Donalisio

Question 1

Quali sono i principali ELEMENTI che costituiscono una cellula procariote?

Answer 1

Macroelementi (C, O, N, H, P, S) e microelementi (Mg, Ca, Fe, K)

Question 2

Che tipo di terreni si possono usare per una coltura cellulare? (distinzione generale)

Answer 2

Terreni liquidi per grandi concentrazioni microbiche e terreni solidi

Question 3

Come avviene la semina su un terreno solido?

Answer 3

Si prende un inoculo, si preleva con un’ansa sterilizzata e si fa il piastramento con il metodo a 4 quadranti. Si capovolge la piastra e si mette nell’incubatore

Question 4

Come è fatto un terreno solido?

Answer 4

è un terreno gelificato formato principalmente da agar (componente polisaccaridica di un’alga marina).

Question 5

Quali sono le caratteristiche dell’agar?

Answer 5

è una componente che si scioglie a 80/90 gradi, è liquido fino a 40/42 e al di sotto di questa temperatura solidifica

Question 6

Come si possono classificare le colonie?

Answer 6

I parametri usati sono la forma (circolare per batteri e lieviti, rizoide per funghi, irregolare o filamentosa per le muffe), il bordo (intero, ondulato, lobato, rizoide, filamentoso), la sezione (piatta, sollevata, convessa, pulvinata, umbonata), la dimensione (puntiformi, piccole, moderate, grandi), la tessitura (liscia o rugosa), l’aspetto (luminoso o opaco), la pigmentazione (colorate o trasparenti) e le proprietà ottiche

Question 7

Che tipo di diagnosi si può fare in seguito a piastramento su terreno solido?

Answer 7

Si può fare diagnosi diretta o indiretta.
Nel caso della diagnosi diretta si vuole isolare e identificare direttamente il microrganismo presente nel campione, si può sfruttare la microbiologia tradizionale (microscopi tradizionali, rilevazione di antigeni o dna) oppure la microbiologia molecolare (genomi).
Quando si fa diagnosi indiretta si vuole invece valutare la risposta immunitaria dell’ospite

Question 8

Come possono essere classificati i terreni in base alla loro composizione?

Answer 8

Si riconoscono terreni sintetici (quantità di ogni componente nota), complessi (composizione non completamente nota, materiali organici a basso costo), selettivi (favorisce certi microrganismi e uccidi altri) o differenziali (permettono la distinzione dei microrg. in base alle attività metaboliche)

Question 9

Elenca alcuni esempi di terreni differenziali

Answer 9

Macconkey agar, mannitol salt agar, blood agar

Question 10

Come avviene la divisione cellulare di batteri bacilli?

Answer 10

Si ha una crescita in lunghezza e dei costituenti cellulari, il peptidoglicano fa sviluppare la membrana citoplasmatica e il cromosoma batterico si duplica restando legato alla membrana. I due cromosomi migrano verso i poli opposti della cellula e si forma un setto trasverso. Si avrà poi la formazione di due pareti distinte e quindi delle due cellule figlie.

Question 11

Quali sono le proteine necessarie per la divisione cellulare?

Answer 11

• proteine Fts: in particolare ftsZ, si dispone lungo il corpo cellulare in posizione mediana per creare il piano di divisione
• EnvA: rompe lo strato di peptidoglicano dove ci sarà la divisione
• MinC e MinD: si posizionano in posizione polare non permettendo il posizionamento di ftsZ
• MreB: forma delle bande di citoscheletro che determinano la forma del batterio (la loro assenza porta ai cocchi)

Question 12

Come avviene la divisione cellulare dei cocchi?

Answer 12

Come per i bacilli ma la deposizione di peptidoglicano (sintesi della nuova parete) non avviene in maniera diffusa ma solo sull’anello di FtsZ

Question 13

Come si può valutare la crescita batterica in un terreno liquido?

Answer 13

Si valuta la variazione di due parametri:

• concentrazione cellulare: n. cellule per unità di volume, si può fare conta microscopica diretta o conta vitale.
• Massa cellulare: si misura con torbidità, contenuto di M proteine, attività biochimica, peso secco o umido, volume totale dopo centrifugazione

Question 14

Come funziona la conta microscopica diretta?

