P8 Flashcards
Fale da hemoglobina.
A hemoglobina presente no glóbulo vermelho de um adulto saudável é, na verdade, uma mistura heterogénea de hemoglobinas, separáveis por eletroforese: HbA (cerca de 90%), HbA2 (2,5%) e HbF (0,2%).
Em que consiste a glicosilação?
Ocorre em cerca de metade das nossas proteínas e também em alguns lípidos, é um processamento enzimático altamente controlado que ocorre no reticulo endoplasmático e no aparelho de Golgi e consiste na junção de cadeias peptídeas variadas à estrutura da molécula.
É um processo fundamental na conformação e função de proteínas e lípidos.
Fale da hemoglobina glicada.
HbA, pode ser glicada de modo não enzimático no
radical terminal de cada cadeia , para formar glico-hemoglobina (HbA1). A HbA1 forma-se lenta e continuamente, de forma estável e irreversível, durante os 120 dias de vida do glóbulo vermelho (GV). É constituída por três frações, separáveis por eletroforese: HbA1a, HbA1b, HbA1c, sendo esta última a componente maioritária, pelo que frequentemente se usa HbA1c como sinónimo de Hb glicada.
Relacione a hemoglobina glicada e doentes com diabetes.
Nos doentes diabéticos, existem uma quantidade elevada de Hb glicada, uma vez que os seus níveis traduzem o valor médio de glicémia.
- -> Como o GV tem 120 dias de vida, os níveis de Hb glicada podem dar indicações dos níveis de glicémia até 3 meses antes de se fazerem as analises.
- -> Por estas razões, a Hb glicada é um ótimo controlo da glicémia das diabetes.
Como se faz a preparação para a determinação da percentagem de hemoglobina glicosilada por cromatografia de troca iónica?
Cromatografia de troca iónica:
o Técnica para quantificar os níveis de HbA1c (hemoglobina glicada)
o Numa 1ª fase (fase estacionária), a hemoglobina (carregada positivamente) liga-se a uma resina trocadora catiónica (com grupos COO-).
o De seguida, coloca-se um eluente, mais precisamente um tampão fosfato com iões sódio que competem com a ligação da Hb, arrastando as cargas positivas. Como a hemoglobina glicada é “menos positiva” que a Hb normal, a ligação à resina é menos eficiente, sendo, portanto, a primeira a ser obtida através da eluição.
Quais são os reagente usados?
Fizemos a experiência com sangue hemolisado a partir biftalato de potássio (faz a lise do eritrócito). Colocámos o sangue numa coluna preparada com resina e, de seguida, eluímos com um tampão fosfato.
No final, medimos a DO (DOHbA1c), medimos também a DO de sangue hemolisado (DOTOTAL), sendo que a % de Hb glicada é medida através da seguinte formula. TABLET
