Alt Klausuren Flashcards
Was bedeutet σ und epsilon?
Spannung: Materials ability to resist force = F/ A
Dehnung: relative Längenänderung = L-Lo
was besagt der Quotient aus beiden (Spannung/Dehnung) über das Material ?
Elastizitätsmodul, also Young Modul. Wie elastisch ein Material ist.
was versteht man unter Reißlänge R ? Zeichnen Sie diese in eines der Diagramme ein.
Was versteht man unter Fließstärke?
Reislänge: Maximum der Spannung Dehnungskurve
Fließstärke: Bei größer Spannung , ab den irreversibler Fließpunkt. Material undergoes plastic flow (Yield) , where component of the material are permanently displaced. Bsp. Plateau von elastisch-Plastische Materialien
nenne Sie 2 Bespiele für C-Materialien, und welche positiven Eigenschaften haben diese ?
Haut und Seide. Bei starker Spannung dehnen sie sich wieder aber einen nicht ab . oder sehr spät erst ab. Können nicht wieder züruck zum ursprünglichen Zustand kehren.
Im Bild ist ein berühmter experimenteller Aufbau von Noji et al. gezeigt, mit dem bewiesen wurde, dass sich die Fo und F1 Teil tatsachlich gegeneinander drehen. Hier läuft der Motor unter ATP-Verbrauch rückwärts. Die Aktinfilamente sind am nicht gezeigten Ende mit Fluoreszenz markiert.
- Erklären Sie den Experimentellen Aufbau.
- Wie die Drehung hier erzeugt wird?
- Was ist die natürliche Funktion von UE a und warum wird diese hier nicht gebraucht?
- F1 Untereinheit wurde auf einen Träger befestigt und die C-Untereinheiten mit fluoreszentem Aktinfilament verknüpft, die Rotation kann dann unter dem Mikroskop als Fluoreszenz verfolgt werden.
- durch ATP-Verbrauch in der F1-Untereinheit, der Motor läuft rückwärts
- vermittelt den Protonen-Eintritt in die C-Untereinheit und Austritt aus der C-UE auf der anderen Membranseite
Jablonski Diagramm 1. von S1-> S0 2. S1 ->->->S1 3. S1 -> S0 4. S1 -> T1 Was beschreibt den Jablonski Diagramm und welche Bedeutung haben die Pfeile 1 bis 4 ?
Beschreibt Anregungsvorgänge durch Licht. Hier kann ein Molekül durch Absorption eines Photons aus dem Zustand S0 in einen (angeregten) Zustand S1 übergehen.
- Absorption, Übergang vom Grundzustand in den 1. angeregten Singulettzustand
- interne Relaxation (IC)-> Strahlungslose Desaktivierung, Energie wird an der Umgebung weitergegeben.
- Fluoreszenz –> Von S1->S0 unter Photonabstrahlung. ( längere Wellenlänge, Stoke´s Shift)
- ISC-> Übergang vom angeregten Sigulettzustand in den angeregten Triplettzust.
Was ist die Definition eines Fluxes , welche Maßeinheit hat ein Konzentrationsflut?
Flux=A*v (A:Transportgröße, v: Transportgeschwindigkeit)
Welches Gesetz beschreibt den Flux einer ungeladenen Substanz (Name oder Formel)
Ficksches Gesetz. -> the rate at which one substance diffuses through another is directly proportional to the concentration gradient of the diffusing substance. (from high concentrations to low concentration -> along a gradient!)
Was versteht man unter dem Ruhepotential ?
Potential für das der Nettostrom durch alle Kanäle = Null ist.–> Electroneutrality: that is, that there is no measurable charge excess in any side of the membrane, and there is no actual measurable difference in the global concentration of positive and negative ions across the membrane.
Wie ändert sich das Potential durch die Wirkung von K-Pumpen (pumpen nach außen; Antwort + Begründung?
der Zähler wird größer, dh, dass das Potential sich erhöht.
–> Vk = Nernst Potential für Kalium : -80 mV
Wie ändert sich das Ruhepotential, wenn man die Na-Kanäle verschließt (Antwort + Begründung)?
Unter der gegebenen Annahme (Na außen>Na inside) wird der Zähler kleiner, d.h. das Ruhepot. sinkt.
–>Öffnen von Natriumkanälen ermöglicht das Eintretten von Na + Ionen, wodurch eine Depolarisation statt findet.
V Na: Nernst Potential für Natrium ist +60 mV
In einer photometrischen Messung von Rhodopsin ermitteln Sie eine Extinktion von E = 2,3. Wie viel Prozent des eingestrahlten Lichts passiert dabei die Probe? Was ist die Konzentration ihrer Probe bei einer Schichtdicke der Küvette von 1 cm?
