Leucocytes Flashcards
Que peux-tu dire sur la capacité de division des granulocytes?
ne se divisent jamais
granulocytes neutrophiles
- répartition…
- facteurs influant cette répartition
=deux pools d’égale importance, échanges rapides de l’un à l’autre:
- Le pool circulant, seul concerné par l’hémogramme
- Le pool marginal des éléments collés à la paroi du vaisseau
facteurs influant la répartition:
- corticoïdes / efforts physiques => mobilisation des éléments marginés (polynucléose transitoire)
- 10% des noirs (0,01¨% des blancs), excès de margination => pseudo-neutropénie
granulocytes neutrophiles
décrit ses caractéristiques morphologique (taille, forme, noyau…)
Ø= [10;15]µm, forme grossièrement arrondie
noyau:
- polylobé (nombre de lobe varie avec âge de la cellule)
- chromatine dense
- sans nucléole visible
- sexe féminin, un des lobes nucléaires porte petit appendice (drumstick), correspond au chromosome X inactivé
Qu’est ce que la formule d’Arneth?
=donne le % des éléments selon le nombres de lobes
normal: 50% neutrophiles ont 3 lobes
formule d’Arneth dite:
- déviée vers la gauche qd %(jeunes) />. ex: lors d’infection aigües ou hémorragies
- déviée vers la droite qd %(âgés) /> ex: anémie de Biermer (déficits en facteur intrinsèque, nécessaire à l’absorption de vitamine B12) + déficit acide folique
granulocytes neutrophiles
caractéristiques du cytoplasme:
- baso/acidophile
- renferme
- légérement acidophile
-
renferme:
- organites habituels (golgi, réticulum, mitochondries, ribosomes libres)
- rosettes de glycogène
- microfilaments contractiles
- granulations très fines (jsk 500/¢)
granulocytes neutrophile
Lysosome primaire
lysosomes primaires
- forme de grain de riz, matériel plus ou moins dense aux électons, limité par mP
- interviennent dans destruction des germes phagocytés par la cellule
granulocytes neutrophile
granulation primaire
- coloration?
- taille?
- stade d’apparition?
- renferme…?
granulations primaires:
- azurophiles =>rouge au MGG, colorable au noir de Soudan
- ~ volumineuse Ø=[0,5;1]µm
- s’observent dès les précurseurs des neutrophiles (promyélocytes et myélocytes)
- renferme:
- myélopéroxydase (permet identification par cyto enzymologie), au centre des granulations
- élastase, collagénase , phosphatase acide, lyzozyme (détruisant parois bactériennes)
- enzymes diverses (aryl-sulfatase;β-galactosidase,β-glycuronidase)
granulocytes neutrophile
Décrit les granulations cytoplasmique et explique leur rôle
lysosomes primaires
- forme de grain de riz, matériel plus ou moins dense aux électons, limité par mP
- interviennent dans destruction des germes phagocytés par la cellule
granulations secondaires sont les premières à fusionner avec vacuoles phagocytose, puis, qque mn après granulations primaires
-
granulations primaires:
- azurophiles => couleur rouge au MGG
- colorable au noir de Soudan
- relativement volumineuse Ø=[0,5;1]µm
- s’observent dès les précurseurs des neutrophiles (promyélocytes et myélocytes)
- n(granulations primaires)
- renferme:
- myélopéroxydase (permet identification par cyto enzymologie). Situé au centre des granulations
- élastase
- collagénase
- lyzozyme (détruisant parois bactériennes)
- phosphatase acide
- enzymes diverses (aryl-sulfatase;β-galactosidase,β-glycuronidase)
- granulations secondaires:
- neutrophiles => teinte marron/beige au MGG
- spécifiques des granulocytes neutrophiles
- apparente au stade de myélocyte
- n(granulations secondaire) /> maturation cellulaire
- plus petite Ø=0,2µm
- renferment:
- lysozyme
- collagénase
- lactoferrine (chélateur du fer, inhibant la multiplication bactérienne)
- phosphatase alcaline, permet identification par cyto-enzymologie
- granulation tertiaires:
- particulièrement riche en gélatinase (ou collagènase)
granulocytes neutrophiles
granulations secondaires:
- stade?
- coloration?
- taille?
