owady

Question 1

S2

Answer 1

dużo białka, ekspresja ciągła, wektor wprowasdzony metodą precypitacji z fosforanem wapnia

Question 2

Sf9, Sf21

Answer 2

ekspresja przejściowa, transekcja przez wirusy, 27 stponi, nie przeba stosować antybiotyków i surowicy

Question 3

Hi5

Answer 3

bakulowirusy, bardzo dużo białka, ale komórki umieraja po 3 dniach, dobre do białek toksycznych

Question 4

owady zalety

Answer 4

50% białek to rekombinowane
wydajna ko-produkcja
bezpieczny dla ludzi
obróbka potranslacyjna
identyczna oglikozylacja

Question 5

wady

Answer 5

droższy niż bakterie, więcej czasu do uzyskania białka, różna n- glikozylacja

Question 6

różna n- glikozylacja rozwiązanie

Answer 6

linia Mimic, wprowadzono 2 enzymy

Question 7

RMCE- miejscowospecyficzną integrację do genomu:

Answer 7

Wprowadzenie do genomu gospodarza białka reporterowego i genu odporności na antybiotyk, otoczone sekwencjami rozpoznawanymi przez rekombinazę

stabilne linie komórkowe

najlepszy producent

Rekombinacja miejscowospecyficzna z wektorem niosącym GOI i gen rekombinazy

Uzyskanie linii komórkowej o wysokiej, stabilnej ekpresji

Procedura bardzo czasochłonna!

Question 8

Cykl życiowy bakulowirusa

Answer 8

Ciałko krystaliczne na roślinach

Owad zjada ciałko krystaliczne razem z rośliną, otoczka polihedrynowa rozpada się, uwalniając wiriony

Wiriony wnikają do jąder komórek epitelialnych

Replikacja DNA (faza wczesna infekcji)

Nowe nukleokapsydy opuszczają komórki gospodarza w formie opłaszczonej (faza późna)

Infekcja wtórna- opłaszczone wirusy infekują komórki sąsiednie

Nukleokapsydy w jądrze komórkowym zostają uwięzione w polihedrynie- tworzenie ciałke krystalicznych (po ok. 24 h)

Liza komórek gospodarza i uwolnieni bakulowirusów (po 2 dniach)

zastąpienie polihedryny GOI