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MEDICINE > GENOMICA . PRC > Flashcards

GENOMICA . PRC Flashcards

1
Q

QUIEN DESCUBRIO LA PCR?

A

Kary Mullis 1983-1985

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2
Q

VENTAJAS DE LA PCR?

A
  • Rapidez
  • Alta sensibilidad
  • Alta especificidad
  • Detccion a partir de cualquier muestra biologica
  • no es necesaria una muestra estéril
  • deteccion de patogeno en general aun en presencia de
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3
Q

CUALES SON LOS COMPONENTES DE UNA PCR?

A
  • Nucleotidos
  • Primers
  • Buffers
  • DNA templado
  • Taq polymerase
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4
Q

CUALES SON LAS ETAPAS DE LA PCR?

A
  1. -Desnaturalizacion
  2. -Extension (elongacion)
  3. -Alineacion de los primers (único que cambia la temperatura)
  4. -Desnaturalizacion
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5
Q

EL NUMERO DE COPIAS DEL DNA DELIMITADO POR LOS PRIMERS SE DUPLICA EN CADA CICLO DE LA PCR??

A

Verdadero

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6
Q

QUE HACE LA TAQ-POLIMERASA??

A

Enzima termoestable capaz de colocar nucleotidos desde el extremo 3’ de un cebador

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7
Q

CUAL ES LA FINALIDAD DEL TERMOCICLADOR?

A

Realiza los diferentes pasos de la PCR

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8
Q

LA PCR NORMAL SIRVE PARA CUANTIFICAR?

A

FALSO, EL UNICO QUE CUANTIFICA ES PCR TIEMPO REAL

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9
Q

QUE SE REALIZA EN PCR NESTED?

A

Dos rondas de amplificación con diferentes pares de primers.

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10
Q

VENTAJAS DE LA PCR NESTED?

A
  • Especificidad

- Sensibilidad

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11
Q

QUE DETECTA LA RT-PCR?

A

Detection de la expresión de un gen por presencia de mRNA

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12
Q

QUE ENZIMA SE USA EN RT-PCR?

A

Reversotranscriptasa

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13
Q

QUE HACE LA PCR-MULTIPLE?

A

Usa multiples primers en una reacción para amplificar diferentes templados de DNA presentes en la muestra.

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14
Q

POR CADA GEN SE COLOCAN 2 OLIGOS EN PCR-MULTIPLE?

A

Verdadero

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15
Q

EN PCR MULTIPLEX SE PUEDEN DETECTEAR VIRUS, BACTERIAS Y HONGOS EN UNA MISMA MUESTRA??

A

Verdadero

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16
Q

VENTAJAS DE PCR MULTIPLEX?

A

-Resultado en 24 hrs
-Identificacion multiple, sensible, eficaz y rápida
-Alta sensibilidad
-

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17
Q

QUE PUEDE DETECTAR LA PCR MULTIPLEX?

A

-Paneles para meningitis
-Paneles para diarrea
-Virus respiratorios
-Neumobacterias
-Infecciones de transmisión sexual
-

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18
Q

SE UTILIZA COMO MARCADORES EN LA CONSTRUCCION DE MAPAS FISICOS Y DE LIGAMENTOS

A

PCR-RFLP

19
Q

QUIEN DETECTA DETECCIONES PUNTUALES?

A

PCR-RFLP

20
Q

PARA QUE ESTUDIOS PRECONCEPCIONALES SE PUEDEN DETECTAR CON PCR-RFLP??

A
  • Desprendimiento placentario
  • Trombosis
  • Abortos en el primer trimestre
  • Riesgo de espina bifida
21
Q

QUE PRUEBA DETECTA EL ANTIGENO ESPECIFICO POR EL ANTICUERPO ESPECIFICO?

A

Immune-PCR

22
Q

DIFERENCIA ENTRE PCR-TIEMPO REAL Y PCR-CONVENCIONAL

A

Punto final puede detectar hast 200 microorganismos y tiempo real 6 canales (sondas)

23
Q

QUE DETECTA LA PRUEBA ELISA?

