FINAL Flashcards
Longitud de onda
λ. Determina la visibilidad y color de la luz
Amplitud de onda
Determina la intensidad de la luz
Reflexión
El rayo de luz incide en un ángulo de 45° sobre una superficie, devolviéndolo al medio. De esta manera se hace visible. Ejemplo: espejo
Refracción
Es el cambio de velocidad que experimenta la luz al incidir en un ángulo de 45 grados al pasar de un medio a otro diferente
Índice de refracción
Es la cifra del cambio en la velocidad de un rayo de luz al incidir perpendicularmente a través de un cuerpo transparente. Se calcula dividiendo la velocidad de la luz en el vacío entre la velocidad de la luz en un medio
Lentes
Una lente es un medio u objeto transparente que permite el paso de la luz
Tipos de lentes
Convergentes: Son positivas, biconvexa, plano convexa. Forman foco
Divergentes: negativas, bicóncavas, planocóncavas, no forman foco. Centro adelgaza
Imagen Real
Se forma en el lado contrario de la lente, puede ser proyectada a una pantalla. Si se forma con una sola lente es invertida. (Objetivos RIA: Reales, Invertidos, Aumentados)
Imagen Virtual
Se crea del mismo lado de la lente donde se sitúa el objeto. No se puede proyectar. Ejemplo: ocular
Condensador
Lente convergente que recibe la luz de la fuente luminosa. Concentra la luz en el plano de la muestra. Esto genera una mayor cantidad de rayos sobre la muestra. Forma imagen Real, invertida
Lente objetivo
Se localizan uno o más en el revólver. Forman la primera imagen amplificada. De ellos depende la resolución (detalles). Forman Imagen real, invertida y aumentada (RIA). Se puede proyectar.
Apertura numérica (AN). Calidad de la lente
Cifra que corresponde a la capacidad de la lente frontal, para captar la mayor cantidad de rayos de luz. Se calcula con el seno de la mitad del ángulo multiplicado por el índice de refracción del medio presente entre la muestra y la lente frontal.
Poder de resolución
Es la capacidad del ojo o de un sistema óptico para individualizar dos puntos cercanos entre sí.
Límite de resolución
Es la distancia mínima que puede existir entre dos puntos o estructuras para ser reconocidos como individuales. A mayor AN, menor límite de resolución.
Se calcula multiplicando la constante K (0.61) x λ y eso dividido entre AN
Límite de resolución valores
Ojo: 0.2 mm
Microscopio de luz: 0.2μm
MET: 0.2 nm
MEB: 10 nm
Ocular
Amplifica la imagen formada en el objetivo. El Aumento total se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento total.
IMAGENES DEL MICROSCOPIO
1a. Imagen . En el objetivo es REAL, INVERTIDA Y AUMENTADA ( RIA ), puede ser proyectada; proyector de diapositivas o cine
2a. Imagen al ocular es virtual, derecha y aumentada y derecha; no se proyecta, va hacia la retina; lupa ( Vi DA)
Iluminación de Köhler 1.
Subir el condensador hasta el tope, introduciendo la lente abatible del condensador para lograr la máxima concentración de luz sobre la muestra a observar
Iluminación de Köhler 2.
Enfocar el objeto con un objetivo de menor aumento
Iluminación de Köhler 3.
Cerrar el diafragma de campo de la lámpara colectora, con lo que se verá proyectado éste sobre la muestra.
Iluminación de Köhler 4.
Bajar el condensador para enfocar el diafragma, de manera que su imagen se proyecte bien definida sobre la muestra
Iluminación de Köhler 5
Centrar la imagen del diafragma de campo con los tornillos para centrado del condensador
Iluminación de Köhler 6.
Abrir el diafragma de campo, de manera que la imagen de sus bordes se abra y se ilumine todo el campo visual.
Iluminación de Köhler 7.
Ajustar el diafragma de apertura del condensador para lograr mejor contraste, profundidad de campo y poder de resolución.
Iluminación de Köhler 8.
A cada cambio de lente objetivo, volver a enfocar la imagen con el tornillo micrométrico y ajustar el diafragma del condensador para mejorar el contraste
Microscopio de campo claro
Pasa la luz a través de la muestra, se usa contraste
Estereoscopio
Se ven estructuras completas
“Gran lupa” poca amplificación
Microscopio de campo oscuro
Proyecta estructuras brillantes o iluminadas en la periferia. Fondo oscuro
Células vivas sin teñir, se usa mucho para bacterias.
Microscopio de contraste de fases
Retarda las ondas de luz. No hay que teñir
Células vivas. Halo claro
Microscopio de Nomarski
Inferencial-diferencial
Modificación de contraste de fases, puede teñirse o no.
