Microscopie Flashcards
Quelles sont les 5 propriétés de la lumière?
- Réflexion
- Absorption
- Transmission
- Réfraction
- Diffraction
Qu’est-ce que la réflexion?
Lumière rebondit sur la surface (donne la couleur)
Qu’est-ce que l’absorption ?
Énergie lumineuse absorbée par l’objet et émise de nouveau
Qu’est-ce que la transmission?
Passage de la lumière à travers l’objet
Qu’est-ce que la réfraction?
Changement d’angle de la lumière (dépend de la densité de l’objet)
Qu’est-ce que la diffraction?
Courbure des rayons lumineux lors de passage dans une petite ouverture
Comment appelle-t-on la capacité d’une lentille à présenter les objets distinctement, sans chevauchement?
La résolution
Quels sont les 3 grandes familles de microscope?
- Microscopes optiques
- À fluorescence
- Microscopes électroniques
Comment fonctionnent les microscopes optiques?
Utilisent l’énergie du spectre lumineux et des lentilles
Quels sont les 3 types de microscopes optiques?
- À fond clair
- À fond noire
- À contraste de phase
Quelles sont les caractéristiques du microscope à fond clair?
- Échantillon foncé sur fond brillant
- Beaucoup de lumière
- Organismes vivants ou morts
Quelle est l’utilité du microscope à fond clair?
Lors d’une coloration
Quelles sont les caractéristiques du microscope à fond noir?
- Échantillon brillant sur fond noir
- Beaucoup de lumière (juste lumière réfléchie)
- Augmentation du contraste
- Condensateur modifié avec un disque opaque
Quelle est l’utilité du microscope à fond noir?
Lorsqu’on ne peut/veut pas colorer
Lorsqu’ils sont invisibles sur fond clair
EX: morphologie
Quelles sont les caractéristiques du microscope à contraste de phase?
- Échantillon avec des régions brillantes à noires
- Augmentation du contraste encore plus entre les structures
Quelle est l’utilité du microscope à contraste de phase?
On peut observer les structures internes d’organismes vivants
Définition de fluorescence
Capacité à absorber la lumière UV et émettre de la lumière visible
Quelle substance la microscopie à fluorescence utilise-t-elle?
Les fluorochromes
Qu’est-ce qu’un fluorochrome?
Substance naturellement fluorescente qui absorbe l’énergie lumineuse et la réémet en lumière visible
Pourquoi utilise-t-on des fluorochromes dans la microscopie à fluorescence?
En utilisant différents fluochromes en parallèle, on peut observer l’ensemble de l’échantillon
Qu’est-ce que l’immunofluorescence?
Utilisation d’anticorps associés à des fluorochromes
Pourquoi utilise-t-on l’immunofluorescence dans la microscopie à fluorescence?
On peut voir si les anticorps sont liés ou non à l’échantillon (fluo = lié)
Quelles sont les caractéristiques du microscope confocal?
- Construction d’image 3D
- Laser balait l’échantillon couche par couche
- Utilisation de fluochrome
Quelle est l’utilité du microscope confocal?
Observer les biofilms
Comment fonctionnent les microscopes électroniques?
- Utilisent un faisceau d’électrons/électroaimants
- Aucune source lumineuse
- Aucune lentille de verre
- Mise sous-vide (aucune poussière)
- Image en noir et blanc
Quelle est l’utilité des microscopes électroniques?
Idéal pour observer de petits spécimens (structures internes, virus)
Quels sont les 2 types de microscopes électroniques?
- À transmission (TEM)
- À balayage (SEM)
Quelles sont les caractéristiques du microscope à transmission (TEM)?
- Échantillon très mince
- Très contrasté
- Grossissement jusqu’à 100 000x
Quelle est l’utilité du microscope à transmission (TEM)?
Observer les structures internes et les virus
Comment fonctionne le microscope à transmission (TEM)?
Les électrons passent à travers l’échantillon puis atteignent le détecteur
Quelles sont les caractéristiques du microscope à balayage (SEM)?
- Image 3D des surfaces externes
- Grossissement jusqu’à 10 000x
Quelle est l’utilité du microscope à balayage (SEM)?
Observer les surfaces externes et les biofilms
Comment fonctionne le microscope à balayage (SEM)?
Les électrons de l’échantillon sont renvoyés vers un capteur
Quels sont les 3 différents types de coloration?
- Simple (basique)
- Différentielle (plusieurs)
- Négative
À quoi sert le colorant simple?
Morphologie, taille, arrangement
À quoi sert le colorant différentielle?
Caractéristiques distinctes (comparaison des parois, ex: de gram, a-a-résistante)
Comment la coloration négative colore-t-elle l’échantillon?
Fond et spécimen colorés
Quels sont deux types de coloration différentielle?
- Coloration de Gram
- Coloration acide-alcool-résistante
Pour quoi la coloration de Gram est-elle utile?
Démontre les différences de la paroi cellulaire (peptido)
Quelles sont les étapes de la coloration de Gram? (en gros)
- Application colorant
- Lavage avec un décolorant (pas trop longtemps sinon tout disparaît)
- Application contre-colorant (montre différent Gram)
Quelles sont les étapes de la coloration acido-alcoolo-résistante?
- Chauffage
- Décoloration
- Colorant de contraste
Transparent, rouge-rouge, rouge-transparent, rouge-bleu
Qu’est-ce que les acido-alcoolo-résistantes et les endospores ont en commun?
Ces deux cellules sont extrêmement résistantes, ce qui les rend perméable au colorant. On doit donc les chauffer pour briser les liaisons pour laisser le colorant pénétrer
Quels sont les deux types de microscope utiles pour observer des biofilms?
- Électronique à balayage
- À fluorescence convocable