A

Prueba rapida para detector VIH

24
Q

QUE PERMITE LA PCR EN TIEMPO REAL?

A
  • Observar la cinetica de la reaccion.
  • Cuantificacion de la expresion de genes o re ordenamientos. (mDNA, RNA Y DNA)
  • Mas rapida y menos laboriosa
  • Identificacionde mutaciones puntuales
25
Q

CUALES SON LOS TIPOS DE PCR EN TIEMPO REAL?

A
  • Cuantitativa

* Cinetica

26
Q

Como se monitor una PCR EN TIEMPO REAL?

A

Por medio de fluorescencia

27
Q

CUALES SON LOS REACTIVOS FLUORESCENTES QUE SE REALIZAN EN PCR DE TIEMPO REAL?

A
  • SYBR-GREEN
  • BEACON
  • TaqMan
  • FRET
  • Scorpion
28
Q

CARACTERISTICAS DE SYBR GREEN

A
  • Molecula fluorescente que se intercala en el DNA
  • Mas communmente
  • Alta sensibilidad
  • Menor costo
29
Q

EN SYBR GREEN LA ESPECIFICIDAD ESTA DADA POR LOS PRIMERS?

A

VERDADERO

30
Q

CUAL ES LA FUNCION DE LOS “REPORTER” EN UNA SONDA TAQ-MAN?

A

Fluoroforo que emite una determinada longitud de onda

31
Q

CUAL ES LA FUNCION DE “QUENCHER” EN UNA SONDA DE TAQ-MAN?

A

Absorbe la luz emitida por el reporter

32
Q

TAQ-MAN SE COME LA SONDA Y EL QUENCHER FLUORECE, SE DESPRENDE EL REPORTERO?

A

VERDADERO

33
Q

LAS SONDAS FRET, PERMITEN VER SI HAY UN NUCLEOTIDO DE DIFERENCIA?

A

VERDADERO

34
Q

CARACT DE LAS SONDAS FRET

A
  • DOS OLIGOS (EXCITADOR / AMPLIFICADOR)
  • NO AMPLIFICA
  • PUEDE VER CARGAS VIRALES
35
Q

EN SCORPION, QUE ES EL LOOP?

A

La secuencia que se esta buscando

36
Q

CUALES SON LOS OBJETIVOS DE LA REAL-TIME REVERSOTRANSCRIPTASA PCR?

A
  • Detección de la expresión de un gen

- Cuantificación de cargas vitales

37
Q

CUALES SON LAS ETAPAS DE LA REACCION DE AMPLIFICACION?

A
  • Exponencial
  • Lineal
  • Plateau
  • Detección de la PCR tradicional
38
Q

ENTRE MAS DNA TENGAS MENOR CT HABRA? Y POR QUE?

A

SI, POR QUE ES INVERSAMENTE PROPORCIONAL

39
Q

CUALES SON LAS MANERAS DE CUANTIFICAR?

A
  • Absoluta: resultado con unidades, cuantificación de virus

* Relativa: Porcentaje de incremento o disminución, genes housekeeping

40
Q

QUE DETERMINA LA CURVA MELTING?

A

Indica el pico mutante

1 pico; heterocigoto 2 picos: homocigoto

41
Q

DE QUE DEPENDE LA TM?

A
  • Secuencia

- Tamaño

42
Q

CARACT. DE LA PCR DIGITAL?

A
  • Muy especifica
  • Analiza celula por celula
  • Muy sensible
  • Cuantitativa
43
Q

APLICACIONES DE LAS DIFERENTES PCR’s?

A
  • Detccion
  • Monitoreo
  • Progresion de una enfermedad
44
Q

CARACT. DE PCR EN TIEMPO REAL:

A
  • Alta tecnologia
  • cuantitativa
  • sensible
  • Requiere menor cant de muestra

MEDICINE (17 decks)

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