PCR Flashcards
qué hace una DNA polimerasa?
polimeriza una cadena de ADN a partir de una preexistente
polimerasa que se usa en PCR
Taq polimerasa
para qué se usan los iniciadores de la PCR?
para reconocer secuencias blanco en el molde de ADN
en qué aminoácidos son ricos los iniciadores?
GC
pasos de la PCR
- desnaturlización
- hibridación
- extensión
qué pasa en la fase de desnaturalización
se separan las cadenas de ADN
temperatura de desnaturalización
95°
qué pasa en la hibridación?
los primers se alinean al extremo 3’
temperatura de la hibridación
50-60°
qué pasa en la extensión?
la Taq polimerasa actua sobre los primers y añade dNTP’s para hacer cadenas completas
temperatura de la extensión
72°
Técnica mediante la cual mediante la cual se separan las biomoleculas en
disolución cuando se ven sometidas a un campo eléctrico.
electroforesis
función de la PCR punto final
amplificar o identificar segmentos de ADN
PCR punto final cualitativa o cuantitativa
cualitativa
función de la PCR tiempo real
detectar carga viral o bacteriana
PCR tiempo real cualitativa o cuantitativa
cuantitativa
función de la PCR transcriptasa reversa
detecta virus ARN
qué detecta la PCR RFPL?
polimorfismos
qué se usa en la PCR RFPL?
enzimas de restricción
función de la PCR multiplex
detecta 2 o más genes en una sola reacción PCR
qué se usa en la PCR tiempo real?
tinciones
sondas
fluoroforos
qué es una sonda?
secuencia específica de NT de 1 gen
qué son los microarreglos?
expresión de muchos genes a la vez
cuando se usa PCR y cuando Southern?
- PCR: hay poca muestra y es más sensible
- Southern: más muestra, mas lenta y mas facil que multiplex