Imágenes en relieve
Células vivas
Microscopio de Jamin Lebedeff
De interferencia
Imágenes en color, células vivas. (en la foto parece infrarrojo, de esos de temperatura)
Microscopio de luz UV
Depende de luz UV
Resolución de 0.1 μm
Microscopio confocal
Se parece al de fluorescencia
Imágenes 2D que la compu analiza y convierte a 3D
Microscopio de luz polarizada
Requiere polatizados, prisma de Nicol. La luz pasa a un solo plano y a un analizador
Zonas isotrópicas (no cambian vibración de luz), y anisotrópicas (citoesqueleto, músculo estriado, hueso).
Microscopio de fluorescencia
Se marcan anticuerpos para ver muestras que emiten luz fluorescente
Microscopio de fuerza atómica
Rastrea superficie, células vivas, refleja haz láser
Microscopio electrónico de transmisión (MET)
Se calienta filamento de tungsteno y se dirigen electrones a la muestra por medio de lente condensador electromagnético. Pasa a través de la muestra, objetivo, lente proyectos y finalmente, en una pantalla fluorescente, en donde nos es posible observar la imagen
Objetos desde 100 μm a 1A
Microscopio electrónico de barrido (MEB)
Forma imagen 3D
Microscopio de luz vs electrónico
Fuente de luz blanca vs haz de electrones
Células vivas y muertas vs células muertas
Cortes muestras 5-10μm vs 50-100 nm
Límite de resolución 0.2 μm vs 0.2 nm
Técnica histológica
Obtención de tejido Fijación de tejido Deshidratación con alcohol Aclaramiento con xilol Inclusión Corte o microtomo Tinción Montaje
H&E
Hematoxilina: base, tiñe ácidos de color morado
Eosina: ácido, tiñe bases de color rosa
PAS
Periodic Acid Schiff
Tiñe carbohidratos de color rosado. El resto no suele teñirse
Tricrómico de Masson
Azul - colágena
Rojo - queratina, filamentos intermedios celulares, tejido muscular
Morado - núcleos celulares
Tricrómico de Gallego
Azul - tejido muscular
Morado - núcleo celular, queratina, filamentos intermedios celulares
Amarillo - tejido conectivo
Pentacrómico de Movat
Rojo - músculo Azul - mucopolisacáridos Negro - elastina Amarillo - TC Morado - núcleos celulares
Tinción de Nissl
Tiñe de color morado el retículo endoplásmico rugoso (substancia de Nissl) en las neuronas
Wright & Giemsa
En frotis sanguíneos, permite observar todas las células sanguíneas, coloreando eritrocitos color rosado, con un centro claro; y el resto de las células sanguíneas en morado
Reyes Mota
Tiñe la elastina de color rojizo a morado
Luxol fast-blue
Tiñe la mielina de color azul intenso, utilizada en cortes de SN
Inmunohistoquímica
Las células que no son positivas al marcaje no son teñidas, las células positivas pueden teñirse en café, o bien en color rosado
Azul alcian
Azul - mucopolisacáridos
Verhoeff tinción
Tiñe fibras elásticas de color morado
Tinción ocreína
Tiñe fibras elásticas de color café (rojizo pardo)
Tinción rojo oleoso
Tiñen adipocitos de color rojo los lípidos
SUDAN
Tiñen adipocitos III y IV en negro
Reticular
Tiñen fibras reticulares de color negro
Tinción Gordon Sweet
Argéntica, tiñe las fibras reticulares
Azul de Prusia o Perls
Tiñe hemosiderina de azul
Fontana Masson
Tiñe melanina de Negro
Tinción de Golgi
Argéntica, para tejido nervioso. Ramón y Cajal
Tinción Von Kossa
Tiñen calcio en negro
Tinción Carmin de Best
Tiñe de rosa / magenta el glucógeno
Tinción de Feulgen
Tiñe el DNA: núcleo + y nucleolo - de rojo /rosa, el fondo es de color verde
Técnica que conserva lípidos
Técnica por congelación (criostato)
Organelos membranosos
Membrana celular, plasmática o plasmalema
- Retículo endoplásmico liso (REL)
- Retículo endoplásmico Rugoso (RER)
- Aparato de Golgi
- Endosomas
- Lisosomas
- Mitocondrias
- Peroxisomas
Organitos no membranosos
Citoesqueleto
- Filamentos, filamentos intermedios y microfilamentos
- Centríolos y cuerpos basales
- Ribosomas
- Proteosomas
- INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS
Clasificación núcleo por número
Uninucleadas, binucleadas, multinucleadas
Clasificación núcleo por posición
Central, Periféricos Excéntricos Apical Basal Parabasal
Clasificación núcleos por su forma
Esféricos, Ovoides Aplanados Lobulares Arriñonados
Componentes del núcleo
- Envoltura nuclear
o Membrana nuclear interna (Cisterna perinuclear)
o Membrana nuclear externa (Complejo de poro) - Cromatina sustancia que tiene color
- Nucleoplasma
- Nucleolo forma el RNA ribosomal
Membrana nuclear
- Doble membrana: interna (6 nm, sostén x malla rígida, láminas nucleares -filamentos intermedios- unidas a su superficie interna, receptores RNA y cromosomas), externa (6nm, se continúa con el RER, se rodea en su superficie citoplasmática con una red laxa de vimentina, tiene ribosomas para síntesis de proteínas transmembranales.