Also passieren 0.5% des Lichts die Probe. epsilon 500= 50000 x 1 x Mol.cm
Was versteht man unter „Elektrodiffusion“?
Nettobewegung von Teilchen entlang chemischer und elektrischer Gradienten.
Wann spricht man in der Photobiophysik von einem Singulett-, wann von einem Triplett- Zustand?
In den Singulettzuständen S weisen die Elektronen antiparallelen Spin auf. In den Triplettzuständen T hingegen besitzen die Elektronen parallel zueinander ausgerichteten Spin.
Was wird durch ATP Zugabe bei molekularen Linearmotoren erreicht ?
Direktionalität
worin liegt die Ursache, dass jeder biologische Linearmotor nur in eine Richtung wandert ?
können Sie erklären, wieso der intraflagellare Transport von Proteinen dennoch in beide Richtungen möglich ist ?
Umsymmetrie (Polarität) des Substrats –> Unter Verwendung von 2 Motoren mit orthogonaler Direktionalität.
In vielen Archaeen und marinen Bakterien, die kein Chlorophyll besitzen, findet eine Konversion von Lichtenergie in ein elektrochemisches Potential mit Hilfe von lichtgetriebenen Protonenpumpen statt. Wie nennt man diese Pumpen ?
Bakteriorhodopsin oder Proteorhodopsin.
Rechts ist das zyklische Reaktionsschema abgebildet, auf dem das sogenannte IST- Modell beruht. Was bedeuten „I“, „S“ und „T“ in diesem Modell ?
I = Isomerisierung S= Strukturänderungen T= Transport
Wie ist das Funktionsprinzip von IST model in der Bakteriorhodopsin ?
Welcher chemische Prozess und welche 3 biophysikalischen Änderungen treten in diesen Molekülen auf, die den Protonentransport treiben ?
–> Chem: AREPKA
–> Strk. Änd. : 1. Ladilla, 2. piKa el proto
IST –> Isomerisierung, Strukturellenunterschieden & Transport
Chemische Prozessen:
- Änderungen des Protonennetztwerkes ( durch aktiviertes Wasser)
- Retinalisomerisierung,
- pK-Änderungen
Strukturelle Änderungen
- Ladungsverteilung–>RSB (Retinal Schiff Base)-Isomerisierung
- pKa Änderungen–> Protonentransport!
Wie geschieht bei der ATP-Synthase (F0F1-ATPase) die Kopplung zwischen Protonenfluß und ATP-Synthese ? Bitte erklären Sie das in maximal 3 Sätzen unter zur Hilfenahme des abgebildeten Modells der F0 Untereinheit
Protonen diffundieren über den Zugangskanal (grüne Röhre) und binden reversibel and deprotoniertes Asp/Glu in UE-C. Erst das Ungleichgewicht zwischen H-Konzentrationen innen und außen führen zur Nettorotation.
–> Gamma rotation bewirkt die Kopplung zwischen mechanische Kopplung zwischen H+ Transport und ATP-Synthese!
Was versteht man in der ATPase-Forschung unter der „Proton Well“ Hypothese ?
das Membranpotential führt zur Protonenakkumulation auf der positiven Membranoberfläche / Membranseite und kann ohne echten pH-Gradient die Pumpe antreiben.
-> Nutzung von elektrische Spannung als Triebkraft. Abfallende Spannung in der Membran wird als pH-Änderung umgewandelt. => Alles zum Erhöhung der pmf zum ATP-Synthese.
Differenz zwischen elektrische Spannung:
- 60 mV x pH Änderung
Erklärt:
- Na+ getrieben Motoren in Bakterien
- Drehmoment zwischen C-Rand und A Stator
Nennen Sie 4 konsekutive Schritte bei der Proteinfaltung
- hydrophobe Wechselwirkung,
- Rotation der αC-Winkel,
- Ausbildung von Wasserstoffbrückenbindungen,
- Ausschluß von Wasser,
- Ausbildung kovalenter S- S Brücken
Benennen Sie die Auswirkungen der Faltung auf Enthalpie ΔH, Entropie ΔS und die freie Gesamtenthalpie ΔΔG
ΔH: nimmt in der Regel ab / ist negativ
ΔS: nimmt zu / ist positiv–> release of free water
ΔG: nimmt ab / ist negativ (At native state)
erklären Sie die Funktion eines Chaperons und seinen Einfluß auf den korrekt gefalteten Zustand eines Proteins.
