PCR Flashcards
Significado de PCR
Reacción de la cadena de la polimerasa
En que se basa la PCR
En la replicación
Uso de PCR
Obtener fragmentos de copias del DNA
Para la PCR requiero
- Secuencia del DNA
- Enzima DNA polimerasa
- Desoxiribonucleotidos
- Primers
De donde se obtiene la DNA polimerasa
De Thermophilus Aquaticus(Taq)
que es una bacteria de algas
Cuánta temperatura aguanta la Taq
95°C
Deben se ser diseñados con alta cantidad de Guanina y Citosina
Iniciadores
Temperatura de alineamiento
Es cambiante
Fases de PCR
- Desnaturalización
- Hibridación
- Extensión
Fase en la que se separan las cadenas de DNA a 95°c
Desnaturalización
Fase en la que los primers’ se alinean al extremo
Con temperatura de alineamiento de entre: 50 a 60
Hibridación
Fase en la que Taq polimerasa actúa sobre el complejo templado de primers
Temperatura de 72°
Extensión
PCR tiempo real
Permite cuantificar la cantidad de DNA de la muestra
PCR estándar o punto final
Detección cualitativa, nos dice si esta o no un gen en el DNA
En vez de un primer pone 2 o varios para encontrar más segmentos del DNA
PCR multiplex
