Infärgningsteknik Flashcards
Preparat som kommer till patologen?
- Operationsmaterial
- Provexitationer
- Biopsi-material
- Punktionsmaterial
- Cellutstryk
- Autopsier
Vad ska du tänka på vid utskärning
Tvärsnitt/längdsnitt?
Vävnadens uppbyggnad
Oragnets uppbyggnad
Förändringen
Vad är fixering?
Ett ”ögonblickligt” avstannande av livsprocessen med minsta möjliga förändring av vävnaden
Vad ska du tänka på inför fixering?
- Val av fix.medel
- Koncentration av fix.medel
- Fixeringstidens längd
- Fix. medels Temperatur
- Volym av fix.medel
Vad händer vid fixering?
- Proteinerna och protoplasmatiska substanser stabiliseras och vävnaden hårdnar
- Enzymernas aktivitet minskas. Autolys förhindras
- Bakterier fäster ej på fixerade celler – ingen förruttnelse
- Gör cellulära substanser olösliga och motståndskraftiga mot processering i kommande lösningar
- Förbereder så att ett färgat preparat tydligt visar cellkärnans mönster, de epiteliala cellmembranen och cytoplasman
Vad är ej önskvärt vid fixering?
Artefakter
Vad är en idealisk fixering?
avbryter livsprocessen momentant och bevarar vävnaden så lik det levande tillståndet som möjligt
Vad beror autolys på?
fördröjd fixering, dåligt definierade kärnor, oprecis cytoplasmafärgning
2 typer av fixering?
Formalaldehyd och etanol
Skillnad på att använda etanol och formalin som fixeringsmedel?
Denaturerande fix.medel ex. Etanol förändrar proteinernas form, men formen förändras ej av de gelerande fix. medel ex Formalin
Hur preparerar du en vävnad?
Utskärning Fixering Dehydrering(tar bort vatten) Inbäddning (ex parafin) Snittning (4-5 um) Visualisering (konstrast) Montering (täckglas) => Mikroskopering
Vad är syftet med en kort visualisering?
få en kontrastrik mikroskopisk bild
Ämnen som hjälper till att ge kontrast?
- Färgmolekyler
- Metaller
- DNA-prober
- Antikroppar
- Fluorescerande ämnen
- Enzymer
- Isotoper
- Faskontrast
Vad kan du använda för att färga in vävnad?
Xylene Alkohol Destillerat vatten Saltsur alkohol Buffertar med olika pH Färglösningar Metaller Oxiderande lösningar Reducerande lösningar Antikroppar Enzymer
Ge exempe på färgningar
Eosin-haematoxylin
Luxol Fast Blue
Richardsson