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Méthodes d'analyse > Modes chromatographiques > Flashcards

Modes chromatographiques Flashcards

1
Q

Vrai ou faux

La phase mobile solvate les greffons de la phase stationnaire

A

Vrai

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Q

Quelles sont les interactions mises en œuvre dans les systèmes chromatographiques ?

A 
Dipôle instantané -Dipôle instantané
Dipôle permanent - Dipôle induit
Dipôle permanent - Dipôle permanent
Liaison hydrogène
Liaison ionique
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Q

Quelle est l’énergie d’une interaction ionique ?

A

250 à 1050 kJ/mol

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4
Q

Quelle est l’énergie d’une interaction Dipôle instantané -Dipôle instantané ?

A

5 à 20 kJ/mol

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5
Q

Quelle est l’énergie d’une interaction Dipôle permanent -Dipôle induit ?

A

8 à 25 kJ/mol

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6
Q

Quelle est l’énergie d’une interaction Dipôle permanent -Dipôle permanent ?

A

25 à 40 kJ/mol

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7
Q

Quelle est l’énergie d’une liaison hydrogène ?

A

25 à 40 kJ/mol

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8
Q

Quels sont les paramètres mis en jeu et les modes chromatographiques pour les espèces moléculaires (ionisées possible) ?

A

Paramètre : polarité

Modes : adsorption ; partage polaire ; partage apolaire

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9
Q

Quels sont les paramètres mis en jeu et les modes chromatographiques pour les espèces ionisées ?

A

Paramètres : charge ; charge/polarité

Modes : échange d’ions ; paire d’ions

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10
Q

Quels sont les paramètres mis en jeu et les modes chromatographiques pour les espèces donneuses de doublets électroniques ?

A

Paramètre : formation de complexe

Mode : échange de ligands

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11
Q

Quels sont les paramètres mis en jeu et les modes chromatographiques pour les polymères ?

A

Paramètre : taille/forme

Mode : exclusion-diffusion

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12
Q

Quels sont les paramètres mis en jeu et les modes chromatographiques pour les énantiomères ?

A

Paramètre : structure 3D

Mode : chirale

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13
Q

Quel est le solvant le plus polaire en chromatographie ?

A

L’eau

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14
Q

Comment détermine t-on la polarité P’ de Snyder ?

A

Elle est calculée à partir de déterminations expérimentales (sans dimension)

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15
Q

Qu’est ce que la force éluante ɛ0 ?

A

Energie libre d’adsorption des molécules de solvant par unité de surface de silice

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16
Q

Sur quels critères sélectionne t-on un solvant ?

A
  • Critère de miscibilité : les solvants doivent être miscibles
  • Critère de « transparence » en détection : solvant qui donne le minimum de bruit de fond
  • Critère de sélectivité : définit le choix des solvants de manière optimale
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17
Q

Vrai ou faux

Quand la phase stationnaire est polaire on utilise un solvant de base (phase mobile) apolaire et inversement

A

Vrai

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18
Q

Quels solvants pour la phase mobile utilise t-on pour un mode chromatographique adsorption et partage classique ?

A

Solvants sélectifs :

  • éther isopropylique ou de méthyltertiobutyle (MTBE)
  • chlorure de méthylène ou 1,2-dichloroéthane
  • chloroforme

Solvant de base : alcanes (hexanes, isooctane)

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19
Q

Quels solvants pour la phase mobile utilise t-on pour un mode chromatographique partage à polarité de phases inversées ?

A

Solvants sélectifs :

  • méthanol ou éthanol
  • acétonitrile
  • tétrahydrofuranne (THF)

Solvant de base : eau

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20
Q

Quel est le rôle des solvants sélectifs ?

A

Les solvants sélectifs permettent de moduler la rétention et la séparation. Ils rentrent en compétition avec le soluté

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21
Q

Pour séparer des espèces moléculaires en chromatographie de partage sur phases stationnaires polaires, quelle phase stationnaire utiliser ?

