Electrophorèse sur support

Question 1

Quelle est l’instrumentation utilisée ?

Answer 1

Cuve - gel support - générateur

Question 2

Quelle est la tension favorable du générateur ?

Answer 2

Faible tension : 500 V

Question 3

Quels sont les électrolytes utilisés ?

Answer 3

Espèces chargées –> Protéines

Question 4

Vrai ou faux

Le Tampon de pH est le même que le pI des espèces à analyser

Answer 4

Faux

Question 5

Quelle est la particularité de la concentration du tampon ?

Answer 5

Compromis entre stabilité du pH et échauffement excessif

Question 6

Quel est généralement le pH utilisé, la molarité ?

Answer 6

pH entre 8 et 10, molarité : 50 mM

Question 7

Dans quel sens migrent les électrolytes ?

Answer 7

Migration de la cathode à l’anode car le pI des protéines compris entre 4 et 7 en général

Question 8

Quelle est la technique de choix ?

Answer 8

SDS-PAGE

Question 9

Quel est le rôle du SDS ?

Answer 9

Dénaturer les protéines

Question 10

Quel est l’agent réducteur utilisé ? Quel est son rôle ?

Answer 10

β-mercaptoéthanol (1%) qui réduit les ponts disulfure

Question 11

Quel est le détergent anionique fort utilisé ? Quel est son rôle ?

Answer 11

Dodecyl sulfate de sodium (SDS) (2%) qui dénature les protéines (90°C)

Question 12

Vrai ou faux

Le nombre de molécules de SDS fixées est proportionnel à la longueur de la chaîne polypeptidique

Answer 12

Vrai

1,4 g de SDS/g de polypeptide

Question 13

De quoi dépend la séparation des électrolytes ?a

Answer 13

Uniquement de la taille : effet de tamisage

–> Protéines chargées de la même façon (même rapport q/r)

Question 14

Quelle est la taille des protéines les + retenues dans le gel ?

Answer 14

Les grosses protéines sont plus retenues dans les mailles du gel que les petites protéines

Question 15

Quels gels sont principalement utilisés ?

Answer 15

Acétate de cellulose pour électrophorèse des protéines du sérum
Gels d’agarose et de polyacrylamide (+++)

Question 16

De quoi dépend les techniques de détection ?

Answer 16

De de la nature des échantillons

Question 17

Quelles techniques de détection peut-on prendre pour des protéines ?

Answer 17

Rouge ponceau, bleu de Coomassie, sels d’argent

Question 18

Quelles sont les méthodes d’empreintes utilisées ?

Answer 18

Southern Blot (ADN); Northern Blot (ARN); Western Blot (protéine)

Question 19

Quel est le but d’une électrophorèse 2D ?

Answer 19

Analyse protéomique

Question 20

Dans quel domaine est principalement utilisée l’électrophorèse sur support ?

Answer 20

En biologie (macromolécules biologiques)