- renferment?
=neutrophiles => teinte marron/beige au MGG
- spé granulocytes neutrophiles, apparente au stade de myélocyte
- n(granulations secondaire) /> maturation cellulaire
- plus petite que primaire Ø=0,2µm
- renferment: lysozyme , collagénase, lactoferrine (chélateur du fer, inhibant la multiplication bactérienne), phosphatase alcaline (permet identification par cyto-enzymologie)
granulocytes neutrophile
granulations tertiaires,
- particulièrement riche en…
granulation tertiaires: particulièrement riche en gélatinase (ou collagènase)
granulocytes neutrophiles
adhésion à l’endothélium et éléments opsonisés
adhère à l’endothélium vasculaire:
- sélectine P de membrane endothéliale permet reconnaissance et liaison labile
- intégrines renforcent l’accrochage et interviennent pdt la diapédèse
mb neutrophile porte récepteurs fragments Fc des Ig => adhère aux éléments recouverts d’anticorps (_opsonisés_) = 1ere étape phagocytose bactéries
granulocyte neutrophile
mobilité
- mouv. amiboïdes, au hasard, grâce à pseudopodes de la mb, animés par éléments contractiles du cytosquelette
- in vitro: 10 à 20 µm/min
Qu’est ce que le chimiotactisme?
=propriété d’une cellule mobile de s’orienter et de remonter un gradient de concentration d’une substance chimique, dite “chimiotactique”, qui se fixe sur récepteurs membranaires.
Inhibé par les anti-inflammatoires, les hormones et les enzymes qui dégradent facteurs chimiotactique
granulocytes neutrophiles
substances chimiotactiques?
- toxines et fragments de bactérie
- fractions C5a et C3a du complément (pour lesquels il existe récepteurs membranaires spécifiques)
- médiateurs tissulaires
Définit la diapédèse
=faculté de traverser les parois vasculaire pour passer dans le tC
- au niveau des capillaires et des veinules post-capillaires (circu particulèrement lente)
- favorisé par: facteurs chimiotactiques, vasodilatation, ralentissement sanguin à proxi FI (foyer infect°)
diapédèse
Processus
- adhère à endothélium
- émet pseudopodes qui s’insinuent entre ¢ endothéliales
- s’engage entre les ¢ endothéliales, traversée mB
dans la moelle les neutrophiles peuvent gagner la circulation par empéripolèse en traversant le cytoplasme d’un mégacaryocyte
granulocytes neutrophiles
phagocytose?
- particules de petite taille (inf. à 3µm) => “microphages”
- phagocyte des proies opsonisées, en particulier par Ig
- principalement neutrophiles qui phagocytent les bactéries
l**orsque capacité phagocytose neutrophile dépassée => lyse et libèrat° contenu dont facteurs chimiotactiques
granulocytes neutrophiles
bactéricidie?
- bactéricide, peut tuer ~ ttes bactéries phagocytées.
- rappel: principalement neutro qui phago bactérie
moyens multiples:
- superoxyde-dismutase catalyse la formation de H2O2, myélopéroxydase utilise H2O2 pour former HOCl
- Indépedamment de peroxydase se forme OH-
- enzymes lysosomiales (ex:muramidase) détruisent les parois bactériennes
- lactoferrine inhibe croissance bactérienne en privant bactérie de fer (cofacteur de croissance)
granulocytes neutrophiles
phase de vie et destruction
- séjour sanguin : 50% neutrophiles
- départ vers tissus, au hasard sans retour possible
- [2;3] J dans tC puis apoptose => détruit par macrophages
s’accumulent rapidement dans les foyers d’infection et foyers inflammatoires aigus. S’altèrent rapidement => pyocytes (accumulation= pus)
granulocytes neutrophiles
en cas de besoin GN de l’organisme, on observe dans l’ordre
- appel au stock de ¢ mûres peu segmentées de la moelle avec polynucléose transitoire
- appel des metamyélocytes et myélocytes avec myélémie
- augmentation du pool avec hyperplasie granuleuse de la moelle
granulocytes neutrophiles
aplasie médullaire? réapparition au bout de…, leur absence est paliée par…
=moelle détruite par des toxiques ou médicaments
- réapparition au bout de 3 à 8 jours.
