Manchas de sangue Flashcards

Question 1

Q

Como a revelação de vestígios
ocorre?

Answer

A

isso pode se dar de três formas: absorção, reflexão da luz e luminescência.

Question 2

Q

Hoje é utilizado a chamada “Lâmpada de Wood” como fontes de luz UV (comprimento de onda
menor que 400nm), ou outra fonte de luz chamada Fonte de Luz Alternada (baseada em várias cores)!

Question 3

Q

Apesar do uso de fontes alternadas de luz, sabe-se que a luz UV tem capacidade de degradar o
DNA!

Question 4

Q

O modo alternado de absorção é o método inicial de escolha na análise de sangue. Em casos de superfícies
brancas, coloridas ou fluorescentes, utiliza-se o comprimento de onda de 415nm, que é a faixa máxima de absorção
de luz pelo sangue. Na superfície, enquanto o sangue absorve a luz, toda a superfície reflete (fica branco), criando um
contraste ideal para fotografia e coleta de material biológico

Question 5

Q

Para superfícies escuras ou muito coloridas, o método de escolha é da REFLEXÃO, o qual o ângulo da luz
incide de acordo com o melhor contraste (sangue reflete formando uma zona clara). Essa visualização deverá ser feita
em ambiente escuro.

Question 6

Q

Sêmen, urina, saliva e sangue são NATURALMENTE fluorescentes quando excitados com luz UV!
O sangue é considerado o menos fluorescente de todos.

Question 7

Q

Quais as luzes utilizadas para identificar fios de cabelo?

Answer

A

a LUZ BRANCA FORTE (quanto maior potência, melhor), a qual revelará pequenas partículas.
O segundo método, é a utilização de luz UV, a qual, ao incidir sobre a superfície, revela a presença de alguns
fios de cabelo e fibras fluorescentes, as quais realçam fortemente

Question 8

Q

A luminescência, ou também conhecida como “luz fria”, é a classificação mais genérica das formas de emissão
de luz que não sejam provenientes de incandescência (aquecimento). Ela pode ser dividida em fosforescência,
fluorescência e quimioluminescência.

Question 9

Q

Qual a diferença de Fluorescencia e Fosforescencia?

Answer

A

A fosforescência assemelha-se com a fluorescência. Os elétrons também são promovidos para níveis mais
energéticos. O diferencial está no processo de volta ao estado inicial. Enquanto na fluorescência o processo ocorre
quase que instantaneamente, na fosforescência a volta do elétron ocorre em um tempo maior.

Question 10

Q

A quimioluminescência caracteriza-se pela emissão de luz por meio de uma reação química. A técnica de
caracterização de sangue com luminol é um exemplo de PROCESSO QUIMIOLUMINESCENTE.

Question 11

Q

A atividade peroxilítica do sangue se dá por conta da hemoglobina, o qual quebra
peróxidos em água e oxigênio molecular (O2).

Question 12

Q

As hemácias, megacariócito, granulócitos e monócitos tem origem medular a partir de mielócitos
enquanto linfócitos são originados de linhagem linfoide!

Question 13

Q

Gotas que incidem em uma superfície plana em ângulo de 90º tendem a ser circulares enquanto
gotas que incidem obliquamente são elípticas, com cauda no sentido oposto à origem.

Question 14

Q

Assim, o ângulo de impacto pode ser representado por:
sen α = diâmetro da gota (cateto oposto) DIVIDIDO PELA
Hipotenusa

Question 15

Q

A área de convergência pode ser estabelecida no local com o uso de cordas coladas à superfície
que se prolongam pelo eixo longitudinal de cada mancha de sangue.

Question 16

Q

O QUE É Manchas de formação passiva?

Answer

A

É aquela decorrente exclusivamente da AÇÃO GRAVITACIONAL. É o caso do gotejamento, podendo ser isolado
ou sucessivo (ocorre quando várias gotas sucessivas atingem uma mesma região).