Vermeiden von falsch gefalteten Zuständen. Die dienen als major function: to prevent both newly synthesised polypeptide chains and assembled subunits from aggregating into nonfunctional structures
Was versteht man unter einem Ramachandran Plot?
die Auftragung der in einem Protein vorkommenden Winkel Φ gegen Ψ. Es zeigt eine Konformationsanalyse von Proteinen, und welche Torsionswinkel erlaubt sind.
Bakteriorhodopsin ist eine Ionenpumpe, bei der durch Absorption eines Photons ein Pumpvorgang ausgelöst wird.
Worin besteht die biol. Funktion des Vorganges (0.5P) Erklären Sie, was gepumpt wird (0.5P), welcher Farbstoff das Photon absorbiert (0.5P) und wieso die daraus resultierenden Proteindeformationen dazu führen, dass das Ion von einer Bindungssite zur nachfolgenden transferiert wird.
(Protonen, Retinal; es kommt zu dG-Änderungen; nach, Energiespeicherung)
Funktionen:
- Einfangen von Energie
- Transport von H+ gegen elektrochemischen Gradient
- und dadurch Erhöhung des Gradients-> als Energiereserve
- Nutzung von elekt.chem. Gradient als Energiequelle für weitere Prozesse.
–> H+ Protonen werden diskonzinuierlich transportiert.
–> Retinal absorbiert Photonen = Isomerisierung.
–> es kommt zu dG-Änderungen
Was versteht man unter Fluoreszenzdepolarisation und was kann man damit messen?
Nach Anregung mit einem polarisierten Lichtblitz, wird die Depolarisation der Fluoreszenz beobachtet.
Je größer das Molekül, um so langsamer erfolgt die Drehung und um so langsamer auch die Depolarisation. Man gewinnt also Information über die Größe der beteiligten fluoreszierenden Moleküle.
Ein Protein mit 50 Aminosäuren soll sich falten. Dabei seien pro Aminosäure je zwei verschiedene Backbone Torsionswinkel ψ and Φ zugelassen und jede Aminosäure kann dabei je 3 weiter unterschiedliche Konformationen annehmen. Wie lange dauert es mindestens bis alle Konformationen des Proteins durchlaufen wurden, wenn pro Sekunde 108 Zustände durchlaufen werden?
3x2xn ≈ 10xn Konformationen. t = 10x50 10x-8 s =10x42 s
Was bedeutet dieses Ergebnis für die Faltung von Proteinen in der Zelle und wie wird diese theoretische Betrachtung genannt?
Levinthalsches Paradox: die Faltung läuft in Wirklichkeit sehr viel schneller ab. -> Vielmehr gibt es natürliche Mechanismen, welche die Ausbildung der optimalen Faltung begünstigen. (Specific pathways with folding intermediates)
Welche Erklärungsansätze gibt es für die wesentlich schnellere Faltung von Proteinen?
Es werden nur sehr viel weniger Faltungswege beschritten als theoretisch möglich sind, da viele energetisch ungünstig sind, oder nach anfänglichen Faltungsprozessen nicht mehr möglich sind.
–> Folding relies on the cooperation of many weaks non covalent interactions.
Berechnen Sie das Umkehrpotenzial von K+ für eine Zelle, wenn die Innenkonzentration 10mM und die Außenkonzentration 410mM beträgt. (2P) Hinweis: RT/ F X 2,3=60mV
Nernst Gleichung
Was besagen die Variablen: Μ, Y , φ, L?
M: Drehmoment,
φ: Rotationswinkel,
Y: Torsionsmodul,
L : Länge
Was versteht man bei der Spektroskopie unter dem Franck-Condon-Bereich (FCB) und was unter “Vibrational Cooling” (VC) ?
FCB: Der FCB entspricht jener Energie, durch die das Molekül unter Beibehaltung seiner Kernkordinationen nach Absorption ein Photons in den S1-Zustand angeregt wird und von wo aus ein Teil der Anregungsenergie strahlungslos abgegeben wird, während das Molekül anschließend in das unterste Schwingungsniveau des angeregten Zustands übergeht.
VC: Schwingungsinaktivierung im angeregten Zuständen wie z.B. S1
Was versteht man unter Born-Oppenheimer Näherung und warum ist diese Näherung für die Spektroskopie von Bedeutung?