Answer 14

Si fissa un vetrino con la sospensione batterica sulla camera di Burker, questa ha una griglia quadrettata da 25 quadrati ad area nota. Si contano le cellule per quadrato, di fa la media dei quadrati e la si moltiplica per un fattore di conversione basato sul volume della camera.
Non si distinguono cellule vive e morte, è difficile vedere le cellule piccole o a bassa densità

Question 15

Come funziona la conta vitale?

Answer 15

Si prende 1ml di sospensione e 9ml di brodo, poi risospendo, prelevo 1ml e aggiungo 9 di brodo. Via così e poi si piastra su superficie o per inclusione su terreno agarizzato. Si incuba e si sceglie la piastra migliore. Posso usarla per ottenere la carica batterica di un campione dato che ottengo il numero di colonie per ml

Question 16

Come si può valutare la torbidità?

Answer 16

Posso usare un colorimetro, cioè un filtro che fa in modo che la luce che passa attraverso la sospensione abbia una lambda precisa, o uno spettrofotometro che misura la luce trasmessa in termini di densità ottica (+densità,+torbidità,+massa cellulare)

Question 17

Descrivi una curva di crescita di un popolazione batterica

Answer 17

In un sistema chiuso si riconoscono 4 fasi:

• di latenza: adattamento alle condizioni di coltura, tempo di generazione lungo
• esponenziale: massima velocità di crescita con minore tempo di generazione, autolimitante
• stazionaria: plateau, numero di cellule costanti, produzione di spore perchè sono finiti i nutrienti
• di morte: divergenza nel grafico tra torbidità (conta le cellule morte) e conta vitale

Question 18

In cosa consiste una coltura continua?

Answer 18

Tramite un chemostrato si instaura un flusso a volume costante di terreno fresco per mantenere la fase esponenziale a lungo

Question 19

Che influenza ha la temperatura sulla crescita microbica?

Answer 19

la crescita microbica è resa possibile da un insieme di reazioni biochimiche strettamente influenzate dalla temperatura.
Si riconoscono:
- t minima: al di sotto la membrana gelifica
- t ottimale: le reaz avvengono alla max velocità possibile con il min tempo di generazione, più vicina alla t max che min
- t max: oltre la membrana collassa e le proteine degradano

Question 20

Come si possono classificare i microrganismi in base alla loro resistenza alla temperatura?

Answer 20

• Psicrofili: da -10° a 20°, colonizzano ambienti freddi come oceani o regioni polari, sopravvivono all’interno di piccole bolle d’aria non completamente congelati
• Psicotolleranti: tra i 20 e i 30°
• Mesofili: tra 30° e 40°, sono ad esempio i patogeni dell’uomo
• Termofili: tra 50° e 70°
• Ipertermofili: più di 80°, sono principalmente Archea, vivono in geyser, sorgenti vulcaniche sottomarine ad esempio.

Question 21

Quali sono gli adattamenti molecolari necessari per la psicrofilia?

Answer 21

• Presentano più α eliche: aumentano la flessibilità al freddo
• Hanno una maggiore quantità di amminoacidi polari
• Hanno efficaci sistemi di trasporto attivo a basse temperature
• Hanno una membrana ricca di acidi insaturi: aumenta la fluidità e diminuisce la temperature di gelificazione

Question 22

Quali sono gli adattamenti molecolari per l’ipermofilia

Answer 22

• Enzimi con una maggiore stabilità al calore grazie a sostituzione di alcuni amminoacidi
• Le proteine vengono stabilizzate da diinositolo fosfato o diglicerolo fosfato contro la degradazione termica
• Ci sono proteine simili agli istoni complessate al genoma che ne mantengono la struttura a doppio filamento
• La membrana è resa termostabile dalla presenza di acidi grassi saturi con legami idrofobici più forti

Question 23

Come si possono classificare i microrganismi in base al loro pH ottimale di crescita?

Answer 23

• Acidofili: pH < 6
• Neutrofili: 6 < pH < 8
• Alcalofili: pH > 8

Question 24

Come si possono classificare i microrganismi in base alla loro resistenza agli effetti osmotici?

