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Biologie cellulaire > Chapitre 1 - La cellule > Flashcards

Chapitre 1 - La cellule Flashcards

1
Q

Vrai ou faux. La cellule procaryote est plus grande que la cellule eucaryote. Expliquez.

A

Faux, c’est l’inverse

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Q

Définissez ce qu’est le cytosquelette.

A

Système de filaments qui constitue un système de poutres, cordes et moteur pour donner sa force mécanique à sa cellule.

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3
Q

Est-ce que les cellules eucaryotes on une paroi cellulaire? Expliquez.

A

Non, pas comme chez les bactéries.

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4
Q

Quel est l’intérêt de la levure en recherche biologique?

A

Car elle se réplique très facilement et fait un bon modèle en laboratoire.

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5
Q

Quelles sont les quatres espèces utilisées comme modèle de recherche ?

A
  1. Ver nématode
  2. Mouche à fruit
  3. Souris Mus muculus
  4. L’Homo sapiens
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6
Q

Quels sont les deux manières d’isoler des cellules lorsque les protéines sont abondantes?

A
  1. Directement d’un tissu (prélèvement)
  2. Après amplification en culture primaire
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7
Q

Nommez les trois étapes pour isoler une cellule.

A
  1. Enzyme protéolytiques
  2. Ajout de EDTA pour empêcher les cellules de coller entre elles
  3. Séparer les cellules par agitation douce
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8
Q

Pour utiliser un spectromètre de flux, qu’est ce qui est essentiel en ce qui a trait aux cellules d’intérêt?

A

Il faut que les cellules d’intérêt aient un marqueur approprié

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9
Q

Quelle molécule particulière faut-il coupler au complexe antigène-anticorps pour séparer les cellules par FACS?

A

Une molécule fluorescente

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10
Q

Quelle est la principale différence entre le FACS et le R&D system?

A

Le R&D system est plus rapide.

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11
Q

Expliquez brièvement le fonctionnement du système R&D.

A

Étape 1: L’anticorps est attaché avec de la biotine et la molécule couplée à la streptavidine et un aimant 🧲
Étape 2 : On approche un aimant pour séparer le tout en deux: les cellules non-voulues restent aimantées alors que les cellules d’intérêt sont isolés.

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12
Q

Définissez les termes « in vivo » et « in vitro » pour un biochimiste.

A

In vitro: dans du verre, donc dans des tubes
In vivo: dans des cellules en culture

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13
Q

Donnez quelques conditions nécessaires à la culture des cellules. (Indice: 4 points)

A
  1. Nécessite 10% de sérum de veau
  2. Manipulations obligatoirement stériles
  3. Conservation à 37°C
  4. 5 % de CO2
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14
Q

Quelles sont les seules cellules qui « poussent » en suspension?

A

Les cellules sanguines

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15
Q

Qu’est-ce qu’une cellule primaire?

A

C’est une cellule isolé directement d’un tissu

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16
Q

Comment appele-t-on le moment ou les cellules n’ont plus de place dans le milieu de croissance?

A

Quand les cellules arrivent à confluence.

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17
Q

Vrai ou faux. Les cultures primaires et secondaires se cultivent indéfiniment.

A

Faux.

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18
Q

Donnez les deux raisons qui expliquent pourquoi les cultures primaires ne se cultivent pas indéfiniment.

A
  1. Les télomères se raccourcissent car il y a absence de télomérase
  2. Activation d’un mécanisme de contrôle du cycle cellulaire par choc de culture
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19
Q

Comment peut-on immortaliser des cellules? (Indice: 3 façons)

A
  1. Réintroduire la télomérase
  2. Inactiver les contrôles du cycle cellulaire par des oncogènes
  3. Avec des produits chimiques
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20
Q

Comment peut-on éviter un choc de culture?

A

Grâce à une mutation durant la culture.

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21
Q

Quelles sont les principales propriétés des cellules HeLa?

A

Elles sont immortelles, prolifèrent à haute densité, ne nécessitent pas d’attache pour pousser et produisent des tumeurs chez les souris.

22
Q

Qu’est-ce que la transfection?

A

C’est le procédé par lequel on introduit un ADN ou un ARN dans des cellules animales.

23
Q

Expliquez les trois méthodes de transfection chimique.

A
  1. Neutraliser l’ADN en le complexant avec du calcium phosphate
  2. Neutraliser l’ADN en le complexant avec des polycopions
  3. Neutraliser l’ADN en le complexant avec des lipides pour former des liposomes
24
Q

Qu’est-ce que l’électroporation?

A

Un champ électrique pour créer des trous dans la membrane plasmique permettant à l’ADN de passer.

25
Q

Quelle est la différence principale entre la transfection transitoire et la transfection stable?

A

La transfection transitoire permet d’exprimer un gène pour une durée limitée (48 à 72h) alors que la transfection stable permet une expression indéfinie

26
Q

Qu’est ce que la transduction?

A

C’est de la transfection mais en utilisant un vecteur viral

27
Q

Qu’est-ce qu’un épitope?