A

Silice greffée de motifs organiques polaires variés (support solide)

22
Q

Quel est le mécanisme de rétention lors d’une séparation d’espèces moléculaires en chromatographie de partage sur phases stationnaires polaires ?

A

Solvatation des greffons polaires par le solvant le plus polaire de la phase mobile

23
Q

Qu’est ce qu’une gaine de solvatation ?

A

C’est le liquide qui entoure le greffon

24
Q

Quelle méthode est la plus utilisée pour séparer des espèces moléculaires ?

A

chromatographie à polarité de phases inversée dite chromatographie « inverse » : 80% des séparations par CL

25
Q

Pour séparer des espèces moléculaires en chromatographie de partage sur phases stationnaires apolaires, quelle phase stationnaire utiliser ?

A

Plusieurs types de support hydrophobes

  • Silices greffées de motifs apolaires variés (+++)
  • Copolymères styrène-divinylbenzène greffés de motifs apolaires
  • Oxyde de zirconium poreux greffés de motifs apolaires
  • Carbone graphite poreux
26
Q

Quels sont les problèmes majeurs du supports en silices greffées de motifs apolaires variés pour la séparation d’espèces moléculaires ?

A
  • Présence de OH libres : silanols (Si-OH) résiduels à la surface : mécanisme d’adsorption parasite responsable de déformation de pic –> N cap : Élimination des silanols par traitement au triméthylchlorosilane (TMCS) = blocage des OH
  • Gamme de pH de la phase mobile limitée au milieu basique : 2-8 (car la Si se dégrade dans un milieu trop acide) donc OH sous forme O- (silanoates) –> interactions hétérogènes très fortes –> déformation des pics importante
27
Q

Que peut influencer les différents facteurs pour séparer des espèces moléculaires en chromatographie de partage sur phases stationnaires apolaires,?

A
  • Phase stationnaire : rétention augmente avec la surface hydrocarbonée par unité d’aire qui dépend du taux de greffage et de la longueur de la chaine greffée
  • Caractère hydrophobe du soluté : rétention augmente avec le coefficient de partage P entre eau et octanol
28
Q

Comment s’effectue la séparation des espèces ionisées en chromatographie d’échange d’ions (chromatographie ionique) ?

A

Des particules sont greffées sur des groupements chargés qui sont anioniques ou cationiques. Si on greffe des groupements cationiques c’est pour séparer des anions –> échangeur d’anion. On parle d’échangeur de cation dans le cas inverse.

29
Q

Pour séparer des espèces ionisées en chromatographie d’échange d’ions (chromatographie ionique) quelles phases stationnaires utiliser ?

A

Echangeurs d’ions

  • Supports : silice ou copolymères
  • Groupements fonctionnels
30
Q

Pour séparer des espèces ionisées en chromatographie d’échange d’ions (chromatographie ionique) quelle phase mobile utiliser ?

A

Solution aqueuse (en général) tamponnée (tout le temps) contenant l’ion développeur (force éluante)

  • Le pH de la phase mobile définit le degré d’ionisation de l’espèce si c’est un conjugué d’acide faible ou de base faible
  • On rajoute des sels
31
Q

Quel est le mécanisme de rétention pour la séparation des espèces ionisées en chromatographie d’échange d’ions (chromatographie ionique) ?

A

Il y a un effet de compétition entre les ions développeurs (échangeur de cations sous forme E+) qui est augmenté avec des ions divalents.
La concentration de l’ion développeur joue le rôle de la polarité des solvants en chromatographie de partage

32
Q

Que peut influencer les différents facteurs pour la séparation des espèces ionisées en chromatographie d’échange d’ions ?