Question 17

Q

Manchas de formação ativa

Answer

A

Manchas de TRANSFERÊNCIA POR CONTATO OU ARRASTAMENTO são comumente encontradas em locais de
morte violenta. Elas indicam a dinâmica do crime, podem demonstrar formas, como no caso de solados de calçados,
além de funcionarem como fontes de material biológico.

Question 18

Q

COMO SE FORMAM AS MANCHAS POR ESPARGIAMENTO?

Answer

A

as gotas de sangue se projetam a partir da interação com uma fonte externa,
além da gravidade. Na análise de espargimentos, é importante observar o maior número de gotas de sangue possível,
assim como a área acometida.

Question 19

Q

Manchas de TRANSFERÊNCIA POR CONTATO OU ARRASTAMENTO são comumente encontradas em locais de
morte violenta.

Question 20

Q

ÁREA DE SOMBRA, que consiste em uma região
localizada na circunvizinhança da mancha principal, onde deveria haver sangue. Ocorre, por exemplo, quando um
objeto depositado no local é movido, deixando uma “sombra”

Question 21

Q

SANGUE LATENTE, isto é, invisível a olho nú, mas que pode ser
detectado por metodologias mais sensíveis, como é o caso do luminol ou de testes imunocromatográficos.

Question 22

Q

MÉTODOS PRESUNTIVO

Answer

A

Teste de luzes, reações de cor e
luminescência

Question 23

Q

MÉTODOS CONFIRMATÓRIOS

Answer

A

Microscopia, espectroscopia e cristalografia

Question 24

Q

ESPÉCIE HUMANA

Answer

A

Coombs, Imunocromatografia e
Imunofluorescência

Question 25

Q

IDENTIFICAÇÃO PESSOAL

Answer

A

Grupos sanguíneos e análise genética

Question 26

Q

Luz branca: é utilizada sobre superfícies claras, em que há contraste entre a mancha de sangue
(vermelha) e a superfície;

Question 27

Q

Luz azul (455 nm): a doutrina aponta a utilização da luz azul sobre superfícies claras, na expectativa
de gerar um contraste opaco, enegrecido na mancha de sangue;

Question 28

Q

Radiação infravermelha: é utilizada sobre superfícies escuras, em que a tonalidade da mancha
(formada por componentes orgânicos) fica mais escura do que o próprio tecido.

Question 29

Q

O reagente de Kastle-Meyer é constituído por uma mistura de substâncias. Um exemplo de proporção seria
0,1 g de FENOLFTALEÍNA, 2,0 g de hidróxido de sódio (sob a forma de pellet), 2,0 g de pó de zinco metálico e 10mL de
água destilada.

Answer

A

Se a amostra for de sangue, esta terá, necessariamente, hemoglobina, a qual possui a característica de decompor
o peróxido de hidrogênio (comportamento de peroxidase) em água e oxigênio nascente. Então, este oxigênio
promoverá a oxidação de Fenolftalina em Fenolftaleína (um indicador ácido-base), evidenciando ao perito que a
amostra pode ser sangue.

Question 30

Q

O reagente de Benzidina, também conhecido como Adler-Ascarelli

Answer

A

Da mesma forma que o reagente de Kastle-Meyer, o reagente de benzidina se baseia na catálise da
decomposição do peróxido de hidrogênio em água e radical oxigênio pela hemoglobina presente no sangue. O oxigênio
formado irá oxidar a benzidina, alterando sua estrutura, fenômeno que é perceptível, sob o ponto de vista
experimental, com o aparecimento da coloração azul da solução.

ATENÇÃO! Os laboratórios forenses atualmente têm uma predileção pelo teste de Kastle-Meyer, visto que
a benzidina é tóxica!

Question 31

Q

A REAÇÃO DE VAN DEEN

Answer

A

é um teste inespecífico para sangue, resultando positivo para líquidos orgânicos
contendo metais como ferro, níquel ou cobre. Em um tubo de ensaio contendo sangue coloca-se uma gota de tintura
de guáiaco a 10% e água oxigenada. O teste se positiva com a coloração azul.

