Lembo

Question 1

Che cos’è un microrganismo?

Answer 1

Un microrganismo è un organismo vivente non visibile ad occhio nudo e costituito da una sola cellula dotata di vita propria

Question 2

Quali sono le tipologie di microrganismi?

Answer 2

Batteri (Bacteria e Archea), Funghi, Protozoi.

N.B. I Virus vengono studiati dalla microbiologia ma non sono microrganismi

Question 3

Quali sono le caratteristiche di un organismo vivente?

Answer 3

Metabolismo, capacità di riprodursi autonomamente, movimento attivo, comunicazione, risposta agli stimoli, evoluzione

Question 4

Qual è lo stato cromosomiale dei batteri?

Answer 4

I batteri sono aploidi cioè hanno una sola copia di geni

Question 5

Come si differenziano i diversi microrganismi rispetto alle loro capacità metaboliche?

Answer 5

Ogni organismo ha fonti di carbonio e di energia.
Se usano carbonio inorganico sono autotrofi, se usano carbonio organico sono eterotrofi.
Se captano l’energia solare e la fissano in atp sono fototrofi, altrimenti possono essere:
- chemioorganotrofi: usano sostanze organiche
- chemiolitotrofi: usano sostanze inorganiche
- aerobi: ossidano in presenza di ossigeno
- anaerobi: ossidano in assenza di ossigeno

Question 6

Che forme possono avere i batteri?

Answer 6

• Cocchi: forma sferica, possono stare come diplococchi (a 2 a 2), streptococchi (catena), stafilococchi (grappoli)
• Bacilli: forma allungata, possono stare come diplobacilli, streptobacilli. Possono avere una curvatura (vibrione) o più curvature (spirochete).

Question 7

Da cosa è formata la parete dei bacteria?

Answer 7

Fosfolipidi con un glicerolo legato mediante legame estere a code idrofobiche di acidi grassi.
Può anche essere presente uno strato più sottile o più spesso di peptidoglicani

Question 8

Come è fatto il peptidoglicano?

Answer 8

è una proteina formata dalla ripetizione di glican tetrapeptide, viene sintetizzato nel citoplasma e necessita di un trasportatore per attraversare la membrana

Question 9

Da cosa si differenziano i batteri GRAM + e -?

Answer 9

Nei GRAM+ la parete è formata da uno spesso strato di peptidoglicano, per questo sono sensibili ai lisozimi.
Nei GRAM- c’è una membrana esterna con il lipopolisaccaride (dà tossicità), è divisa dalla membrana interna dallo spazio periplasmatico che contiene uno strato di peptidoglicano sottile.

Question 10

Come è fatta la parete cellulare degli archea?

Answer 10

è costituita da fosfolipidi (glicerolo + code di ripetizioni di isoprene legate con un legame etere) e pseudopeptidoglicano (insensibile al lisoenzima).
Non è sempre presente, ci possono essere involucri paracristallini proteici.

Question 11

Come è fatta la membrana citoplasmatica dei Bacteria?

Answer 11

è un doppio strato di fosfolipidi (glicerolo+acidi grassi, leg estere) con proteine di membrana. Una proteina tipica è l’opanoide, con funzione di tampone di fluidità

Question 12

Come è fatta la membrana citoplasmatica degli Archea?

Answer 12

è costituita da glicerolo + code di ripetizioni di isoprene (fitanili) legate con un legame etere.
In alcuni si forma un difitanile: non è un doppio strato ma una molecola unica, utile per la resistenza ad alte temperature

Question 13

Che cos’è la forza promotrice?

Answer 13

è una forza che si genera grazie alla differenza di potenziale a livello della membrana in seguito all’attivazione di pompe protoniche atp dipendenti

Question 14

Dove si trova il genoma in un batterio?

Answer 14

Non è presente nucleo, si può però riconoscere un nucleoide, cioè una zona del citoplasma dove la molecola si trova

Question 15

Che cosa sono i corpuscoli?

Answer 15

Sono accumuli di sostanze con varie funzioni.
Accumuli di poli idrossi butirrato funzionano da depositi di carbonio, accumuli di magnetite permettono di orientarsi rispetto a un campo magnetico, vescicole di gas permettono di stare a galla

Question 16

Che cosa sono i flagelli?

Answer 16

Sono lunghe appendici che conferiscono motilità, rendono quindi il batterio capace di muoversi

Question 17

Come si misura la velocità di un batterio?

Answer 17

Si valuta quante lunghezze del proprio corpo percorre in un secondo

Question 18

Come si possono distinguere le cellule batteriche in base ai flagelli?

Answer 18

1: monotricca
2, uno per polo: anfitricca
tanti da 1 polo: iofotricca
tanti da tutto il corpo: peritricca

Question 19

Quali sono le componenti fondamentali di un flagello?