A
  • Différence d’affinité entre C+ (cation injecté) et E+ (cation de la phase mobile)
  • Concentration de E+ dans la phase mobile
  • pH de la phase mobile
  • Ionisation de l’espèce à analyser
33
Q

Pour séparer des espèces ionisées en chromatographie de paires d’ions quelles phases stationnaires utiliser ?

A

Silice greffée alkyle (C8 ou C18)

34
Q

Pour séparer des espèces ionisées en chromatographie de paires d’ions quelle phase mobile utiliser ?

A

Mélange hydro-organique (polarité de phases inversée) contenant un contre-ion hydrophobe anionique ou cationique

35
Q

Quelle est la particularité de la chromatographie de paires d’ions ?

A

A la fois du partage et de l’échange d’ion avec ce mode chromatographique. Pour des composés de même charge, on peut les séparer en fonction de leur polarité et inversement.

36
Q

Quel est le mécanisme de rétention pour séparer des espèces ionisées en chromatographie de paires d’ions ?

A
  • Echange d’ions dynamique

- Partage

37
Q

Que peut influencer les différents facteurs pour la séparation des espèces ionisées en chromatographie de paires d’ions ?

A
  • Concentration et nature du contre-ion
  • Proportion de solvant organique dans la phase mobile
  • pH de la phase mobile
  • Caractère hydrophobe des solutés
38
Q

Quel est le mode chromatographique pour la séparation des espèces donneuses de doublets électroniques ?

A

Chromatographie d’échange de ligands
–> Formation de complexe entre un soluté donneur de doublets électroniques et un cation métallique présentant des orbitales vacantes

39
Q

Pour séparer des espèces donneuses de doublets électroniques quelles phases stationnaires utiliser ?

A

gel de silice « cuivrée »

40
Q

Pour séparer des espèces donneuses de doublets électroniques quelle phase mobile utiliser ?

A

eau-acétonitrile-ammoniaque

41
Q

Quel est le mode chromatographique pour la séparation des polymères ?

A

Chromatographie d’exclusion-diffusion

  • Filtration sur gel : séparation de biopolymères
  • Perméation de gel : séparation des polymères de synthèse
42
Q

Pour séparer des polymères quelles phases stationnaires utiliser ?

A

Polymères organiques ou minéraux (silice)

43
Q

Pour séparer des polymères quelle phase mobile utiliser ?

A
  • Filtration sur gel : solutions aqueuses tamponées

- Perméation de gel : phase organique (THF/ex)

44
Q

Quel est le mécanisme de rétention pour séparer polymères ?

A

Les protéines qui ne rentrent pas dans les pores migrent dans le volume interstitiel (Vi). Les petites protéines peuvent aller dans l’ensemble des pores –> elles migrent plus lentement que les grosses protéines car elles migrent dans le Vi + Vp = VM
Les grosses protéines sortent à Vi, les moyennes entre les 2 et les petites à VM.

45
Q

Quelle est la limite pour séparer des polymères ?

A

Si mélange de protéines de tailles différentes, on ne peut pas les séparer. On peut les séparer s’il y a adéquation entre taille des pores et taille des protéines à séparer.

46
Q

Que peut influencer les différents facteurs pour la séparation des polymères ?

A
  • Taille et forme du polymère analysé
  • Composition de la phase mobile
  • Diamètre des pores de la phase stationnaire
47
Q

Quel est le mode chromatographique pour la séparation des énantiomères ?

A

Chromatographie chirale

48
Q

Quelle est le mode le plus utilisé pour l’analyse énantiomérique ?

A

CLHP avec un sélecteur chiral immobilisé : PSC

49
Q

Quels sont les avantages d’un sélecteur chiral immobilisé pour la séparation d’énantiomères ?

A
  • Toutes les méthodes : CLHP, CCM, CPG, électrochromatographie
  • Tous les sélecteurs chiraux
  • Colonne réutilisable
50
Q

Quel est le sélecteur conventionnel le plus employé pour séparer les énantiomères ?

A

Polysaccharides

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