ppt 1 das biopsias

Question 1

o que sao biopsias liquidas

Answer 1

técnica da área da oncologia que vêm a revolucionar o diagnóstico e monitorização do cancro

Question 2

o que se baseia na biopsia liquida

Answer 2

• A biópsia liquida baseia-se na analise os componentes tumorais presentes nos fluidos corporais tanto no sangue, urina e liquido cefalorraquidiano

Question 3

pq se passou para biopsia liquida

Answer 3

• Isso torna o procedimento muito menos invasivo e permite que o monitoramento da doença seja feito de forma contínua e em tempo real, sem a necessidade de múltiplas cirurgias ou intervenções invasivas o Introduzida há mais de uma década, a biópsia líquida inicialmente focava na deteção de células tumorais circulantes (CTCs).

Question 4

no que se foca a biopsia liquida

Answer 4

 Células tumorais circulantes (CTCs)
 DNA tumoral circulante (ctDNA)
 RNA livre de células (cfRNA)- ( Refere-se a fragmentos de RNA que circulam no sangue ou em outros fluidos corporais, rna mensageiro,), mRNA, microRNAs
 Exossomas

Question 5

o que promete a biposia liquida

Answer 5

Uma das grandes promessas da biópsia líquida é sua capacidade de detetar o cancro em fases muito precoces, muitas vezes antes que os sintomas apareçam ou que os tumores sejam visualizados em exames de imagem tradicionais.

Question 6

pq é importante para o cancro

Answer 6

Isso é particularmente relevante para cancros que geralmente são diagnosticados em estágios avançados, como o cancro do pulmão, pâncreas e ovário, onde a deteção precoce pode ter um impacto dramático na taxa de sobrevivência

Question 7

Vantagens em comparação com biópsias tradicionais:

Answer 7

• Minimamente invasiva, já que as tradicionais são bastante invasivas quando removem um tumor pq precisam de uma amostra do tecido tumoral, já a liquida só precisa de uma amostra de sangue o que reduz o desconforto do paciente, além de diminuir os riscos de complicações pós-procedimento, como infeção, dor ou sangramento
• Monitorização em tempo real da evolução do tumor ao longo do tempo, sendo útil para monitorizar a eficácia dos tratamentos , detetar uma recaída precoce ou acompanhar a emergência de resistência a medicamentos. Já que no convencional o monitoramento frequente é difícil e muitas vezes impraticável devido à natureza invasiva do procedimento
• Deteção de heterogeneidade tumoral vão apresentar heterogeneidade intratumoral, ou seja, diferentes regiões de um tumor podem ter perfis genéticos distintos. E a biópsia de tecido captura apenas uma pequena porção do tumor, o que pode não refletir toda a variedade genética da neoplasia. Em contrapartida, a biópsia líquida pode detetar células tumorais e DNA tumoral provenientes de várias regiões do tumor primário e de possíveis metástases, oferecendo uma visão mais abrangente da heterogeneidade do cancro
• Deteção precoce de metastases-A biópsia líquida pode detetar a presença de células tumorais circulantes (CTCs) e DNA tumoral circulante (ctDNA) antes mesmo que metástases sejam detetadas em exames de imagem, o que possibilita intervenções precoces e mais eficazes
• Uso em tumores de difícil acesso-Certos tumores estão localizados em regiões de difícil acesso, como no cérebro, pulmões ou pâncreas, tornando as biópsias tradicionais perigosas ou tecnicamente complexas. E a biópsia líquida oferece uma alternativa para obter informações valiosas sobre esses tumores de forma mais segura

Question 8

Desvantagens em comparação com biópsias tradicionais :

