DNA recombinante Flashcards
Formas diferentes en la que se puede aceptar el DNA
- Transformación
- Conjugación
- Transducción
Consiste en captar el DNA del medio ambiente, procedente de otro organismo
Transformación
Consiste en una comunicación continua por medio de una canal, se pasan plásmidos por medio del canal denominado PILI
Conjugación
Forma en la que bacteriófagos (virus de bacterias)
introducen el DNA a las bacterias que pueden
-Acoplar el DNA al propio
-Producir millones de virus y romperse
Transducción
Cuáles son los tipos de cromosomas que tienen las bacterias
- –Los esenciales para vivir
- –Otros que tienen genes que añaden propiedades nuevas a la bacteria (plásmidos) por lo que pueden vivir sin ellos porque no son esenciales para vivir
Pasos para el DNA recombinante
- Se localiza el gen que se desea transferir
- Aislamos el gen utilizando enzimas de restricción que cortan el DNA
- Insertamos el pedazo de gen en otro segmento del DNA (vector)
- Introducimos el DNA recombinado en las células deseadas
- Confirmamos que la célula huésped tiene las propiedades del DNA que se transfirió
- Clona el gen dejando que se multipliquen
Función de las enzimas de restricción
Permiten cortar los fragmentos del DNA (segmentos)
Son endonucleasas, que cortan en medio del DNA
Función de las endonucleasas
Degradar/cortar el DNA extraños
Función de las metilasas
Metilan el DNA propio para que solo se degrade que que no esta metilado
- -Su función es cortar enlaces fosfodiéster del DNA en secuencias específicas
- -Reconocen secuencias polindrómicas
- -Son producida por bacterias en defensa a los fagos
ENDONUCLEASAS
Que es una secuencia polindrómica
Aquellas que se leen igual de 5’ a 3’ que de 3’ a 5’
Verdadero o Falso
Cada bacteria tiene sus propias enzimas de restricción
Verdadero
Función de las endonucleasas tipo 1
Cortan el DNA pero lejos del sitio identificado, el sitio de corte es aleatorio rio arriba o rio abajo
Función de las endonucleasas tipo 2
Reconocen secuencias cortas de 4 a 8 pares de bases
– Son más específicas ya que donde reconocen el sitio de corte es donde van a cortar
Función de las endonucleasas tipo 3
- Reconoce 2 secuencias
- Corta lejos de donde reconoce las secuencias polindromicas
- Hacen corte asimétrico
Función de las endonucleasas tipo 4
- Nuevas
- Reconocen al DNA metilado (osea el cromosoma esencial de la bacteria y lo cortan)
Tipos de cortes de las enzimas de restricción
- Cohesivos
- Romos
Corte realizados en diferente posición
De 3 a 5 nucleótidos libres en ambas cadenas
Cohesivos
Cortes simétricos en ambas cadenas, sin nucleótidos libres
Romos
Verdadero o falso
Los laboratorios prefieren los cortes cohesivos ya que se obtendrán nucleótidos libres por lo que se puede crear un pedazo de DNA que se complemente para empalmarlo
Verdadero
DNA de 2 fuentes diferentes en un solo organismo
DNA recombinante
Qué sucede si el plásmido y el DNA no son cortados con la misma enzima de restricción
Los nucleótidos libres serán diferentes por lo que no se van a poder complementar
Que es un vector
Es una molécula doble de DNA que tiene la capacidad de tomar/albergar un fragmento de DNA exógeno.
Tipos de vectores
- Clonación
- Expresión
Vector de clonación
- -Almacenan varias secuencias
- -Se obtienen grandes cantidades de DNA
- -Plásmidos, bacteriófagos, cósmidos
Vector de expresión
-Se encarga de producir un transcrito o proteína del pedazo de gen que estoy albergando
Componentes de un plásmido de clonación
- Su origen de replicación
- Secuencias poliandromicas
- Lugar de resistencia a antibiótico
Secuencia que será reconocida por enzimas de restricción para insertar el DNA
Secuencias polindromicas
Componentes del plásmido de expresión
- Origen de replicación
- Sitio de entrada a ribosomas
- Secuencia polindromica
- Cola de poli A
Tipos de vectores de clonación hasta el momento
- Plásmido
- Bacteriófago
- Cósmido