- risques d’infection ++/> sépticémie possible
- monocytes palie partiellement à l’absence de granulocytes car régénération plus rapide
granulocytes éosinophiles
abondance, pools?
- 50 à 500/µL
- semble exister pool marginal et circulant
granulocytes éosinophiles
quelles sont les caractéristiques morphologiques des éosinophiles (taille, noyau…)
= plus grand que neutrophiles, Ø=[12;17]µm
- noyau bilobé le plus souvent (2 à 4 lobes)
- présence de granulations (lysosomes primaires)
granulocytes éosinophiles
petites granulations
- taille
- renferment?
membrane
- renferme…
PETITES GRANULATIONS Ø=[O,1;0,3]µm, renferme: phosphatase acide, aryl-sulfatase (qui inactive la SRS-A)
MEMBRANE: lysophospholipase, constitue les cristaux de Charcot-Leyden (strutures cristallines effilées qui s’observent dans les foyers inflammatoires aigus)
granulocytes éosinophiles
granulation éosinophiles
- taille
- renferment?
- volumineuse, Ø=[1;1,5]µm, elliptiques au mE-
renferment:
- peroxydase (diff. celles de neutrophiles)
- enzymes variées: ribonucléase, cathepsines, phospholipadase D…
-
protéine basique (Major Basic Protéin):
- représente 50% des protéines
- responsable de l’éosinophilie
- adhère aux grp acides des mP¢ et peut tuer ¢,parasites
- entraîne dégranulation des basophiles et mastocytes, activation des plaquettes
- protéine cationique éosinophile (Eosinophilic Cationic Protein) neutralise l’héparine et peut également détruire certains parasites
- neurotoxine (EDN)
- PAF (Platelet activating factor)
granulocyte éosinophile
facultés de mobilité et d’adhésion
mobilité et adhésivité comparable à celle du neutrophile
granulocytes éosinophiles
chimiotactisme
activé par vitamine C, en réponse à:
- éotaxine
- ECF-A (Eosinophil Chemotactic Factor A)
- SRS-A (slow Reactive Substance of Anaphylaxis)
- histamine (agent chimiotactique à faible concentration / forte concentration inhibe la migration)
ECF-A et SRS-A** sont libérés par le **basophile** et le **mastocyte => masto/baso peuvent activer éosino
granulocyte éosinophile
phagocytose?
principalement pinocytose => capture les complexes Ag-Ac
granulocyte éosinophile
bactéricide?
pas d’activité bactéricide mais granules libérés peuvent lyser certains parasites
granulocytes éosinophiles
facteurs d’activation
- agents chimiotactiques
- cytokines variées: GM-CSF; IL-3 et IL-5 (cytokines qui stimulent la production d’éosinophiles par la moelle osseuse)
- cytokines spécifiques: ESP (Eosinophil Stimulating Promotor), produite par LT en cas d’infection parasitaire. Stimule libération des granules
granulocytes éosinophiles
interviennent dans…
- régulation des réactions d’hypersensibilité:
- immédiate, détruisant la SRS-A, histamine et PAF.
- retardée
- Immmunité anti-parasitaire, /> avc certaines parasitoses
- résistance aux tumeurs
granulocytes éosinophiles
séjour sanguin, tissulaire? hyperéosinophilie?
- séjour sanguin, bref = [3;8]heures puis gagnent tC / margination & diapédèse
- séjour tissulaire, long = [8;12] jours, pool tissulaire = 300 à 500 fois le pool circulant
hyperéosinophilie
- allergies: asthme, parasitoses
- certains lymphomes T => excès de lymphokines
- séjour sanguin pas allongé mais re-circulation
granulocytes basophiles
Décrit les caractéristiques morphologiques (taille, noyau, cytoplasme…)
- + petits que neutrophiles, Ø=[10;13]µm
- noyau ~ grand, peu segmenté
- cytoplasme sombre, + riches en RE / autres, renferme granulations basophiles spécifiques
Granulocyte basophile
granulations basophiles
- forme?
- taille relative?
- coloration?
- renferment?