Answer 8

• Sensibilidade limitada em estágios iniciais- Em estágios iniciais do cancro, o número de células tumorais circulantes ou a quantidade de ctDNA no sangue pode ser muito baixo para deteção, podendo resultar em falsos negativos, especialmente em tumores com baixa carga tumoral ou que não libertam biomarcadores de forma significativa na circulação.Em contraste, a biópsia convencional, ao retirar diretamente o tecido tumoral, pode garantir uma análise mais precisa mesmo em estágios iniciais.
• Falta de padronização nos métodos de deteção e análise.Diferentes laboratórios podem usar tecnologias variadas, resultando em falta de consistência nos resultados.A biópsia tradicional, embora invasiva, possui protocolos mais estabelecidos e validados para a obtenção de amostras e análise
• Especificidade e risco de falsos negativos: A biópsia líquida pode detetar mutações em ctDNA que não estão relacionadas ao cancro, como as mutações associadas à hematopoiese clonal de potencial indeterminado (CHIP), o que pode gerar falsos positivos.Por outro lado, a biópsia convencional foca diretamente no tecido tumoral, evitando esse tipo de interferência.
• Incapacidade de avaliar a arquitetura histológica: A biópsia tradicional permite a avaliação detalhada da arquitetura tecidual e das características histológicas do tumor, informações que são cruciais para determinar o tipo exato de cancro, seu estágio e grau de agressividade. A biópsia líquida, focada em biomarcadores moleculares e genéticos, não fornece essas informações

Question 9

que biomarcadores existem

Answer 9

ctDNA, CTC ,RNA e microRNA e exossomas

Question 10

o que sao ctDNA

Answer 10

• DNA tumoral circulante (ctDNA)- fragmentos de DNA que são libertados apartir de um tecido tumoral encontrado no sangue. É utilizado para detetar mutações, alterações epigenéticas e monitorizar o tratamento dos pacientes.

Question 11

o que sao celulas CTC

Answer 11

• Células tumorais circulantes (CTCs)- células viáveis libertadas pelo tumor primário para a corrente sanguínea. Desta forma, a deteção das CTCs indica informações sobre o tumor e sobre a possibilidade de disseminação.

Question 12

o que sao microrna

Answer 12

estas ultimas são pequenas moléculas de RNA não codificante que regulam a expressão génica, sendo que em indivíduos com cancro encontram-se muitas vezes alteradas.

Question 13

porque se deteta o mRNA

Answer 13

O mRNA é detetado para investigar a expressão de genes específicos relacionados ao tumor

Question 14

O QUE SAO EXOSSOMAS

Answer 14

Os exossomas são vesículas extracelulares que contém proteínas, ácidos nucleicos e lípidos. São importantes por carregar proteínas e material genético que refletem o estadio do tumor

Question 15

QUE mecanismos exitem de libertação dos biomarcadores do tumor no sangue

Answer 15

apoptose e necrose , secreçao ativa ,* Libertação de CTCs , * Degradação da matriz extracelular e * Shedding de fragmentos celulares

Question 16

o que é apoptose

Answer 16

apoptose é um processo de morte celular controlada onde há libertação do conteudo em fragmentos de DNA tumoral circulante

Question 17

o que é a necrose

Answer 17

já a necrose é um tipo de morte descontrolada que ocorre geralmente devido a stress externo, falta de nutrientes ou de oxigénio. Neste caso, o conteúdo das células é libertado diretamente na corrente sanguínea.

Question 18

o que é secreçao ativa

Answer 18

• Secreção ativa- Libertação de biomarcadores de forma controlada como exossomas e microvesículas

Question 19

como se processa a libertaçao de CTC s

Answer 19

Células tumorais que desprendem-se do tumor primário

Question 20

como ocorre a degradaçao da matriz extracelular

Answer 20

Libertação de proteínas tumorais no sangue devido às MMPs (enzimas com nome de metaloproteinases da matriz) que degradam a matriz

Question 21

o que * Shedding de fragmentos celulares

Answer 21

Células tumorais que libertam microvesículas

Question 22

qual o metodo mais comum de clheira

Answer 22

• Sangue periférico: Método mais comum, sendo colhido através da punção venosa e posteriormente analisam-se componentes como o ctDNA e CTCs, exossomas e proteías tumorais

Question 23

como se colhe em fluido pleural

Answer 23

• Fluido pleural: Pode ser colhido por toracocentese, útil para investigar doenças que afetam a cavidade pleural.

Question 24

pq é o segundo metodo de colheita urian

Answer 24

• Urina: Método não é invasivo e é ideal para monitorizar cancros urológicos.

Question 25

como se tira do LCR

Answer 25

): Colhido por punção lombar e é em particular usado para investigar doenças do SNC.

