Monoklonala Ak inom cancerterapi Flashcards
beskriv strukturen för en antikropp
består av en Fab-del och en Fc-del
Fc-delen binder till Fc-receptorer medans Fab-delen binder till antigenet
är uppbyggd av 4 tunga kedjor och 2 lätta kedjor där de yttersta delarna är Fab-delarna har hypervariabla regioner
vilka egenskaper har polyklonala antikroppar?
dessa har olika specificitet med batchvariabilitet
är starkt immunogena
tas ut från blodet av ett djur
Förklara hur ett hybridom tas fram, vad används de till?
Antikroppsproducerande B-lymfocyt tas ut från ett immuniserat djur, dessa kan inte växa in vitro men har vissa enzym som behövs
Hybridiseras med en tumörcell av B-lymfocytsursprung som inte producerar antikroppar, dessa har ohejdad tillväxt men en enzymdefekt som gör att de inte kan växa i selektionsmedium
“äkta” hybridom selekteras ut, kontrolleras för antikroppsproduktion och sen isoleras klonen
-> produktion av monoklonala antikroppar
vilka egenskaper har monoklonala antikroppar?
dessa är identiska, från samma klon
selektion av hög affinitet
kan användas för massproduktion
immunogena (från möss)
beskriv egenskaper för rekombinanta antikroppar
dessa är identiska
har hög affinitet
kan användas för massproduktion, är billigare
kan klippas till små fragment och därmed skräddarsys, mindre immunogena (humaniserade)
ge exempel på framtidens antikroppar som kan användas i cancerterapi
mimetics: syntetiska molekyler som kan härma antikropparnas egenskaper
naturliga antikroppar från olika arter som gör enklare typer av Ak eller Ig-liknande molekyler t.ex. hajar, kameler och insekter
vad är fördelarna med monoklonala antikroppar vid cancerterapi?
dödar med specificitet
dödar tumörceller som blivit resistenta mot annan behandling
dödar även vilande tumörceller
kan kombineras med annan terapi utan ökad toxicitet
vad är viktigt att tänka på vid utvecklandet av en antikroppsterapi?
Bra targetstruktur:
finns endast på tumörcellen finns på alla tumörceller finns på många olika typer sitter tillgängligt för antikroppar stabil-förändras ej av mutationer sitter fast och spjälkas inte av
ge exempel på tumörspecifika och tumörassocierade antigen
Normala antigen: klonala antigen differentieringsantigen embryonala antigen överuttryck av antigen antigen i fel vävnad
muterade antigen- onkogener, supressorgener (RAS,p53), receptorer för tillväxtfaktorer
virusantigen
ge exempel på targets som inte sitter på tumörcellen
antikroppar mot molekyler på blodkärl
antikroppar som binder till molekyler på immunceller
hur kan blodkärl användas som mål med antikroppar och hur hjälper det vid cancerterapi?
Targets:
VEGF
fibronectin (unika för tumörvävnad)
integriner
förhindrar angiogenes vilket är essentiellt för tillväxt av tumörer
hur kan immunceller användas som targets?
kan rikta sig mot CTLA-4 (=inhiberande, binds av B7)vilket gör att T-celler lättare aktiveras och kan avdöda cancerceller
kan även binda till PD-1L vilket finns på APC och kan inhibera T-celler, Ak gör att T-celler inte inhiberas
vad finns det för olika monoklonala antikroppar inom cancerterapi?
nakna antikroppar
konjugerade antikroppar
bispecifika antikroppar
CAR T-celler
hur kan nakna antikroppar fungera inom cancerterapi?
negativ signalering
receptorblockad ex. tillväxtfaktorer
dimeriseringsblockering- receptortyrosinkinaser måste dimerisera för att ge signal
komplementaktivering- Ak binder tumörcell, komplement binder till Fc-delen-> MAC-komplexet
ADCC- Ak binder Ag, Nk-cell binder till Ak via CDC16 -> utsläpp a perforin -> lysering
vad finns det för olika Fc-receptorer som man ex. kan rikta en behandling mot inom mk-cancerterapi?
CD16: NK-celler, makrofager, neutrofiler
CD32: makrofager, neutrofiler, trombocyter
D64: makrofager, neutrofiler, dendritiska celler
hur kan man optimera bindningen på Fc-receptorer?
man kan modulera Fc-delen på antikroppen genom att påverka glykosyleringen för att skapa optimal bindning till önskad Fc-receptor
FcR binder subklasser av IgG med olika affinitet
hur kan konjugerade antikroppar användas inom cancerterapi? vad är fördelen?
man kan använda antikroppar konjugerade till isotoper, cytostatika, toxiner, cytokiner
finns även ADEPT (antibody directed enzyme prodrug therapy)
fördelen är att effekten är lm endast har verkar
vad innebär “bystander” effekten? vid vilken behandling sker detta?
det innebär att celler runt om tumörcellen också drabbas, sker vid antikroppsbehandling där ak är kopplade till isotoper
hur fungerar immunoliposomer?
antikroppar kopplade till lipidvesiklar innehållande läkemedel
ak binder till cell, vesikel tar sig in i cellen och släpper ut cytostatika
hur används bispecifika antikroppar inom cancerterapi?
dessa behandlingar går ut på att två antikroppar konjugeras, där en binder till targetcellen och den andra binder till effektorceller ex. CD3 hos T-celler
-> avdödning av tumörcellen
hur fungerar CAR-T-celler?
här så ersätts T-cellsreeptorn med en monoklonal antikropp mot tumörcellen
patientens T-celler skördas, genmodifieras och injicieras sedan tillbaka till patienten
vad är problemen med monoklonal antikroppsterapi?
dessa är immunogena
kort halveringstid
för stora, vilket leder till att de inte alla gånger når fram till tumörcellen
dyrt
biverkningar
kan ej attackera intracellulära targets
låg response rate för vissa patienter av oklar anledning
hur kan man göra antikropparna mindre i storlek? vad är fördelarna/nackdelarna?
kan antingen använda fragment t.ex. Fab-delen av Ak eller ännu mindre bitar dvs nanobodies
kan även använda sccFv (single chain fragment variable): proteinkedja som är veckad och liknar bindningssiten för Ig
fördelar: kan penetrera in i tumörer och komma åt svåra targetantigen
har dock kort halveringstid och lägre affinitet
vad finns det för olika tekniker för att göra antikroppar mer humaniserade?
chimeric= varaibla delen från mus tsm med humana konstanta regioner
reshaped= hypervariabla delar från mus med humana variabla delar och konstanta regioner
helt humana= hybridom från transgena möss med humana Ig-gener
phage display libraries
förklara fagdisplayteknik
bakteriofager innehållande humana Ig-gener tillsätts till platta med targetantigen
de bakteriofager med villis innehållande “rätt” antikropp kommer då binda till antigenen
dessa isoleras sedan och låts infektera E.coli bakterier som börjar producera rätt Ig-proteiner
