Laboratoire 2 - Métabolisme de la caféine

Question 1

Qu’est-ce que la biotransformation d’un PA?

Answer 1

C’est son métabolisme, où le médicament est modifié afin d’en favoriser l’élimination.

Question 2

Est-ce que la biotransformation est réversible?

Answer 2

Non, car il rend les molécules plus polaires et donc plus solubles dans l’eau.

Question 3

Quels sont les 3 résultats possibles de la métabolisation du PA?

Answer 3

1. Activation
2. Inactivation
3. Potentialisation

Question 4

Qu’est-ce que la potentialisation d’un médicament?

Answer 4

Une augmentation de l’action d’un autre médicament qui maximise son efficacité.

Question 5

Qu’est-ce qu’un xénobiotique? Donner des exemples.

Answer 5

C’est une molécule chimique polluante et toxique dans l’organisme (antibiotiques, pesticides, médicaments).

Question 6

Où sont situées les enzymes de biotransformation (organe et cellules)?

Answer 6

Organes: Foie, tractus GI, reins et poumons
Cellule: RE lisse et cytosol.

Question 7

Quel est le rôle principal des enzymes de biotranformation?

Answer 7

Provoquer une réaction chimique de modification de molécule.

Question 8

Quels sont les types de réaction chimiques faites par les enzymes de biotransformation?

Answer 8

Oxydation, réduction, hydrolyse, synthèse et conjugaison.

Question 9

Quelles sont les réactions amenées par la phase I de métabolisation?

Answer 9

Oxydo-réduction et hydrolyse.

Question 10

Les réactions de phase I se passent où dans la cellule?

Answer 10

RE lisse et mitochondries.

Question 11

Donner un exemple d’enzyme pouvant faire des réactions chimiques de phase I.

Answer 11

CYP450 et ses isoformes.

Question 12

Quelles sont les réactions chimiques faites par les enzymes de phase II?

Answer 12

Ajout d’un groupement fonctionnel, conjugaison, glucoronidation, sulfatation et acétylation.

Question 13

Les réactions de phase II se passent où dans la cellule?

Answer 13

Au niveau du cytosol.

Question 14

Est-ce qu’un PA doit obligatoirement passer par la phase I et phase II de métabolisation?

Answer 14

Non, cependant un PA ne peut pas commencer par être métabolisé en phase II. Il faut absolument passer par la phase I.

Question 15

Pourquoi est-ce que le CYP450 est un outil d’étude de métabolisme?

Answer 15

Parce qu’il fourni le métabolisme du médicament, les isoenzymes impliquées et les interactions médicamenteuses.

Question 16

À quoi sert le microsome?

Answer 16

À donner des CYP450.

Question 17

Quelle est la chaîne de réaction du CYP450?

Answer 17

Substrat + NADPH + H+ + O2 -> NADP + H2O + substrat oxydé (OH ajouté).

Question 18

Qu’est-ce qui peut provoquer une interaction médicamenteuse?

Answer 18

La co-administration de médicament, qui ensemble peuvent induire ou inhiber les CYP.

Question 19

Pourquoi est-ce que les CYP sont catégorisés comme peu spécifiques?

Answer 19

Parce qu’ils ont plusieurs substrats.

Question 20

Qu’est-ce que la clairance hépatique?

Answer 20

C’est la capacité du foie à extraire un PA. C’est le volume de sang requis pour s’y prendre par unité de temps.

Question 21

Quels sont les unités de la clairance?

Answer 21

L/min

Question 22

De quoi est-ce que la clairance hépatique dépends?

Answer 22

1. Débit sanguin irriguant
2. % de médicament libre
3. L’activité enzymatique

Question 23

Qu’est-ce que la clairance intrinsèque?

Answer 23

C’est la capacité des enzymes hépatiques à éliminer un médicament, indépendant du débit sanguin.

Question 24

Pourquoi faire une extraction en phase solide (SPE)?

Answer 24

Elle permet de:

1. Préparer les échantillons
2. Séparer les différents types de constituants
3. Concentrer les analytes

Question 25

Pourquoi concentrer les analytes dans une SPE?

Answer 25

Afin d’augmenter notre rendement en diminuant les interférences possibles.

Question 26

Pourquoi est-ce que ce laboratoire était catégorisé comme in vitro?

Answer 26

Parce que nous avons utilisé des microsomes de rat.

Question 27

Pourquoi l’acétonitrile a été utilisée?

Answer 27

Afin d’arrêter la réaction enzymatique en précipitant les protéines.

Question 28

Pourquoi est-ce que la Furafylline a été utilisée?

Answer 28

Parce que c’est un inhibiteur de métabolisme et donc supprimait toute activité enzymatique.

Question 29

Quelles sont les étapes de la SPE?

À quoi chacune d’elles servent-elles?

Answer 29

1. Conditionnement avec méthanol (ajouter des H+ à la colonne, ce qui va activer les pores de celle-ci)
2. Équilibrer avec l’eau (préparer la colonne à recevoir l’échantillon, car contient beaucoup d’eau)
3. Loader l’échantillon acidifié (pour précipitation et défaire les liens entre les molécules présentes dans l’échantillon)
4. Laver avec eau (pour éliminer les substances polaires)
5. Recueillir les échantillons avec méthanol 20% (pour augmenter la fraction non-polaire dans la colonne)

Question 30

Pourquoi ne pas avoir utilisé du méthanol 100% dans l’étape de recueil des échantillons?

Answer 30

Parce que le méthanol 100% est trop puissant et aurait fait tout décrocher.

Question 31

Pourquoi est-ce que l’étude clinique n’est pas 100% valable?

Answer 31

Parce que le seul métabolite qui a été quantifié est la paraxantine. Ça ne donne pas le portrait exact de la situation.