A

Une région spécifique sur un antigène reconnue par un anticorps d’environ 5-6 acides aminés

28
Q

Quelle est la différence entre un anticorps polyclonal et monoclonal?

A

Les anticorps monoclonaux ne reconnaissent qu’un seul épitope alors que les polyclonaux reconnaissent plusieurs épitopes d’un même antigène

29
Q

Qu’est-ce qu’une cellule transformée?

A

Des cellules dérivées de tumeurs produites en introduisant des oncogènes

30
Q

Lorsque réinjectées, quelle est la différence entre une lignée cellulaire non transformée et une lignée transformée?

A

La non transformée ne produit pas de tumeur

31
Q

Qu’est ce qu’un antigène?

A

Une molécule contre laquelle se développent les anticorps.

32
Q

Quelle est la fonction principale de la centrifugation différentiellle?

A

Séparer des particules de dimensions très différentes

33
Q

Qu’est ce que le fractionnement cellulaire?

A

Une méthode pour séparer des particules dans un gradient de sucrose selon la taille et la forme.

34
Q

Qu’est-ce qu’une cellule souche?

A

Une cellule non spécialisée

35
Q

Qu’est-ce que les cellules ES?

A

Les cellules souches embryonnaires

36
Q

Donnez trois caractéristiques des cellules souches embryonnaires

A
  1. Prolifèrent indéfiniment en culture
  2. Sont pluripotentes
  3. Elles redonnent tous les types cellulaires lorsque réintroduites dans l’embryon
37
Q

En quoi les cellules ES peuvent être utiles en thérapie cellulaire?

A

Car elles permettent d’induire une différenciation cellulaire précise, ce qui peut permettre de remplacer et réparer les tissus malades.

38
Q

Expliquez ce qu’est la reprogrammation nucléaire des cellules différenciées.

A

Ce sont des cellules somatiques adultes qui sont reprogrammées vers un état embryonnaire en transférant leur noyau dans des ovocytes.

39
Q

Qu’est-ce que les iPS?

A

Les induced pluripotent stem cells
Ce sont des cellules pluripotentes produites à partir de cellules somatiques isolés de cellules adultes

40
Q

En quoi les cellules iPS sont-elles différentes des cellules ES?

A

Puisque les cellules iPS proviennent des cellules somatiques adultes, il n’est pas nécessaire que l’organisme soit immunosupprimé lors de la réinjection, au contraire des cellules ES.

41
Q

Qu’est-ce que la génétique inverse?

A

ON identifie le phénotype associé à un gène dont la fonction est inconnue

42
Q

Expliquez ce qu’est un KO total

A

Mutation sur les deux allèles, si non létal pour l’organisme

43
Q

Expliquez ce qu’est un KO spécifique

A

Mutation à certains tissus à un moment particulier

44
Q

Nommez et définissez brièvement les trois système de coupe double brin

A

ZFN et les TALEN sont des protéines fusionnées au domaine nucléasique Fokl et CRSIPR est un assemblage nucléo-protéique avec un ARN et la nucléase Cas9

45
Q

D’où vient la découverte de CRISPR?

A

Une séquence d’ADN qui contient une région de 5 répétions presque palindromiques chez la bactérie E. Coli

46
Q

Expliquez comment fonctionne le locus CRISPR chez la bactérie.

A

Il fonctionne comme un système immunitaire bactérien.
1. Un morceau d’ADN du virus après infection va être inséré dans le locus CRISPR. Important que quelques descendants survivent
2. L’ARN est transcrit et maturé pour s’associer à Cas9
3. Lors de prochaines infections, l’ADN des phages sera détruit pas un ARN complémentaire associé à la nucléase Cas9

47
Q

Nommez deux avantages du système CRISPR/Cas9.

A
  1. Plus simple et plus rapide que ZFN et les TALEN
  2. On peut utiliser plusieurs ADN de guidage pour modifier simultanément plusieurs locus d’un même génome
48
Q

Donnez et expliquez les deux façons de réparer l’ADN après sa cassure double brin

A
  1. NHEJ: restaure un ADN continu mais insère des erreurs: utile pour inactiver des gènes (exemple synthase translationnelle)
  2. HDR: recombinaison homologue: utile pour insérer et modifier l’ADN avec précision
49
Q

Vrai ou faux. On peut utiliser la réparation de l’ADN par HDR pour insérer des mutations et des segments d’ADN.

A

Faux

50
Q

Comment génère-t-on une souris double KO avec CRISPR/Cas9?

A

On injecte directement CRISPR dans l’oeuf fertilisé, avec deux ARN guides

51
Q

Dans la transfection stable, comment fait-on pour que toutes les cellules expriment le gène étudié?

A

Il faut les cloner

52
Q

Quelle est le paramètre à considérer quant a la localisation des protéines pour faire du FACS?

A

Il faut que la protéine soit exprimée à la surface de la cellule

Biologie cellulaire (7 decks)

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