Métodos de secuenciación

Question 1

–Cortar el ADN genómico en pedazos pequeños y unir ADAPTADORES, chip

– El resultado de múltiples rondas de PCR es un pequeño grupo de productos de PCR idénticos los cuales sirven como templados de secuenciación

-Aparece SEÑAL FLUORESCENTE, fosforo radiactivo

Answer 1

High-throughput 1
Secuenciación por síntesis Seq Illúmina

Mas utilizada

Question 2

Adaptadores de PCR terminan en grupos químicos que se adhieren a cuentas microscópicas

–Emulsión mantiene cada cuenta en un pequeño compartimento de agua donde se produce reacción de PCR local

-Variación en pH en micropozo detectado por semiconductor

CLOROFOROS

Answer 2

High-throughput method 2: Ion torrent

Secuenciación de torrente de iones

Question 3

• Cada uno de los nucleótidos con sonda fluorescente de agrega uno a uno al chip.
• Usa terminadores reversibles y detector óptico.
• Convierte una señal fluorescente en una señal electrónica

Answer 3

High-throughput method 3

Secuenciación de una sola molécula de DNA

Question 4

Diseñado para lecturas de secuenciación extremadamente largas (hasta 1 Mb)

-El templado es una cadena larda monocatenaria de ADN

Answer 4

High-throughput method 4, tercera generación

Secuencia de nanoporos

Question 5

Radiación

Answer 5

Primera generación