Answer 24

• Xerofili: ambiente secco (bassa attività d’acqua)
• Osmofili: bassa attività dell’acqua, tanti zuccheri
• Alofili: 3% di sali
• Alofili estremi: 30% di sali
• Alotolleranti: poco o niente sali
• Non Alofili: non sopportano sali
  Allofili: capacità di sopravvivere in presenza di sale, dipende dalla capacità di sintetizzare o prendere dall’ambiente composti compatibili. Serve per diminuire lo sbalzo osmotico tra interno ed esterno ed evitare la lisi osmotica.

Question 25

Come si possono classificare i microrganismi in base alla necessità di ossigeno?

Answer 25

• Aerobi
  o Aerobi obbligati: l’ossigeno atmosferico è sempre richiesto
  o Aerobi facoltativi: crescono sia in presenza che in assenza di ossigeno
  o Microaerofili: richiedono bassi livelli di ossigeno
• Anaerobi: non usano l’ossigeno come accettore finale
  o Aerotolleranti: crescono sia in presenza che in assenza di ossigeno ma preferiscono senza, fanno fermentazione
  o Obbligati: la

Question 26

In cosa consiste la sterilizzazione?

Answer 26

la completa distruzione o eliminazione di tutti i microrganismi viventi in o su un oggetto. Può avvenire per metodi chimici o fisici

Question 27

Quali sono i metodi fisici per la sterilizzazione?

Answer 27

Si può usare il calore, le radiazioni e la filtrazione

Question 28

Come viene usato il calore per sterilizzare? (solo come, e elenco metodi)

Answer 28

Si basa sulla temperatura massima per la crescita del microrganismo, superandola questo muore. Si valuta il tempo di riduzione decimale cioè il tempo necessario per ridurre di 10 volte la densità di una popolazione microbica ad una data temperatura.
I metodi usati sono l’incenerimento, l’autoclavaggio, la bollitura, il calore secco in stufe con aria calda e la pastorizzazione

Question 29

In cosa consiste l’incenerimento?

Answer 29

t>500°, per piccoli oggetti (aghi, anse, vetreria) che non si rompono

Question 30

In cosa consiste l’autoclavaggio?

Answer 30

t=121° per 15 min a 1atm. In una camera a chiusura ermetica si immette vapore sotto pressione, il materiale è in una carta porosa con uno scotch di autoclave che fa da indicatore per la corretta sterilizzazione

Question 31

In cosa consiste la bollitura?

Answer 31

t=100° per 30min, uccide gli organismi ma non le endospore.

Per ucciderle si fa bollitura intermittente (tindalizzazione) cioè 3 cicli a 100° intervallati da raffreddamento

Question 32

In cosa consiste la sterilizzazione con calore secco in stufe con aria calda?

Answer 32

t=160° per 2 ore o 170° per un’ora.

Può anche essere usata per asciugare il materiale che fuoriesce dall’autoclave

Question 33

In cosa consiste la pastorizzazione?

Answer 33

si riduce la popolazione microbica eliminano non tutti i microrganismi ma i patogeni si. Può essere:
o Holder: t = 63°C per 30 min. Uccide la maggior parte delle cellule vegetative e altera le caratteristiche organolettiche del latte

o Istantanea: o flash method o HTST (high temperature short time). t = 72°C per 15 secondi. Viene eseguita in sistemi a flusso continuo, si ha una minore alterazione delle caratteristiche organolettiche

o UHT: t = 135°C per 3-8 secondi. Permette la conservazione del latte senza refrigerazione (a temperatura ambiente)

Question 34

Come si possono usare le radiazioni per sterilizzare?

Answer 34

Le radiazioni uccidono i microrganismi perchè danneggiano l'acido nucleico. Ci sono radiazioni non ionizzanti o ionizzanti.
Le prime si usano per sterilizzare superfici e oggetti, rompono la doppia elica inducendo la formazione di dimeri di timina che inibiscono la corretta replicazione del DNA. Non sono in grado di penetrare superficie solide opache.
Le ionizzanti (raggi gamma) sterilizzano la plastica formando molecole reattive instabili che degradano dna e proteine

Question 35

Come si può usare filtrazione per sterilizzare?

