Molekylærbiologi Flashcards

1
Q

vi kan bruke bakterier som ecoli til å klone spesifikke gener ved å:

A
  1. bruke restriksjonsenzymer til å kutte ut det bestemte genet vi ønsker fra en DNA sekvens
  2. legge til genet i et plasmid ved hjelp av DNA ligase
  3. så settes plasmidet inn i en bakterie
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

restriksjonsenzymer i bakterieceller

A

oppstår naturlig som en måte å beskytte bakteriet fra fremmed DNA f.eks fra virus ved å bryte ned DNAet

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

rekombinant DNA

A

kombinering av DNA sekvenser fra ulike kilder som modifiserer genet. blir dannet et kunstig DNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

hva trengs for å danne et cDNA-molekyl i en bakteriecelle?

A

vi trenger et ferdig modifisert modent mRNA fra en eukaryot celle

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

første steg i cDNA syntese/RT-PCR:

A

mRNA-molekylet med geninformasjonen vi ønsker vil gjennom enzymet revers transkriptase syntensere et korresponderende DNA-molekyl

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

andre steg i cDNA syntese/RT-PCR:

A

den nye korresponderende DNA-tråden vil separeres fra mRNA-tråden
DNA polymerase vil nå danne en komplementær tråd til DNA-tråden for å danne et dobbeltrådet DNA-molekyl (cDNA)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

hva skjer med den nylig syntenserte cDNA-molekylet?

A

ved hjelp av en vektor kan molekylet bli satt i en bakteriecelle for å bli klonet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

primer brukt i første sted av cDNA syntese/RT-PCR:

A

oligi(dT)
- stabiliserer mRNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Sanger DNA-sekvensering

A

metode å finne ut sekvensen på DNA
- gir oss geninformasjon, genutrykk og hvilke proteiner som dannes

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

hvordan skjer oppkuttingen av genet fra DNA-kjeden før den blir satt i plasmid?

A

ved hydrolyse blir fosfodiesterbindingen brutt
må være en palindromisk sekvens
- leses lik fra 5’ til 3’ enden som fra 3’ til 5’ enden

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

PCR (polymerase chain reaction)

A

ved PCR kan vi kopiere millionvis av kopier av DNA-sekvenser uten å bruke bakterier

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

hvilke 4 ting er nødvendig for å gjøre PCR?

A
  1. produkt, DNA sekvens som skal replikeres
  2. et par med DNA-primere
  3. varmeresistant DNA polymerase
  4. alle fire nukleotidene (dntp) som byggeblokker
    - adenin, guanin, tymin og cytosin
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

første steg av PCR:
(temperatur)

A

temperatur hevet til 94 grader slik at DNA-trådene kan denatureres og bli tatt fra hverandre
temperaturen vil så bli tatt ned til 54 grader så DNA primerne kan binde seg til trådene og hindre dem fra å gå sammen igjen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

andre steg av PCR:

A

etter DNA primerne er bundet blir temperaturen hevet til 72 grader så DNA polymerasen kan begynne og sette på korresponderende nukleotider

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

flanking sekvens

A

deler på DNA tråden som ikke er med i genet ved PCR
- sekvens hvor primerne og DNA polymerase vil binde seg

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

DNA microarray

A

analyse metode for å finne ut hvilke gener og proteiner som aktivt blir utrykt på bestemt tidspunkt

17
Q

site directed mutagenese

A

PCR basert analyse metode hvor man kan endre på spesifikke aminosyrer
dette danner små mutasjoner og kan fortelle oss hvor viktige de forskjellige aminosyrene er for proteinet

18
Q

CRISPR

A

genteknologisk metode å endre å manipulerere DNA og gener