenciation cellulaire
52
Quel est le rôle de CBF1/CPF1?
Stabilité des chromosomes
53
Quel est le rôle de CUTE, E12, E47 et PHO4?
Régulation de l'expression
54
Quel est le rôle de myc?
La prolifération cellulaire.
55
Vrai ou faux. Contrairement aux DLA, les régions activatrices n'ont pas de structures définies.
Vrai
56
Pourquoi les régions activatrices n'ont pas de structures définies?
Elles doivent avoir des régions adhérentes capable d'intéragir avec plusieurs surfaces protéiques. Peuvent former des structures en hélice induite par la liaison de l'ADN.
57
Pourquoi la région activatrice de Gal4 est appelée région activatrice acide?
À cause de la prépondérance de AA acides.
58
Nommez 2 types de régions activatrices sans structure définie.
Activateur Sp1 (riche en glutamine) et activateur CTF1 (riche en proline)
59
Quels types de régions sont fortes et fonctionnent dans tout l'organisme des eucaryotes?
Régions activatrices acides.
60
Vrai ou faux. Les régions activatrices non acides sont plus faibles et fonctionnent de façon moins universelle.
Vrai
61
Vrai ou faux. Il est rare pour un activateur d'établir un lien direct avec l'ARN pol. Il recrute la polymérase indirectement.
Vrai
62
Que peuvent faire les activateurs pour aider à l'initiation?
Recruter des modificateurs de nucléosomes.
63
Quel est le rôle général des activateurs?
De recruter des protéines sur le promoteur
64
Vrai ou faux. Les activateurs agissent à distance.
Vrai
65
Donnez un exemple d'activateurs qui agissent à distance.
Une région acide typique d’un activateur peut interagir avec des composants du médiateur et/ou avec sous-unités TFIID
66
Quels sont les 2 types de modificateurs qui aident à activer un gène empaqueté dans la chromatine?
Acétyltransférase des histones (HAT) qui ajoutent des groupements chimiques sur les queues d'histones et les SWI/SNF à activité ATP-dépendante qui remodèlent les nucléosomes.
67
Que permet l'acétylation des queues d'histone?
Rendre la chromatine plus ouverte et aide la liaison d'une machinerie transcriptionnelle par un autre moyen, soit en créant des sites de liaison spécifiques sur les nucléosomes pour les protéines contenant des bromodomaines.
68
Quel facteur contient des bromodomaines?
Un des composant de TFIID (TAD1/TAFii250), permettant de mieux se fixer aux nucléosomes acétylés.
69
Vrai ou faux. Les composants de la machinerie transcriptionnelle sont nécessaires de façon égale à tous les gènes.
Faux. Plus nécessaire à certains gènes qu'à d'autres.
70
Quels sont les 3 composants intéragissant avec Gal4?
Le médiateur, SAGA et TFIID
71
Que fait SAGA?
Il a une activité d'acétylation et est capable d'intéragir avec la machinerie transcriptionnelle.
72
Que contient SAGA et pourquoi est-ce nécessaire?
Des TAFs, nécessaires pour certains promoteurs en remplacement de TFIID
73
Vrai ou faux. SAGA est un coactivateur de Gal4
Vrai
74
À quoi est lié Gal4 ?
À la séquence cible (UAS) par son DLA (DB)
75
Par quoi est bloqué le domaine d'activation de Gal4?
Par Gal80
76
Que se passe-t-il lors d'addition de galactose?
Cela induit l'expression de l'inducteur Gal3, qui modifi le complexe Gal80/Gal4, rendant AD accessible pour recruter SAGA. SAGA recrute TBP à boîte TATA via le domaine SPt3 et active la transcription de Gal1.
77