Answer 19

Il meccanismo intramolecolare comprende 4 anelli proteici con intorno proteine Mot e fli.
Il flagello è costituito da flagellina.

Question 20

Come fa a funzionare un flagello?

Answer 20

Le proteine mot traggono energia dalla forza protomotrice: consumando protoni conferiscono un movimento al flagello, il senso orario o antiorario è governato dalle proteine fli.
Il movimento è sempre guidato da stimoli chimici (chemotassi) o da fonti di luce (fototassi).

Question 21

Che cosa sono i pili?

Answer 21

I pili sono corte appendici con funzione di ancoraggio ai substrati.
Sono formati da ripetizioni di pilina e delle adesine alle estremità

Question 22

Che cos’è e a cosa serve un sex pilus?

Answer 22

è un pilo che prende contatto con il pilo di un’altro batterio e permetto lo scambio di informazioni genetiche (coniugazione)

Question 23

Che cos’è e a cosa serve la capsula?

Answer 23

è uno strato mucoso polisaccaridico prodotto dalla cellula e depositato sulla sua superficie esterna.
Protegge dall’essicazione, è un deposito esterno di zuccheri e media l’adesione ad un substrato

Question 24

In cosa consiste un ciclo di sporulazione?

Answer 24

La cellula divide il dna, produce un setto in uno dei due poli e forma una nuova cellula con scarso citoplasma, poca acqua e poco metabolismo (spora).
Se l’ambiente torna favorevole la spora può germinale e ricomincia il normale ciclo vegetativo

Question 25

Dove si può trovare una spora in un batterio e che forme può avere?

Answer 25

Può essere in zona terminale, subterminale o centrale e avere forma circolare o ellissoidale.
Comparando il suo diametro con quello del batterio si trovano spore deformanti e non deformanti

Question 26

A cosa è dovuta la resistenza delle spore?

Answer 26

• acido dipicolinico: si complessa alle proteine per stabilizzarle
• sasp: legano il dna e lo proteggono da uv, essicazione e calore

Question 27

Cosa significa trascritto polistroico?

Answer 27

Vuol dire che la replicazione del dna batterico avviene interamente: si avrà un solo trascritto con diverse zone codificanti

Question 28

Quali proteine intervengono nella replicazione del dna e come funziona?

Answer 28

1a - DNA A riconosce oriC e crea un nucleo centrale attorno al quale si avvolge il dna
1b - dnab e dnac creano la forca di replicazione
1c - elicasi separa le eliche
2- ssb stabilizzano le singole eliche
3- dna primasi crea un primer
4- dna polimerasi 3 lavora su entrambe le eliche
5- polimerasi 1 rimuove i primer e unisce i frammenti
6- ligasi: lega i nucleotidi

Question 29

Come è fatta l’RNA polimerasi batterica?

Answer 29

è costituita da 5 subunità: due alfa, una beta, una beta primo e un fattore sigma (per riconoscere il promotore)

Question 30

Quali sono le caratteristiche di promotore e terminatore batterico?

Answer 30

Il promotore è formato da due sequenze, una a -10 ricca di a e t e una a -35.
Il terminatore è invece una sequenza ricca di G e C

Question 31

Come è fatto un gene batterico?

Answer 31

Si trova il promotore a -35, poi quello a -10, poi la sequenza SD (complementare all’rna ribosomiale 16s), poi la sequenza codificante e infine il terminatore

Question 32

Come può essere effettuata la regolazione dell’espressione di un operone?

Answer 32

Si può avere controllo positivo (la polimerasi trascrive solo se si lega un attivatore) o controllo negativo (un repressore blocca la polimerasi)

Question 33

Esempio di controllo negativo

Answer 33

Operone Lac

Question 34

Esempio di controllo positivo

Answer 34

Operone del maltosio

Question 35

Come funziona il clonaggio?

Answer 35

1- Viene isolato il frammento di DNA di interesse e viene tagliato mediante enzimi di restrizione
2- Viene tagliato il plasmide con l’enzima di restrizione compatibile a quello usato per il DNA
3- Vengono saldati il frammento di DNA e il plasmide
4- Si fa la trasfezione dei plasmidi nei batteri e si fanno trasformare
5- Si fanno crescere le colonie su terreni selettivi (con antibiotici)
6- Vengono quindi identificate le colonie contenenti il plasmide ricombinante mediante colorazione blu-bianco:
I. Si inserisce nel multiple cloning site l’operone lacZ;
II. Si fornisce un substrato artificiale (Xgal) molto simile al lattosio;
III. La β-galattosidasi scinde questo composto e si deposita del colore blu.
I batteri in cui c’è deposito di blu sono quelli in cui la trasformazione non si è verificata perché vuol dire che il gene di interesse non si è inserito tra le due estremità del plasmide.