- sphériques
- volumineuses que neutrophiles
- pourpre ou bleu foncé au MGG, métachromatiques au bleu de toluidine
- renferment: GAG (dont héparine), histamine, SRS-A (Slow Reactic Substance of <strong>Anaphylaxis</strong>), ECF-A (<strong>facteur d’activation </strong>pour éosinophiles)
Les basophiles possèdent des R membranaires des Ig E.
fixation d’Ag sur ces Ig entraîne…
la dégranulation de la cellule
granulocytes basophiles
- interviennent dans…?
- dégranulation?
- phagocytose?
- hypersensiblité immédiate & retardée (se manifeste 24 h après contact avec Ag)
- fluidité du sang par l’int. de l’héparine
-
dégranulation massive des basophiles circulants => chocs anaphylactique:
- vasodilatation et augmentation de la perméabilité vasculaire
- pouvoir phagocytaire ~ nul (mobilité / chimiotactisme réduits)
granulocytes basophiles
durée de vie
3 / 4 jours
monocytes
rapport pools marginé/circulant
pool marginé = 3 * pool circulant
monocytes
caractéristiques morphologiques
- taille?
- forme?
- noyau?
- cytoplasme?
- granulations?
- les + grands leucocytes, Ø=[10;18]µm
- contours irrégulier, mb peut émettre pseudopodes
- noyau ± excentré, arrondi/ovalaire, réniforme ou bilobé., renferme deux nucléoles
- cytoplasme: gris bleu au MGG pauvre en granulation (hyalin)
- granulations très petites, azurophiles
monocytes
contenu des granulations
- myélopéroxydase
- aryl-sulfatase
- phosphatase acides
- β-glycuronidase
- lysozyme
- lipases
Qu’est ce qu’un histiocyte?
forme fonctionnelle tissulaire du monocyte
monocyte
adhérence
= adhère à de nombreux supports, comme endothélium vasculaire qu’il traverse par diapédèse.
propriété permet de les isoler à partir du sang circulant (monocytes restent collé au fond de boite de culture après lavage)
monocytes
mobilité
plus importante au stade d‘histiocyte et augmente lors de l’activation
monocytes
chimiotactisme
- migration inhibée par…
- facteurs chimiotactiques
inhibés / MIF (macrophage inhibiting factor): libérés pdt réponse immunitaire par lymphocytes activés
facteurs chimiotactiques:
- C5a, C3a: libéré après formation couples Ag-Ac
- interleukines-1: produite par lymphocytes, monocyte-macrophage, fibroblastes, cellules épithéliales
- MCP-1 (Macrophage Chemotactic Protein): sécrétée par macrophage, fibroblastes, lymphocytes B et cellules endothéliales
- MIP-1 (Macrophage Inflammatory Protein): produite par lymphocyte T et B, mastocytes et monocytes
- PDGF (Platelet Derived Growth Factor): libéré par plaquettes, macrophages et celules endothéliales
- produits libérés par granulocytes neutrophiles
- cytotoxines et endotoxines bactériennes
monocytes
- médiateurs d’activation
- inhibition
- effets de l’activation?
médiateurs activation
- facteurs chimiotactiques
- interférons: produits par lymphocytes, monocytes-macrophages,fibroblastes
- TNF-α (facteur nécrosant les tumeurs): produit par les lymphocytes, les macrophages et les mastocytes
- M-CSF (Monocyte-colony Stimulating Factor) produit par LT, les macrophages et les GN
inhibition
- interleukine-10 inhibe sécrétion cytokines activatrices produite par LT et macrophages
effets
- transformation histiocytaire avec /> V cellulaire, métabolisme, mobilité, synthèses, équipement enzymatique
- apparition de nombreux lysosomes, production de cytokines: GM-CSF; G-CSF; IL-1; IL-4; IL-6; IL-8; IL-10; TNF-α; Pg-E2
monocytes
phagocytose
histiocytes= les seuls éléments de l’organisme capables de phagocyter grandes particules et ¢ entières (=macrophage)
monocytes
bactéricidie?
- capacité de détruire la plupart des bactéries phagocytées
- résistance au niveau des germes à développement intracellulaire (myobactéries, brucelles…)
monocytes
cytotoxicité?
activés? => peuvent excréter des enzymes => lyse des cellules étragère, cellules tumorales
moyen non-spécifique de la lutte anti tumorale
monocytes
- produits par?