Question 32

Q

luminol, é um composto que, sob determinadas condições, promove uma reação
do tipo QUIMIOLUMINESCENTE.

Question 33

Q

Quando da aplicação de luminol sobre supostas manchas de sangue em local de crime, são utilizados como
reagentes um componente básico (funcionando como doador de elétrons), o peróxido de hidrogênio (ou outro agente
oxidante, como perborato) e o luminol.

Question 34

Q

A reação de luminol com peróxido de hidrogênio necessita de um catalisador redox.

Answer

A

No caso do teste para a presença de sangue, este catalisador é o íon
do elemento ferro oxidado que está presente nos grupos heme da hemoglobina. Quando em contato com o peróxido,
o ferro catalisa o peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. Este oxigênio liberado oxida a molécula de luminol,
resultando em um peróxido orgânico tão instável, que rapidamente se decompõe em um ácido dicarboxílico aromático
em um estado excitado. Ao regressar ao estado fundamental, este ácido libera um fóton cujo comprimento de onda é
de aproximadamente 432 nm, o que é tipicamente reconhecido na reação do luminol.

Question 35

Q

Luminol é uma substância irritante, não carcinogênica e que não afeta a análise molecular por
PCR da amostra! Hoje o sistema BlueStar é utilizado no lugar do luminol por ser menos tóxico é mais sensível.

Question 36

Q

Além do carbonato, outro agente envolvido na reação do luminol é o perborato de sódio (NaBO3), o qual
funciona como um agente oxidante.
Veja que, além do íon borato formado, há também formação de peróxido de hidrogênio, o qual, em meio
aquoso básico, forma radical oxigênio. Neste caso, tanto o oxigênio quanto o íon borato liberados podem oxidar a
molécula do luminol, causando a luminescência.

Answer

A

CORRETO

O perborato é um agente tóxico, com atividade irritante!

Question 37

Q

Os testes confirmatórios são testes que confirmam a presença de sangue pela formação de cristais derivados
do grupo heme ou de reações imunológicas com a hemoglobina. Exemplos destes testes são: microscopia,
espectroscopia, teste de Teichmann e teste de Takayama.

Question 38

Q

Note que a observação de sangue por microscopia não garante que tal sangue é necessariamente de alguém,
ou sequer que se trata de sangue humano. Por isso, a microscopia é apenas uma técnica sugestiva.

Question 39

Q

ESPECTROSCOPIA ,espectros de emissão ou absorção de radiações eletromagnéticas.

Question 40

Q

A lei de absorção, também conhecida como lei de Lambert-Beer ou somente como lei de Beer, afirma
quantitativamente como a grandeza da atenuação depende da concentração das moléculas absorventes e da extensão
do caminho sobre o qual ocorre a absorção.

Conforme a luz atravessa uma solução contendo determinado analito (o
qual absorve parte da radiação), há decréscimo entre a radiação emitida e a radiação transmitida, proporcionalmente
à qualidade ou quantidade do analito. Em uma solução com quantidade certa de analito, quanto maior for a distância
percorrida pela radiação dentro da solução com o analito, maior será a atenuação e maior a absorbância (A) da
amostra.

Question 41

Q

TESTE DE TEICHMANN

Answer

A

O método de Teichmann permite confirmar a presença de sangue por meio da formação de cristais de HEMINA
após uma reação de oxidação do Ferro presente na hemoglobina a partir do ácido acético e um sal (proveniente de
um halogênio como cloreto de potássio).
O procedimento consiste em aplicar a solução de Bertrand na suposta mancha de sangue e aquecer até
borbulhar a amostra. Logo após, observa-se a lâmina em microscópio para detecção dos cristais romboédricos (cloreto
de ferriprotoporfirina) de hemina, o qual se apresentam na cor marrom

Question 42

Q

O teste de cristais de Teichmann é recomendado no caso de a amostra ser proveniente de um extrato
concentrado da mancha ou crosta em análise.

