GENOMICA . PRC Flashcards
QUIEN DESCUBRIO LA PCR?
Kary Mullis 1983-1985
VENTAJAS DE LA PCR?
- Rapidez
- Alta sensibilidad
- Alta especificidad
- Detccion a partir de cualquier muestra biologica
- no es necesaria una muestra estéril
- deteccion de patogeno en general aun en presencia de
CUALES SON LOS COMPONENTES DE UNA PCR?
- Nucleotidos
- Primers
- Buffers
- DNA templado
- Taq polymerase
CUALES SON LAS ETAPAS DE LA PCR?
- -Desnaturalizacion
- -Extension (elongacion)
- -Alineacion de los primers (único que cambia la temperatura)
- -Desnaturalizacion
EL NUMERO DE COPIAS DEL DNA DELIMITADO POR LOS PRIMERS SE DUPLICA EN CADA CICLO DE LA PCR??
Verdadero
QUE HACE LA TAQ-POLIMERASA??
Enzima termoestable capaz de colocar nucleotidos desde el extremo 3’ de un cebador
CUAL ES LA FINALIDAD DEL TERMOCICLADOR?
Realiza los diferentes pasos de la PCR
LA PCR NORMAL SIRVE PARA CUANTIFICAR?
FALSO, EL UNICO QUE CUANTIFICA ES PCR TIEMPO REAL
QUE SE REALIZA EN PCR NESTED?
Dos rondas de amplificación con diferentes pares de primers.
VENTAJAS DE LA PCR NESTED?
- Especificidad
- Sensibilidad
QUE DETECTA LA RT-PCR?
Detection de la expresión de un gen por presencia de mRNA
QUE ENZIMA SE USA EN RT-PCR?
Reversotranscriptasa
QUE HACE LA PCR-MULTIPLE?
Usa multiples primers en una reacción para amplificar diferentes templados de DNA presentes en la muestra.
POR CADA GEN SE COLOCAN 2 OLIGOS EN PCR-MULTIPLE?
Verdadero
EN PCR MULTIPLEX SE PUEDEN DETECTEAR VIRUS, BACTERIAS Y HONGOS EN UNA MISMA MUESTRA??
Verdadero
VENTAJAS DE PCR MULTIPLEX?
-Resultado en 24 hrs
-Identificacion multiple, sensible, eficaz y rápida
-Alta sensibilidad
-
QUE PUEDE DETECTAR LA PCR MULTIPLEX?
-Paneles para meningitis
-Paneles para diarrea
-Virus respiratorios
-Neumobacterias
-Infecciones de transmisión sexual
-
SE UTILIZA COMO MARCADORES EN LA CONSTRUCCION DE MAPAS FISICOS Y DE LIGAMENTOS
PCR-RFLP
QUIEN DETECTA DETECCIONES PUNTUALES?
PCR-RFLP
PARA QUE ESTUDIOS PRECONCEPCIONALES SE PUEDEN DETECTAR CON PCR-RFLP??
- Desprendimiento placentario
- Trombosis
- Abortos en el primer trimestre
- Riesgo de espina bifida
QUE PRUEBA DETECTA EL ANTIGENO ESPECIFICO POR EL ANTICUERPO ESPECIFICO?
Immune-PCR
DIFERENCIA ENTRE PCR-TIEMPO REAL Y PCR-CONVENCIONAL
Punto final puede detectar hast 200 microorganismos y tiempo real 6 canales (sondas)
QUE DETECTA LA PRUEBA ELISA?
Prueba rapida para detector VIH
QUE PERMITE LA PCR EN TIEMPO REAL?
- Observar la cinetica de la reaccion.
- Cuantificacion de la expresion de genes o re ordenamientos. (mDNA, RNA Y DNA)
- Mas rapida y menos laboriosa
- Identificacionde mutaciones puntuales