- séjour sanguin
- durée de vie?
durée de vie variable ~ 100 jours
- produits par MO (première ¢ à apparaître après aplasie medullaire)
- séjour sanguin < 5h
- passent dans tConj
- transformation=> éléments du système phagocytaire mononucléé:
- histiocytes dans le tC
- ostéoclastes dans tO
- macrophages alvéolaires dans poumons
- Cellules de Küpffer dans le foie
- parfois à l’origines des microgliocytes des tN
lymphocytes
pool sanguin?
proportion dans la lymphe?
- pool sanguin = 2/100 des lymphocytes de l’organisme
- représente en grande majorité les éléments présents dans la lymphe
lymphocytes
particularités morphologiques
- hyalins, dépourvu de peroxydase (syst. immun. mononucléé hyalin)
- morphologie variable et aspects observés correspondent à stades fonctionnels très différents
- ainsi au MGG on distingue diff “stades” de lymphocytes
lymphocytes
petits lymphocytes, caractéristiques morphologiques:
- taille?
- forme?
- proportion du pool sanguin?
- noyau?
- cytoplasme?
- membrane?
sphérique, Ø=[7;8]µm, 3/4 des lymphocytes du sang
noyau : 90%¢, arrondi au mP, encoché au mE
cytoplasme: basophile, hyalin, riche en ribosomes, petites vacuoles de pinocytose
membrane: présente microvillosités
lymphocytes
grands lymphocytes, caractéristiques morphologiques
- % pool sanguin
- taille
- noyau
- cytoplasme
1/4 pool lympho sanguins, Ø=[10;12]µm
noyau excentré et encoché, plus clair, sans nucléole visible
cytoplasme plus abondant, peu basophile, contour irrégulier
lymphocytes
grands lymphocytes granuleux, caractéristiques:
- % pool sanguin?
- cytoplasme?
- rôle?
1/100 des lymphocytes du sang
- cytoplasme renferme granulations azurophiles = lysosomes
- renferment: estérase; perforine (capable de lyser mB ¢)
LYMPHOCYTES CYTOTOXIQUES
lymphocytes
plasmocytes, caractéristiques
- % des éléments du sang
- on en rencontre dans …
- = lympho spécialisé dans…
- division?
- < 0,1% des éléments du sang
- se rencontre dans le tC (chorion muqueuses et conjonctif périglandulaire) et organes hémato-/lymphopoïètiques
- spécialisé dans la prod d’Ac (ou Ig)
- aucune division
lymphocytes
morphologie plasmocytes
- forme?
- taille?
- noyau?
- cytoplasme?
ovalaire ou piriforme, Ø=[12;14]µm
noyau, excentré, chromatine en mottes
cytoplasme très basophile
renferme: grains de sécrétion (parfois volumineux, forment les corps de Russel et s’accumule => Cellule de Mott)
lymphocytes
Distinction lymphocytes T / B?
- en dehors des plasmocytes et des LGL, aucun aspect morphologique permettant distinct°.
- => identifié par cyto-immunologie (ex: cytométrie en flux)
lymphocytes
rôles des LB
immunité humorale
c.a.d. médiée par les Ac
lymphocytes
LB, origine?
chez les mammifères ils se forment dans la MO (Bone marrow)
lymphocytes
LB, répartition
- % pools lymphocytes sanguin
- abondants dans… (x %)
- 15 à 35 % des lymphocytes du sang
- +abondants dans rate (50 à 65% des lymphocytes spléniques)
Par quel moyen peut-on mettre en évidence les lymphocytes B?
Ac pan-B qui reconnaissent les molécules spécifiques de la lignée B comme:
CD19,20,21
lymphocytes
LT, rôle
- immunité cellulaire & contrôlent la réponse immunitaire (TCR-2+)
deux sous classes fonctionnelles ayant un rôle antagoniste:
- T auxiliaires: facilite la réponse
- T suppresseurs: inhibe la réponse
lymphocytes
LT répartition,
- % des lymphocytes sanguins:
- TCR-1: x-%
- TCR-2: x %
- domine dans….?