Die Born-Oppenheimer-Näherung beruht auf der gegenüber den Kernen wesentlich schnelleren Elektronenbewegung. Während der schnellen Anregung eines Elektrons in einen höheren elektronischen Zustand kann somit angenommen werden, dass sich die Kernkoordinaten nicht ändern. Die Bornoppenheimernäherung stellt dabei die Basis des Frank-Condon-Prinzips dar und erklärt unter Anderen die Rotverschiebung der Fluoreszenzspektren gegenüber der Anregungsspektren.
Erklären Sie, warum die RNA-Polymerase als Linearmotor bezeichnet wird?
Die RNA-Polymerase transkribiert RNA in die 5’-3’-Richtung der DNA und verrichtet auf diese Art und Weise gerichtete mechanische Arbeit gegen eine Reibungskraft, was sie als linearen Motor auszeichnet.
Wie wird die Direktionalität bei molekulare Motoren erreicht und wo kommt die Energie her?
Die Direktionalität resultiert aus dem negativen ∆G und der damit verbundenen Energiefreisetzung durch Spaltung der Phosphatbindung der anzuknüpfenden Nukleotidtriphosphate.
Erklären Sie welche 3 Teilprozesse beim Einbau des neuen Nukleotids die Energiefreisetzung und Irreversibilität bewirken.
(Molecular motors)
Einlagerung des NTPs, Ladungsverschiebung bei der PP-Abspaltung, Freisetzung des PP
Quantenausbeute
für einen photobiologischen Prozess genutzte Quanten / abs. Quanten
Emmitierte Photonen / Absorbierte Photonen
Extinktionskoeffizient
molare Absorptionwahrscheinlichkeit einer Substanz (ε)
Absorptionsquerschnitte
Absorptionswahrscheinlichkeit eines Einzelmoleküls
Dynamisches Quenchen.
Reaktionen eines angeregten Fluorophors, der zur Fluoreszenzlöschung führt.
–> Beim dynamischen Quenching wird die Energie des angeregten Fluorophores durch den Zusammenstoß mit einem Quenchermolekül auf dieses Quenchermolekül übertragen, wobei die Energie letztlich in Wärme übergeht.
Stoke´s Shift
spektrale Rot- Verschiebung der Fluoreszenz gegenüber der Absorption.
–>Energieverlust durch Protonenabgabe. Rechtsverschiebung im Vergleich von der Emissionsstrahlung. (Weniger Energie-> also längere Wellenlägen)
Franck Condon-Bereich
Kernkopplungselement“ oder im Oszillatormodel, „der Zustand in dem das Elektron nach Absorption mit größter Wahrscheinlcihkeit landet“.
Absorption
E = Log (I0 / I)
–> Absurda logopedia
Transmission
T = ( I / I0 )
–> Tirano
Proteinfaltung involviert verschiedenste Bindungen. Ordnen Sie die Bindungsarten anhand der Energie, die sie zur Stabilisierung der Faltung beitragen, von niedrig zu hoch. WBB - hydrophob - elektrostatisch
- Hydrophobe WW 2. WBB 3. Elektrostatische WW
Wann spricht man in der Photobiophysik von einem Singulett-, und wann von einem Triplettzustand?
Singulettzustand: Die Spins der Orbital sind entgegengesetzt gerichtet.
Triplettzustand: Die Spins der Orbital sind parallel gerichtet.
Was versteht man unter einer Reißlänge ( Tensile Strengt)?
Länge, die ein Querschnitt eines Materials und seiner Gewicht ausgedehnt werden kann, bevor es reißt. –> Maximum der Spannung/Dehnungskurve
Was ist die Bedeutung der Fließstärke (Field Stregth)?
Punkt an dem das Material auch ohne Spannungszufuhr sich weiter irreversibel ausdehnt bis es reißt. Also der Punkt ab dem das Verhalten von elastisch auf plastisch wechselt.
Beschreiben Sie die Funktionsweise der Atomic Force Micoscropy (AFM). Nennen Sie zwei Anwendungsbeispiele.
Was können Sie mit AFM messen, was sie mit Optical Tweezers nicht messen ko ̈nnen?
Mechanische Abtastung von Oberflächen und der Messung atomarer Kräften aud der Nanometerskala. Diese Kräfte verbiegen eine Blattfeder an deren eine Ende eine Nadel gibt. Aus der gemessenen Verbiegung der Federe, dann die Kraft berechnet werde, die zwischen Oberfläche und die Spitze gibt.
- Force measurement–> Measure of Young Modulus von microtubulus.
- Raster scanning -> topography of surfaces
Messung: Oberflächeneigenschaften zB. Abrisskraft von Integrinnen.
–> Bei jeder Peak ist die Brechung von wichtige Wechselwirkungen bzw. Bindungen anzunehmen.