Fluorescence

Question 1

De quelles méthodes fait partie la fluorescence ?

Answer 1

Méthodes de luminescence

Question 2

Quel est le principe ?

Answer 2

Méthode d’émission moléculaire immédiate consécutive à une absorption d’énergie photonique

Question 3

Qu’est ce que le Diagramme de Jablonski ?

Answer 3

Il représente les états électroniques d’une molécule et les transitions entre ces états

Question 4

Qu’est ce que le déplacement de Stokes ?

Answer 4

C’est la différence entre la position du pic du spectre d’absorption et celle du pic du spectre de fluorescence de la même transition électronique

Question 5

Que peut-on conclure avec la loi de Stokes sur les longueurs d’onde maximales ?

Answer 5

λmaxExc < λmaxEm : la bande d’émission est décalée vers la droite par rapport à la bande d’excitation

Question 6

Quel est le principe de la fluorescence anti-Stokes ?

Answer 6

λmaxExc > λmaxEm

Question 7

Qu’obtient-on si la longueur d’onde de la lumière excitatrice s’éloigne du λmax ?

Answer 7

• Spectre d’émission de même “forme”

- Intensité de fluorescence diminue

Question 8

Quelle est la durée de vie en fluorescence ?

Answer 8

1E-8 / 1E-9 s, émission quasi-immédiate

Question 9

Qu’est ce que le rendement quantique Φ ?

Answer 9

Φ est une caractéristique de la substance, il permet de déterminer si elle est fluorescente. Une substance fluorescente a un Φ compris entre 0,1 et 1.
Si Φ = 0 : molécule non fluorescente

Question 10

Quelle est la structure globale d’une molécule fluorescente ?

Answer 10

Molécules cycliques, rigides et possédant des liaisons π conjuguées (ex : benzène)

Question 11

Quelle est l’influence de la rigidité d’une molécule sur son rendement quantique ?

Answer 11

Plus la molécule est rigide, plus le rendement est grand

Question 12

Quelle est l’influence des groupements sur les aromatiques ?

Answer 12

• Donneurs d’électrons (NH2, OH…) : augmentation de la fluorescence
• Accepteurs d’électrons (NO2, COOH…) : diminution de la fluorescence

Question 13

Quelle est l’absorbance mesurée généralement en fluorescence ?

Answer 13

0,05

Question 14

Qu’est ce que le phénomène de filtre interne ?

Answer 14

Avant un certain point, plus on augmente la concentration, plus la lumière émise est forte. A partir de ce point, il y a tellement d’espèces dans la zone d’incidence que la lumière n’atteint pas les espèces du milieu

Question 15

Vrai ou faux

Le phénomène d’auto-absorption est élevé

Answer 15

Faux, il est très faible

Question 16

La lumière émise peut-elle être absorbée par les molécules non excitées ?

Answer 16

Oui à forte concentration

Question 17

Que doit-on faire pour éviter les effets de filtre interne ?

Answer 17

La solution à analyser doit être très diluée

Question 18

Vrai ou faux

La fluorescence est au moins 1000 fois plus sensible que l’absorption moléculaire

Answer 18

Vrai

Question 19

Quelle est la sensibilité ?

Answer 19

dr/dC

Question 20

Vrai ou faux

Un fluorophore est forcément un chromophore

Answer 20

Vrai

Question 21

Vrai ou faux

L’émission est isotrope

Answer 21

Faux, elle se fait dans toutes les directions

Question 22

De quoi est composé l’appareillage ?

Answer 22

Source - monochromateur - cuve - monochromateur - photomultiplicateur

Question 23

Quel est le rôle du solvant ?

Answer 23

Il est neutre et ne transmet donc pas d’échange d’énergie

Question 24

Quel est le phénomène le plus embêtant ?

Answer 24

Phénomène de diffusion de la lumière

Question 25

Comment peut-on éliminer la lumière diffusée parasite ?

Answer 25

Changer de solvant = changer A
- si A est plus grand : on rentre + dans l’émission
- si A est plus petit : on peut supprimer l’interférence
S’il n’y a qu’un solvant pour une espèce, on change λ (moins de sensibilité mais moins de bruit de fond)

Question 26

Qu’est ce qui crée la raie de diffusion Raman ?

Answer 26

Lorsque des molécules du solvant captent de la lumière : faible intensité

Question 27

Comment varie la raie Raman si on décale la λ d’excitation ?

Answer 27

Elle se décale de la même façon (A=cste)

Question 28

Qu’est ce qui crée la raie de diffusion Rayleigh ?

Answer 28

La longueur d’onde de la lumière diffusée est quasiment la même que celle de la lumière incidente

Question 29

Quels peuvent être les phénomènes internes d’inhibition de la fluorescence ?

Answer 29

• Phénomène de filtre interne
• Photodécomposition
• Température

Question 30

Comment varie la fluorescence en fonction de la température ?

Answer 30

La fluorescence diminue quand la température augmente

Question 31

Qu’est ce qui entraine les phénomènes externes d’inhibition de fluorescence ?

Answer 31

Les quenchers

• Quenching dynamique : transfert d’énergie du fluorophore à l’espèce : diminution fluorescence
• Quenching statique : fluorophore proche d’une autre espèce