-
60 à 85% des lymphocytes sanguins
- TCR-1 : 10% des T circulants
- TCR-2: 90% des T circulants
- domine dans les GG & lymphe du canal thoracique
lymphocytes
LT, origine?
dans le Thymus, contrôle leur maturation
Par quels moyens peut-on mettre en évidence les lymphocytes T?
anticorps pan-T reconnaissant molécules spécifiques:
CD2,3,5
lymphocytes
LT, récepteur AG : deux types?
c’est une molécule spécifique, existe deux types:
- TCR-1 (2 chaînes γ et δ)
- TCR-2 (2 chaînes α et β)
lymphocytes
LT TCR-2+, sous classes?
T auxiliaires activateurs (helper)
- facilite la réponse immunitaire
- CD4+ , reconnaissent Ag associés au complexe majeur d’histocompatibilité de type II (N.B.: une sous pop de CD4+ “aurait” fonctions suppressives)
T suppresseurs cytotoxiques
- inhibe la réponse immunitaire
- CD8+ reconnaissent les Ag associés au complexe majeur d’histocompatibilité de type I
- certaines ont la morpho des LGL
lymphocytes
LT TCR-1 +, CD différents en f(localisation)
- sang circulant: CD4- CD8-
- muqueuses: CD4- CD8+
lymphocytes
cellules natural killer
- récepteurs
- cellule dites…
- ne portent pas de R d’Ag, mais R fragments Fc et Ig G
- ¢ cytotoxiques
lymphocytes
cellules natural killer, % lymphocytes circulants
jsk 15% des lymphocytes circulants
lymphocytes
cellules natural-killer, clusters de diff?
CD7,16
16: également présent sur granulocytes et qques macrophages
lymphocytes
Spécificité antigénique…?
chaque lymphocyte (B ou T): spécifique d’un déterminant antigénique
lymphocytes
re-circulation lymphocytaire?
entre les organes lymphoïdes secondaires: rate, ganglions et conjonctif des muqueuses & emprunte circu. lymphatique & sanguine
lymphocytes
transformation lymphocytaire:
- s’observe dans…
- regroupe ensemble des phénomènes cellulaires déclenchés par contact du lymphocyte et de l’AG correspondant
- s’observe dans organes lymphoïdes périphériques
- regroupe l’ensemble des phénomènes cellulaires déclenchés par contact du lymphocyte et de l’Ag correspondant
au cours de transformation, plusieurs mitoses successives associées à modif. cellulaires => apprentissage des fonctions immunologiques
deux types:
- transformation blastique
- transformatique plasmocytaire
lymphocytes
transformation blastique
- concerne ?
- se traduit par…?
- cellule prend aspect blastique: ?
concerne lymphocytes T et B
se traduit par reprise brutale d’activité métabolique: synthèse d’ARN et protéines, duplication d’ADN
cellule prend aspect blastique (immunoblastes): cytoplasme très basophile, gros noyau à chromatine claire et très nucléolé
lymphocytes
transformation plasmocytaire
- concerne LB
- lymphocyte B se multiplie, diff stades cell blastique: plasmoblaste => pro-plasmocytes
- se spécialise de + en + vers production et sécrétion d’Ac, évoluent vers plus grande spécificité/affinité pour l’Ag initial
- plasmocytes spécialisés dans prod d’anticorps dirigés contre antigène initial
lymphocytes
- principalement les lymphocytes… qui produisent cytokines
- cytokines interviennent dans…
- principalement LT qui produisent cytokines
- cytokines interviennent dans régulation du f(immunitaire) mais aussi de l’hémato-/lymphopoïèse
lymphocytes
cellules sortant des organes lymphoïdes centraux?
production permanente et indépendante d’une stimulation lymphocytaire
cellules sortant de la moelle:
- LB vierges, vie limitée (~ 40 jours)
- si ne rencontrent pas Ag => apoptose
- si ils rencontrent l’Ag => transfo blastique & eventuellement transformation plasmocytaire => lymphocytes “mémoire” à vie longue
cellules sortant du thymus
- LT vierges, n <\ avec l’age, gagnent organes lymphoïdes périphériques et re-circulent dans le sang
- Ne retournent ni dans la moelle ni dans le thymus
Quelles sont les spécificités des cellules ayant rencontré Ag?
spécificité plus fine, grande durée de vie (10 à 15 ans) et recirculent entre organes périphériques
