Molecular motors Flashcards

1
Q

Was sind molekulare Motoren?

A

Sind Proteine, die Energie in Form von ATP / GTP in mechanische Arbeit umwandeln können.

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2
Q

Welche Arten von molekulare Motoren gibt es? Geben Sie Beispielen.

A

Translationale: Move in one dimensional fashion Atep along a linear track. –>Kinesin, Dynein, Myosin, Helicasen.

Rotierende: usually embedded in the cell membrane. It generates torque by rotation. –>bakt. Flagellenmotor

Polymerisierende: mechanical work by polymerization. –> Mikrotubuli & Actinfilamenten

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3
Q

Aufbau von KINESIN.

A

Head: ATP & Mikrotubuli Bindeaktivität.

Neck: linker

Stalk: alpha helical coiled Domain.

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4
Q

Mechanical Properties von KINESIN.

A

Velocity: 2000 nm/s

Stall force: 5-7 pN

step legth: 8 nm

run legth: 1 um

processivity: high processiv

where? Microtubuli

which polarity direction? + pol -> Dynamic end!

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5
Q

Step size

A

Distance moved by a motor per ATP hydrolysis event.

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6
Q

Processivity

A

Schrittzahl der Motoren maximal leisten kann.

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7
Q

Stall force

A

die höchste Kraft, die ein Motor aushält ohne Rückwärts zu rutschen.

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8
Q

Mikrotubuli Eigenschaften

A
  • lineare polare Filament
  • aus Polymerisierung von alpha und beta tubulin
  • 13 Protofilamenten
  • const. Gitter aus 8 nm
  • stable end (-), highly dynamic end (+) Zellperipherie
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9
Q

Wie verhält sich die Geschwindigkeit abhänging von der ATP Konzentration?

A

–> Die Geschwindigkeit nimmt mit der ATP Konzentration zu ( Sättinguns Kurve-> Michaelis Menten Kinetik)

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10
Q

Was ist die maximale Kraft ein Motor ausüben kann?

A
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11
Q

Was ist die max. Arbeit pro Schritt? Wie kann man diese mit der freier Energie vergleichen?

A
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12
Q

Erklären sie den Mechanismus von der Walking Motion von Kinesinen?

A

–> Alle Kinesie benutzen nucleotide turnover, um zwischen high & low Mikrotubuli Affinität zu wechseln.

Die Bindung von ATP in einem Köpfchen lässt ADP aus anderen Köpchen raus.

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13
Q

Mechanical Properties von DYNEIN.

A

Velocity: 7 um (cyt) / 1 um (axon)

Stall force: 7 pN max

step legth: 8 nm bzw. multiples of 8

run legth: 1um

processivity: -

where? Microtubuli

which polarity direction? - pol -> Centromeren in Zellinneren

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14
Q

Welche Typen von Dyneinen gibt es? und wie sind die Charakterisiert?

A

Axonemales Dynein: in Zellen mit Cilien & Flagellen, wenn aktiv: Verursacht Krümmung

Cytoplasmatisches Dynein: Bewegung von Organellen & Cargo essentiell für Centrosome Assembly & Spindelfunktion.

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15
Q

Was ist die “ heavy Chain” in die molecular motor DYNEIN?

A

homodimer mit 2 identischen Motordomänen.

–>hexameren Ring AAA mit 3 Anhängen:

  1. Stalk: coiled coil, MT bindende Domäne
  2. Buttres: pfeiler
  3. Linker: mechanisches Element

–> AA1 is the main hydrolitic site, that drives the motility cycle.

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16
Q

Experiment-Beschreibung.

Kinesin random walk inverted assay

A

Microtubules on Kinesin-coated glass surfaces

–> Milimeter lange Filamenten brauchen mikrometer lange Tracks, um die selbe Richtung beizuhalten. Ansonten durchlafen die ein “random walk”.

17
Q

How does the dynein walking motion works?

and which is the main hydrolitic site that drives the motility motion?

A
  1. an Mikrotubuli (MT) gebunden mit überlappende AAA Ringen. –> Nukleotid abh. Konformationsänderungen. Der Linker- Element ist in TIGHT an den Köpfchen gebunden, wenn versetzt, dann WEAK.
  2. Displaced head undergoes rapid difusion search and rebind to MT 8nm weiter ( or multiples from it ) –> Unterschiedliche Schrittlänge wegen diffusions Komponent ( 4-24nm) bzw. Diffusional search!

—> AAA1 is the main hydrolitic site, that drives the motility cycle. “ Linker swing” movement between straight and bent conformation results in a power stroke.

18
Q

What is the dynein microtubuli assay?

  • Bau des Experiments
  • Resultate
A

–> optical trapping assay

–> Dynein ist an 1 mikrometer Bead gebunden, während Dynein entlang MT läuft. übt die Falle eine entgegegesetzte Kraft aus.

=> lauft dauert (t) = ca. 2,3 s. / vmax = 20 nm/s / stall force= 200 ms , 1 +- 0,5 pN.

19
Q

Mechanical properties of MYOSIN

A

velocity: 0,2 mikrometer/s (V) - 6 mikrometer/s (II)

stall force: 1- 10 pN

step length: 5 nm (II) - 36 nm (V)

run legth: more than 100 nm

20
Q

Aufbau von MYOSIN

A

Head: bindet an filamentöses ACTIN, nutzt ATP hydrolyse, um Entlang des Filaments in Richtung (+) Ende zu laufen. // MYOSIN VI (-)

Neck: Linker und Hebelarm für Kratübertragung

Tail: interaktion mit Frachtmolekülen (Cargo) oder anderen Myosion UE.

21
Q

DYNEIN // KINESIN // MYOSIN

Velocity

Stall force

Step length

Run length

processitvity

where?

direction?

A