Question 26

o que deteta a bioosia liquida

Answer 26

• Biópsias líquidas permitem deteção e análise de biomarcadores em fluidos corporais, essenciais para identificar alterações genéticas e epigenéticas associadas a doenças

Question 27

quais as pricnipais técnicas dos métodos de análise molecular

Answer 27

PCR digital (ddPCR),⚬ Sequenciamento de Nova Geração (NGS): e ⚬ Proximity extension assay (PEA)

Question 28

o que faz a pcr digital

Answer 28

Técnica extremamente sensivel que permite a quantificação absoluta de ácidos nucleicos (DNA e RNA) e é utilizado em diversas áreas de pesquisa (diagnóstico de doenças, monitorização de tratamentos,)

Question 29

principio do pcr digital e convencional

Answer 29

Princípio do PCR convencional: o digital baseia-se da mesma forma que o convencional , ou seja , amplifica uma sequência específica de DNA, já a ddPCR, em vez de medir a fluorescência durante o processo de amplificaçã divide a amostra em milhares de microgotas, em que cada uma contém uma única molécula de DNA alvo e permite a deteção sensível e precisão: diagnóstico precoce e o monitorização contínua

Question 30

importancia do sequenciamento de nva geraçao

Answer 30

Revolucionou a análise de material genético em biópsias líquidas, no contexto do rastreio e deteção precoce do cancro

Question 31

principio do NGS

Answer 31

Princípio permite a sequenciação simultânea de milhões de fragmentos de DNA, analisando uma quantidade de dados genéticos de uma só vez, sendo capaz de identificar multiplas mutações e variantes genéticas numa única amostra.

Question 32

vantagem do NGS

Answer 32

É altamente eficaz para detetar ctDNA, mesmo em quantidades pequenas e utilizada para sequenciar diferentes regiões do genoma

Question 33

FUNÇAO DO PEA

Answer 33

Técnica altamente sensível e específica, que combina a especificidade dos anticorpos com a precisão das técnicas de amplificação de DNA

Permite a deteção de múltiplas proteínas numa única amostra, o que a torna ideal para estudos de biomarcadores em larga escala, como nas biópsias líquidas

Question 34

principio do PEA

Answer 34

Princípio- Pares de anticorpos são direcionados para se ligarem a uma proteína específica e os anticorpos estão ligados a um oligonucleótido de DNA complementar e os oligonucleótidos aroximam-se e hibridizam formando uma cadeia de DNA dupla, amplificada por PCR permitindo medir a concentração relativadas proteinas-alvo

Question 35

vantagens comuns entre recnicas

Answer 35

 Alta sensibilidade, que permite a deteção de pequenas quantidades de biomarcadores em amostras biológicas
 Precisão na quantificação e identificação de alvos específicos, como mutações ou proteínas específicas
 Deteção de alvos múltiplos: podem ser adaptadas para detetar genes, variantes genéticas, proteínas, entre outras, facilitando uma análise abrangente
 Aplicações clínicas versáteis

Question 36

limitações comuns entre as técnicas

Answer 36

 Custo elevado
 Necessidade de equipamento especializado
 Complexidade técnica
 Interpretação de dados: o grande volume de dados gerado pode ser difícil de interpretar

Question 37

Aplicações Clínicas

Answer 37

• Permite a deteção precoce do ctDNA, o que permite identificar tumores em estágios iniciais que não são detetáveis por exames de imagem. Bastante util em cancro como pulmão, colorretal , da próstata e melanomas
• A medicina de precisão nas biópsias líquidas refere-se à capacidade de personalizar o tratamento oncológico com base nas características genómicas específicas de cada tumor, identificadas por biomarcadores presentes no DNA tumoral circulante (ctDNA) e em outros componentes detetáveis em fluidos corporais como sangue, urina ou saliva.

É possível:
⚬ Acompanhar a resposta ao tratamento em tempo real
⚬ Detetar mutações genéticas específicas. no cancro do pulmão a biópsia líquida deteta mutações em genes como EGFR, ROS1, ALK e BRAF
⚬ Adaptar o tratamento continuamente, substituindo terapias ineficazes ou quando surgem novas mutações que geram resistência

Question 38

Perspectivas futuras

Answer 38

• Melhorias nas técnicas de detecção pelo NGS como NGS mais sensivel e especifico
• Detecção de doenças não neoplásicas expandido para doenças autoimunes e degenerativas
• Integração com IA e Big Data baseada em grandes volumes de dados genómicos, o que vai trazer uma personalização ainda maior das terapias e ajudará a identificar padrões moleculares em grandes populações, melhorando a precisão do tratamento individualizado e o prognóstico dos pacientes.