Question 43

Q

TESTE DE TAKAYAMA

Answer

A

O método de Takayama permite confirmar a presença de sangue pela observação de cristais formados
derivados do grupo heme. O teste de Takayama pode ser aplicado em fibras do tecido manchado ou em raspados de
crosta.

O método usado para obter tais cristais consiste na preparação de uma solução saturada de glicose e outra de
hidróxido de sódio 10%. Feita as duas soluções, o preparo da solução de trabalho deve ser feita no momento da
análise, em que será usado 0,5ml da solução saturada de Glicose-D, 0,5ml de hidróxido de sódio a 10%, 0,5ml de
piridina e 1ml de água destilada.

visualização dos cristais de
HEMOCROMOGÊNIO.

Question 44

Q

O teste de cristais de Takayama é recomendado no caso de a amostra ser proveniente de fibras de tecido ou
raspado de crosta. Esse teste é muito sensível e pode ser feita inclusive em sangue envelhecido.

Question 45

Q

TESTE DE COOMBS OU ANTIGLOBULINA HUMANA (TESTE CONFIRMATÓRIO)
Anticorpos da classe IgG sensibilizam as hemácias SEM CAUSAR AGLUTINAÇÃO eritrocitária, por isso anticorpos IgG
são considerados “incompletos”.

Question 46

Q

A detecção de hemácias sensibilizadas por IgG é realizada pela adição de
antiglobulina humana (AGH) ou anti-IgG, que causa a aglutinação eritrocitária. A utilização da AGH pode ser
considerada a maior descoberta da medicina transfusional depois do sistema ABO.

Question 47

Q

O teste de antiglobulina, ao utilizar a anti-IgG, humana permite reconhecer a fração Fc do anticorpo fixado na
membrana das hemácias sensibilizadas. Dessa forma, as duas porções Fab dos heteroanticorpos contidos no soro AGH
formam uma ligação entre os anticorpos humanos, resultando no fenômeno da aglutinação.

Question 48

Q

TESTE DE COOMBS DIRETO(TESTE CONFIRMATÓRIO)
adição de hemácias a serem testadas, previamente lavadas com solução
fisiológica por 3 vezes a 0,9%, e a adição do reagente de antiglobulina humana. A lavagem das hemácias é uma etapa
fundamental, pois tem a finalidade principal de remoção de globulinas humanas e evitar a neutralização do soro de
Coombs.

Question 49

Q

Comumente anticorpos quentes são da classe IgG enquanto anticorpos frios são da classe IgM.

Question 50

Q

TESTE DE COOMBS INDIRETO (TESTE CONFIRMATÓRIO)
O TAI tem como princípio colocar as hemácias fenotipadas em contato com soro ou plasma do indivíduo,
buscando evidenciar a presença de anticorpos na amostra analisada. No método em tubo, a técnica deve incluir pelo
menos três fases;

a) Temperatura ambiente (fase salina);
b) Incubação 37° (fase térmica);
c) Antiglobulina humana (fase de AGH).
Entre a fase térmica e a fase de antiglobulina humana, deve-se proceder a lavagem das hemácias com solução
fisiológica, compreendendo uma etapa crucial do teste.

Question 51

Q

No teste da antiglobulina humana, após a adição do soro antiglobulina humana, o tempo de
incubação deve ser diferente, comparando-se amostras provenientes de manchas e macerados.

Question 52

Q

REAÇÃO DE UHLENHUTH

Answer

A

detecção de sangue humano
Consiste na utilização de uma cobaia, na qual é injetada sangue humano. Após um tempo, retira-se o
sangue da cobaia, centrifuga-o e coleta-se o soro, o qual deverá ser adicionado à mancha suspeita. A aglutinação é
sinal positivo.

