Proceso de replicación en procariotas Flashcards
- INICIACIÓN
Esta es la fase de preparación de las cadenas para la posterior acción de la adn polimerasa III. Se forman dos horquillas de replicación, una a cada lado. El único origen de replicación es el OriC formado por 245 pares de bases. Aquí empieza siempre la replicación con secuencias consenso muy conservadas. Tiene diferentes partes:
- Zona DUE: es el elemento de desenrrollamiento del ADN. Es rica en pares AT. Se repite una secuencia 3 veces.
- Sitios I y Sitios R: sitios de unión al ADNa, proteína clave que abre la hebra DUE con gasto de ATP.
- Sitios IHF y FIS: se unen los estimuladores de la iniciación.
- INICIACIÓN PROCESO
a) 8 mol de ADNa unidas a ATP se unen a R y I del oriC, provocan el superenrrollamiento de la hebra que hace que se desnaturalice la hebra y se abra por la zona DUE.
b) ADNc-ATP ayuda a ADNb (helicasa) a unirse a la zona DUE para mantenerlas abiertas.
c) ADNb avanza en dirección 5’-3’.
d) Zona DUE se abre, se colocan dos helicasas y las SSB.
e) Una primasa sintetiza los primeros para que la ADN polimerasa III pueda comenzar la replicación.
d) Las proteínas SSB estabilizan las hebras sencillas.
e) La ADN topoisomerase II realiza pequeños cortes para disminuir la tensión de las hebras.
- INICIACIÓN REGULACIÓN
La primasa y la helicasa suelen funcionar juntas, eso se le llama primosoma.
La iniciación es la etapa reguladora. Se consigue mediante:
1) Lenta hidrólisis del ATP por la ADNa
2) Metilación del oriC del ADN por la metilasa DaM. Coloca metilos en una secuencia palindrómia GATC. La enzima metila las dos hebras y cuando la polimerasa pase replicará las bases y se formarán hebras hemimetiladas. Las zonas donde esto pase quedarán secuestradas por la membrana plasmática. Esto evita que empiece otra replicación cuando el oriC está activo.
3) Interacción con la membrana plasmática
- ELONGACIÓN
La ADN polimerasa III añade desoxirribonucleotidos al cebador. La misma polimerasa replica las dos hebras por lo que cada nucleo funciona diferente:
a) Hebra continua: la enzima colocará los nucleótidos sin colocar más que una abrazadera donde se encuentra el único cebador.
b) Hebra discontinua: la enzima girará la hebra y colocará abrazaderas cada vez que se encuentre con el cebador de los fragmentos de Okazaki. La enzima se suelta y se vuelve a unir cada vez que se lo encuentra.
Es un proceso que necesita ATP ya que se necesitan 3 ATPs para cerrar cada abrazadera. Hay que tener en cuenta que la ADN polimerasa I va sustituyendo el primer de ARN a uno de ADN. Luego la ligasa une las mellas.
- TERMINACIÓN
Si las dos horquillas de replicación fueran a la misma velocidad, la replicación terminaría justo en el lado opuesto del ADN circular bacteriano. No van al mismo tiempo por los errores que van surgiendo. De todas formas aunque no vayan al mismo tiempo, si que acaban en el lado opuesto del ADN. Esto se debe a los complejos tus-ter. La proteína tus se une a la terminación ter, va chocando las replicas contra este complejo hasta que se pare en el punto opuesto del origen.
Finalmente se quedan dos cromosomas circulares encadenados, por lo que la ADN topoisomerasa IV corta transitoriamente las hebras y la ligasa las vuelve a unir pero esta vez separadas.