Answer 35

Non si uccidono i microrganismi ma si rimuovono fisicamente da un liquido o un gas usando un filtro.

• tipo nucleopore: sottile strato di policarbonato trattato con radiazioni nucleare che causano danni localizzati, si utilizzano poi composti chimici corrosivi che corrodono i punti danneggiati creando pori. Vengono utilizzati per l’allestimento di campioni per l’analisi a microscopio elettronico
• Filtri a spessore: sono pre-filtri usati per rimuovere particelle di grandi dimensioni
• Filtri per piccoli volumi: sono dispositivi di plastica da associare ad una siringa e contengono al loro interno la membrana
• Filtri Hepa: vengono usati per la filtrazione dell’aria

Question 36

Che cosa sono gli agenti antimicrobici?

Answer 36

Sono sostanze chimiche che uccidono o inibiscono la crescita di microrganismi

Question 37

Quali sono i livelli riconosciuti per disinfettanti e antisettici?

Answer 37

Si riconoscono 3 livelli (ricordare degli esempi):
- Livello basso: uccidono la maggior parte delle cellule vegetative, ma non mycobacterium tubercolosis, alcuni funghi e inattiva alcuni virus.
Es antisettici: perossido di idrogeno al 3%
- Livello intermedio: uccidono i microrganismi vegetativi incluso batterio della tubercolosi, tutti i funghi e inattiva la maggior parte dei virus. Vengono chiamati disinfettanti tubercoliciti.
Es disinfettanti: alcol etilico, alcol isopropilico, candeggina (ipoclorito di sodio)
Es antisettici: alcoli, cloroecidina, betadina, providon
- Livello alto: uccidono cellule vegetative, inattivano virus, ma non necessariamente tutte le spore. Questi disinfettanti sono in grado di sterilizzare quando il tempo di contatto è relativamente lungo, da 6 a 10 ore.
Es disinfettanti: perossido di idrogeno al 6%
A seconda della concentrazione e della composizione una sostanza può essere disinfettante o antisettica

Question 38

Quali sono e come funzionano gli sterilizzanti chimici sotto forma di gas o vapore?

Answer 38

Sono agenti chimici sotto forma di gas, sono estremamente tossici per l’uomo quindi usati solo in sistemi chiusi.
Sono esempi:
- Ossido di etilene: gas esplosivo ad alta efficacia
- Formaldeide al 37%: sostanza cancerogena usata per sterilizzare filtri hepa
- Perossido di idrogeno al 30%: è il più moderno, non produce sostanze tossiche e richiede meno di un’ora a temperature inferiori di 50°C

Possono avere diversi meccanismi di azione:
1- Denaturando le proteine: formaldeide, gluteraldeide, ossido di etilene
2- Ossidando gruppi sulfidrilici liberi o altri gruppi funzionali: perossido, cloro, ipocloriti
3- Alogenando: per i composti a base di iodio, si iodinano i residui di tirosina
4- Alterando la membrana: alcoli e fenoli modificano i lipidi di membrana mentre i composti di ammonio quadernario modificano la tensione della membrana

Question 39

Che cos’è un antibiotico?

Answer 39

Un antibiotico può essere naturale, prodotto da microrganismi come batteri o funghi, oppure semisintetico, le molecole naturali vengono estratte e poi modificate.
Queste molecole sono metaboliti secondari prodotti nella fase stazionaria della curva di crescita

Question 40

Quali possono essere i meccanismi di azione di un antibiotico?

Answer 40

Può essere batteriostatico (inibisce la crescita), batteriolitico (uccide tramite lisi) o batteriocida (uccide)

Question 41

Qual è la differenza tra un disinfettante e un antibiotico?

Answer 41

un disinfettante denatura le componenti strutturali batteriche indipendentemente dallo stato metabolico, un antibiotico ha azione verso i batteri attivamente metabolizzanti e inibisce una loro via metabolica

Question 42

Come si possono classificare gli antibiotici?