Question 53

Q

Imunocromatografia de hemoglobina humana

Answer

A

Esse teste utiliza anticorpos monoclonais anti-hemoglobina humana conjugados com partículas de corante. O
imunocomplexo formado (após a colocação da amostra no local adequado) migra através da membrana até a zona de
reação, onde será capturado por um segundo anticorpo direcionado contra hemoglobina humana. A formação do
“sanduíche” anticorpo-antígeno-anticorpo concentra as partículas de corante, formando uma linha azul, que indica a
presença de hemoglobina humana na amostra

Question 54

Q

Testes imunocromatográficos são mais sensíveis que o Teste de Coombs!

Question 55

Q

Inibição da antiglobulina humana (Teste de Vacher-Sutton

Answer

A

demonstra a presença de globulina humana na amostra
. Nesta metodologia, utiliza-se hemácias O Rh
positivo previamente sensibilizadas com anticorpos da classe IgG anti-Rh. A globulina humana, quando presente na
amostra inibirá a atividade do soro antiglobulina humana (soro de Coombs), o qual perderá a capacidade de aglutinar
células vermelhas tipo “O” positivo sensibilizadas por anticorpos anti-Rh.

Na reação, hemácias Rh positivo revestidas com anticorpos, como IgG, são aglutinadas por anticorpo anti-IgG,
o qual une moléculas de anticorpo às células vermelhas vizinhas. Sabe-se que o soro antiglobulina humana pode ser
neutralizado por pequenas quantidades de soro humano e que seu efeito de neutralização é antígeno-específico. A
ausência de aglutinação indica, assim, a presença da proteína humana

O efeito gancho (hook) acontece quando amostras com alta concentração de antígenos (como a
hemoglobina) dão resultados falsos negativos. Isso pode ser resolvido por meio da diluição da amostra (1:100).

Question 56

Q

SISTEMA ABO

Answer

A

TESTE CONFIRMATÓRIO
Os antígenos ABO estão expressos desde a 5ª-6ª semanas de vida intrauterina,
Sua presença nos linfócitos e nas plaquetas parece estar relacionada à absorção do plasma.

Question 57

Q

SISTEMA ABO

Answer

A

A tipagem ABO consiste na pesquisa de antígenos presentes na membrana do eritrócito usando antissoros
específicos (Anti-A, anti-B e anti-AB). Essa é a prova direta. Para a pesquisa de anticorpos regulares no plasma ou no
soro, são usadas hemácias comerciais que possuem em sua superfície antígenos específicos. Essa é a prova reversa.

Question 58

Q

Tipagem direta consiste na análise de antígenos em hemácias por meio da adição de anticorpos.
Já a tipagem reversa é a introdução de hemácias para verificar se há anticorpos no paciente contra os antígenos
eritrocitários.

Question 59

Q

O antígeno Lewis é um dos únicos sistemas não
sintetizados pelos eritrócitos. Ele é produzido por células teciduais e secretado nos líquidos orgânicos, sendo seus
antígenos principalmente encontrados nas secreções e no plasma.

Question 60

Q

Os antígenos Lewis fazem parte do complexo de proteínas (ou glicoproteínas), que podem ser encontradas no
leite, saliva ou plasma, e também de lipídeos (glicolipídeos), localizados em complexos com lipoproteínas circulantes
ou em membranas celulares. Isso decorre da expressão de enzimas da família das fucosiltransferases, localizadas no
cromossomo 19.

Question 61

Q

A expressão desses antígenos requer duas enzimas fucosiltransferases, produtos dos genes FUT2 (Secretor) e
FUT3 (Lewis). Esses genes estão localizados no braço curto do cromossomo 19, associada à expressão da proteína C3.
O gene FUT3 não é ativo no eritroblasto, portanto, os glicolipídios presentes na membrana das hemácias são
sintetizados posteriormente e adsorvidos à membrana eritrocitária.

Question 62

Q

Os antígenos Lewis presentes nos eritrócitos, plaquetas e macrófagos são adquiridos
secundariamente pelo plasma.

Question 63

Q

Indivíduos Lea
sempre serão NÃO SECRETORES enquanto Leb
sempre serão secretores! Cerca de
80% da população caucasoide é constituída de indivíduos secretores! A ausência (ou disfunção) do gene FUT2 marca
um indivíduo não secretor.

Question 64

Q

Teste de absorção-eluição

Answer

A

Absorção é a retirada de anticorpos do soro por meio da adsorção em hemácias. Sendo assim, nesse teste é
misturado em dois tubos de ensaio (A e B) a mancha suspeita junto com anticorpos anti-A e anti-B, respectivamente,
com salina. Esse fenômeno causa a absorção do anticorpo. O sangue é incubado overnight, e no dia posterior, após
sucessivas lavagens com salina e aquecimento a 56ºC (eluição), o sangue se resfria à temperatura ambiente e se
verifica a formação de imunocomplexo por indicadores específicos, geralmente uma nova solução de hemácias com
antígeno conhecido e verificação de aglutinação após a centrifugação. Trata-se de um método sensível capaz de
detectar pequenas quantidades de sangue.

Answer 24

A

Muito utilizado quando existe quantidades ÍNFIMAS de amostra. O princípio de absorção e eluição por
sucessivas lavagens citado no teste de absorção-eluição é o mesmo, com a diferença de que se utiliza algum indicador
que se liga na extremidade livre do anticorpo, potencializando a eficiência da reação.

Answer 25

A

A primeira triagem a se fazer no local de crime ou em laboratório é a verificação de sêmen pela emissão de
luzes. A Lâmpada de Wood ou Bluemaxx associados a filtros são capazes de revelar a presença de sêmen, urina e saliva
em locais de crime devido à presença de agentes fluorescentes nesses líquidos.

Answer 26

A

A FOSFATASE ÁCIDA é uma enzima presente em grande quantidade no esperma, capaz de hidrolisar fosfatos
orgânicos em meio ácido. A detecção de sua atividade pode ser feita a partir de vários substratos (fenilfosfato de sódio,
p-nitrofenil-fosfato, α-naftil-fosfato, timolftaleína monofosfato de sódio), cujo produto formado reage com um sal
diazônio cromogênico. A TIMOLFTALEÍNA MONOFOSFATO DE SÓDIO ou ALFANAFTIL FOSFATO

Answer 27

A

CORRETO, Como agente revelador, utiliza-se a Brentamina ou Fast
Blue B, o qual positiva na coloração azul.

Answer 28

A

Imunocromatografia - O PSA presente na amostra se une ao anticorpo anti-PSA marcado com ouro coloidal,
formando um complexo. Por capilaridade, este complexo formado (PSA-anticorpo marcado) fluirá através da
membrana e se unirá aos anticorpos anti-PSA imobilizados na área de reação, gerando uma banda de cor rosa na área
teste (T). O anticorpo marcado que não se uniu gera uma banda de cor rosa na área controle (C), indicando o correto
funcionamento do ensaio.

ELISA – O teste se baseia na presença de um anticorpo aderido à uma placa, o qual liga-se à suposta amostra
contendo PSA. À reação, é adicionado um anticorpo anti-PSA biotinilado, o qual reage com a estreptavidina (conjugada
com uma peroxidase) quando adicionada. Por fim, é adicionado TMB, um agente cromogênico doador de hidrogênio
para a água, tornando a solução azulada. A partir daqui, utiliza-se um agente de parada da reação (ureia, ácido
sulfúrico), alterando a cor da solução para amarelo.

Microscopia – Sem dúvida é um dos métodos mais utilizados. Aqui, o corante Christmas Tree é a referência.
A vantagem de se utilizar hoje testes como a fosfatase ácida e o PSA é que indivíduos vasectomizados ainda
assim liberam esses componentes, pois fazem parte do trato genital posterior à secção do canal deferente.

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