Answer 42

Si possono classificare rispetto alla via metabolica che inibiscono: sintesi della parete, degli acidi nucleici, delle proteine, della membrana citoplasmatica o dell’acido folico

Question 43

Che cos’è la MIC?

Answer 43

MIC è l’acronimo di minimun inhibiting concentration ed è un fattore che viene calcolato con un saggio mediante diluizioni seriali o con l’E-test.
è la più bassa concentrazione di una sostanza antimicrobica capace di inibire la crescita di un batterio

Question 44

Come funziona il saggio mediante diluizioni seriali?

Answer 44

vengono allestite una serie di provette contenenti brodo di coltura in presenza di concentrazioni scalari di antibiotico; viene poi inoculata una quantità standard di batteri in scala logaritmica.
Si valuta quindi la torbidità come indice di crescita e la MIC rappresenta la più alta diluizione inibente la crescita.
È possibile automatizzare questo metodo non eseguendolo in provetta ma su delle card di sistemi automatizzati.
Vengono poi interpretati confrontando i valori ottenuti con dei dati standard per specifici batteri, si valuta quindi se il battero è resistente, sensibile o a resistenza intermedia

Question 45

Come funziona il saggio mediante diffusione in terreno agarizzato?

Answer 45

si hanno piastre con terreno solido che vengono inoculate in modo omogeneo la coltura batterica, poi si posizionano sopra dei dischetti imbevuti di concentrazioni fisse di antibiotico.
Se il batterio è sensibile si osserva un alone di inibizione attorno al dischetto di antibiotico, si misura comunque il diametro dell’alone e si compara con dei riferimenti standard.
Questo saggio non è in grado di dare un valore di MIC.

Question 46

Come funziona l’E-test?

Answer 46

: si ha una striscia di carta con un gradiente di concentrazione di un solo antibiotico e la si pone sopra la piastra con la coltura. Si formerà un alone di inibizione ellittico, il punto di incontro tra la striscia e l’ellisse è la MIC.

Question 47

Che tipi di resistenza può avere un batterio?

Answer 47

Si può avere resistenza intrinseca (correlata alla struttura stessa) o acquisita.
La resistenza acquisita può essere ulteriormente divisa in cromosomale (dovuta a una mutazione nel cromosoma), plasmidica (mediata da plasmidi) o plasmidica mediata da transposoni

Question 48

Qual è il meccanismo generale di funzionamento dei beta-lattamici?

Answer 48

Sono inibitori della sintesi di peptidoglicano, si legano alle proteine PBP responsabili della formazione dei legami peptidici delle catene lineari del peptidoglicano (ultimo step di sintesi).
Bloccandole non sarà più possibile sintetizzarlo, si avrà un accumulo dei precursori nella cellula che attivano le autolisine e causano la lisi del batterio

Question 49

Come è formata una penicillina?

Answer 49

Ha un anello beta-lattamico e un anello tiazolidinico (eterociclo a 5 C), insieme formano l’anello fondamentale cioè l’acido 6-aminopenicillanico.
Questa unità viene condensata chimicamente con vari radicali per ottenere un determinato spettro e una certa stabilità

Question 50

Come sono formate le cefalosporine?

Answer 50

hanno un anello beta-lattamico con un anello diidrotiazionico (6C), insieme formano l’acido 7-aminocefalosporanico

Question 51

Quali tipi di beta-lattamici esistono ?

Answer 51

Le tipologie principali sono le penicilline, come l’ampipenicilla e la barnenicilla, le cefalosporine e le beta-lattamine

Question 52

Quali sono i possibili meccanismi di resistenza ai beta lattamici?

Answer 52

• produzione di beta-lattamasi: idrolizza l’anello beta lattamico inattivando l’antibiotico, nei GRAM + sono inducibili e vengono rilasciate nell’ambiente extracellulare, nei GRAM - sono costitutive e presenti nel periplasma
• modifica del sito bersaglio: vengono prodotte PBP alternative
• alterazione delle porine sulla membrana dei GRAM - in modo che gli antibiotici non possano passare
• blocco della sintesi delle autolisine (meccanismo di tolleranza)

Question 53

Quali sono degli antibiotici che inibiscono le fasi precoci della sintesi del peptidoglicano?

Answer 53

fosfomicina, cicloserina, vancomicina, ristocetina, bacitracina

Question 54

Quali sono le tipologie di antibiotici che inibiscono la sintesi degli acidi nucleici?

Answer 54

Novobiovina e chinoloni, nitroeterocicli e rifamicine

Question 55

Qual è il funzionamento della novobiocina e dei chinoloni?

Answer 55

La prima inibisce la subunità b della dna girasi batterica (proteina responsabile del superavvolgimento dei cromosomi), la seconda inibisce la subunità a.
Hanno quindi azione battericida sinergica, la novobiocina è naturale mentre i chinoloni hanno origine chimica.
I batteri possono acquisire resistenza modificando la dna girasi

Question 56

Come funzionano i nitroeterocicli?

Answer 56

Sono inibitori della sintesi degli acidi nucleici.
Sono molecole artificiali usate contro gli anaerobi obbligati che devono essere attivati da una riduzione. Sono esempi i nitrofurani (nitrofurantonine) e i nitromidazodi (metronidazolo). Si acquisisce resistenza riducendo l’attività reduttasica

Question 57

Come funzionano le rifamicine?

Answer 57

inibiscono la sintesi dell’rna ad esempio legandosi alla polimerasi. Nei gram- non riescono ad attraversare la parete, per diventare resistente può ridurre l’attività reduttasica

Question 58

A cosa possono mirare gli inibitori della sintesi proteica?

Answer 58

Il target può essere il ribosoma, perchè ha le subunità diverse dalle nostre, o i fattori extra-ribosomiali (ES: acido fusidico che blocca un fattore di allungamento)

Question 59

Quali sono gli inibitori della subunità 30s dei ribosomi?

Answer 59

• Tetracicline: interferiscono con l’attacco dell’RNA al complesso RNA-ribosoma.
  o Hanno uno spettro di azione
  o Meccanismo di azione batteriostatico.
  o La resistenza può avvenire per efflusso attivo dell’antibiotico attraverso la proteina di membrana TET (l’antibiotico viene sbattuto fuori).
• Aminoglicosidi: tra cui streptomicina, causano errori di lettura sull’mRNA.
  o Hanno uno spettro ampio ma non sono attivi contro gli anaerobi (necessitano di ossigeno per passare la membrana)
  o Hanno azione battericida.
  o Possono resistere producendo enzimi che modificano il farmaco, in particolare transferasi
• Glicilcicline: nuova generazione

Question 60

Quali sono gli inibitori della subunità 50s dei ribosomi?

Answer 60

-	Macròlidi: tra cui l’eritromicina, inibiscono il movimento del ribosoma lungo l’mRNA.
o	Hanno un ampio spettro
o	Meccanismo batteriostatico
o	Resistono metilando il target
-	Lincosamidi: tra cui la clindamicina, inibiscono la formazione del legame peptidico
-	Streptogramine: nuova generazione
-	Chetolidi: nuova generazione
-	Oxazolidinone: nuova generazione

Question 61

Quali sono gli inibitori della sintesi della membrana citoplasmatica?

Answer 61

Sono le polimixine (solo uso topico contro i gram-, alterano la permeabilità) e la daptomicina (depolarizza la membrana)

Question 62

A cosa serve e cos’è l’acido folico?

Answer 62

L’acido folico è la vitamina B9, una vitamina essenziale che l’uomo non è in grado di produrre e deve assumere con la dieta.
è necessaria per la sintesi di purine, timidine, metionine e t-rna: è una navetta (trasportatore) di unità monocarboniose

Question 63

Quali sono gli antibiotici che inibiscono la sintesi dell’acido folico?

Answer 63

Sono i sulfamidici (saulfamilamide), che inibiscono il primo enzima della sintesi tramite inibizione competitiva. Possono acquisire resistenza creando una via metabolica alternativa (assorbono l’acido folico dall’ambiente) o modificando il target.
Un altro antibiotico è il trimethoprin che inibisce l’ultimo enzima della via metabolica e si acquisisce resistenza nello stesso modo dell’altro

Question 64

Come è fatta la parete del mycobacterium tubercolosis?

Answer 64

Dopo la membrana citoplasmatica c’è un sottile strato di peptidoglicano con adese molecole di arabinogalattani a cui sono legati acidi micolici.
La parete è attraversata da lipoarabinomannani.

Question 65

Quali sono gli antibiotici contro il mycobacterium tubercolosis?

Answer 65

Sono:
- Etambutolo: inibisce la sintesi dell’arabinogalattano
- Isoniazide: inibisce l’enzima coinvolto nella sintesi degli acidi micolici, deve essere attivato da una catalasi-perossidasi del batterio codificata da katG. Il batterio diventa resistente mutando katG.
Si usano anche streptomicina e rifampicina, tutti e 4 combinati

Question 66

Come è influenzato il numero di cromosomi dalla velocità di crescita?

Answer 66

, l’inizio di una nuova replicazione avviene quando la cellula raggiunge una certa massa di inizio. Se le condizioni di crescita sono favorevole allora raggiunge prima questa situazione.
Nel terreno lento la divisione cellulare avviene dopo la completa replicazione del DNA, nel terreno lento una nuova replicazione del DNA inizia prima che la divisione cellulare sia completata.

Question 67

Come si effettua una colorazione batterica?

Answer 67

Bisogna allestire un preparato su un vetrino, effettuare la colorazione e poi osservare al microscopio con l’obbiettvo 100x ad immersione

Question 68

Che tipologie di colorazione ci sono?

Answer 68

Si può fare colorazione semplice, colorazione differenziale o colorazione speciale

Question 69

In cosa consiste la colorazione semplice?

Answer 69

prevede l’uso di un solo colorante basico, cioè con affinità per le strutture acide cariche negativamente.
Sono esempi il crystal violetto e il blu di metilene, riconosco forma, dimensione e arrangiamento ma non la tipologia.

Question 70

In cosa consiste la colorazione differenziale?

Answer 70

Permettono di differenziare i batteri sulla base della composizione chimica della loro parete cellulare.
Si usano un colorante primario e uno secondario (di contrasto), tra le due colorazioni viene aggiunto un decolorante: a seconda della composizione della parete, i batteri durante la decolorazione o trattengono il primario o lo perdono e acquisiscono il secondario.

Question 71

Quali sono esempi di colorazioni differenziali?

Answer 71

Si può fare la colorazione di gram o la colorazione di acido resistenza

Question 72

in cosa consiste la colorazione di gram?

Answer 72

1. Si usa come colorante primario il crystal violetto al 2%, lo si lascia 1 minuto: tutte le cellule diventano viola
2. Si addiziona il liquido di Lugol, una soluzione iodo iodurata, per 1 minuto: forma cristalli insolubili con il colorante primario, questi precipitano nella parete cellulare, le cellule restano viola
3. Si lava con acqua per togliere l’eccesso
4. Si decolora mediante alcol acetone al 50% per 20 secondi: le cellule GRAM+ restano viola, i GRAM- perdono il colorante dato che il decolorante dissolve la membrana esterna e il peptidoglicano è più sottile
5. Si lava con acqua per rimuovere il decolorante
6. Si usa la safranina allo 0,25% per 1 minuto: si colorano i GRAM- di rosa
7. Si lava con acqua
8. Si asciuga con carta bibula (porosa)

Question 73

In cosa consiste la colorazione di acido resistenza?

Answer 73

si distinguono i batteri sulla base del loro contenuto lipidico di parete. I batteri con alto contenuto lipidico trattengono il colorante primario (carbolfuxina per 5 minuti) quando decolorati con alcol acido. Vengono detti batteri acido resistenti.
Quelli con poco contenuto lipidico si colorano con il secondo colorante (blu di metilene) e vengono detti batteri non acido resistenti.

Question 74

Quali possono essere le colorazioni speciali?

Answer 74

Sono particolari colorazioni usate per la capsula (inchiostro di china) o per i flagelli (carbolfuxina e acido tannico)