- Transporte bidireccional
- Promueve la organización de la cromatina
Láminas nucleares: filamentos intermedios, organización nuclear y diferenciación celular, en la mitosis desaparece al fosforilarse y reaparecen al desfosforilar. Se alteran en apoptosis
Complejos de poro en el núcleo
Mide aprox 80 a 100 nm, fusión de las 2 membranas
- Forma octagonal
- Parte central 9 nm
- Porinas o nucleoporinas (proteína de los núcleos)
COMPONENTES
- Anillo citoplasmático Fibras que une RAN FILAMENTOS PROTEICOS - Anillo luminal de rayos (medio) - Anillo nuceloplásmico - Canastilla nuclear - Anillo distal
Transporte Nuclear
- Medidas por receptor, moléculas mayores de 11nm
- SEÑALES DE LOCALIZACIÓN NUCLEAR
o EXPORTINAS
ENVÍAN DEL NÚCLEO AL CITOPLASMA
Moléculas grandes como subunidades ribosómicas, y complejos macromoleculares
o IMPORTINA
IMPORINA alfa y beta
Introducen histonas y láminas
Concentraciones elevadas de RAN/GDP en citoplasma
Cromatina
Complejo de DNA y proteínas, BASOFILIA.
- HETETEROCROMATINA (no la veo) o núcleo de cara cerrada cromatina condensada, compacta.
- EUCROMATINA (la que va a sintetizar) o núcleo de cara abierta (se ven todos los elementos) cromatina dispersa, extendida, laxa.
(ejemplo de estambre, no están separadas)
- Proteína básicas asociadas: histonas y otras proteínas NO histonas
Cuerpo de Barr
Cromatina sexual
Matriz nuclear nucleoesquelética
- Red de láminas nucleares
- Unión de receptores de esteroides de carcinógenos, virus DNA y proteína vuriral
- Contiene 10% de proteínas totales
- 30% de RNA, 1 al 3% de DNA total
Nucleolo
Síntesis y procesamiento de pre-RNA
- Ensamble de subunidades ribosomales
- Actividad de Telomerasa y envejecimiento
- Gran tamaño en células con gran actividad metabólica
- Uno o más nucleolos
Regiones nucleares
- CENTROFIBILAR
o Contiene asa de DNA de los cromosomas 13, 14, 15, 21, 22
o Factores de transcripción y genes de RNAr - PARS FIBROSA
o Genes ribosómicos en transcripción - PARS GRANULAR
o Sitio de armado inicial de subunidades ribosomales o particulares PERIBOSÓMICAS, maduras para salir del citoplasma
ADN
Doble hebra helicoidal dextrógira
- Secuencia de nucleótidos
→ bases nitrogenadas + [pentosa + fosfato] → esqueleto secuencia 5’ y 3’
→ bases apareadas hacia el centro, unidas por puentes de hidrógeno (A-2-T y C-3-G)
purinas: adenina y guanina
pirimidinas: timina y citosina
- 10 pares de bases por cada vuelta de hélice
El DNA se utiliza para dos cosas:
1. Transcripción de proteínas
2. División celular
- debe desnaturalizarse para copiar el DNA y luego renaturalizarse
Tamaño ADN
ADN 2nm → Histonas → Nucleosomas 10 nm → Cromatina 30nm → Cromosoma 600nm
RNA
→ ARNm: Mensajero. Complementaria al ADN en núcleo (polimerasa II) y que lleva información al citoplasma.
→ ARNr: Ribosomal. Se forma en nucleolo (polimerasa I) para viajar al citoplasma y formar subunidades pequeñas y grandes de ribosomas.
→ ARNt: Transferencia: Se forma del ADN (polimerasa III) para viajar al citoplasma. Contiene un extremo con anticodón y otro extremo con aminoácido adherido.
Uracilo en lugar de Timina
Tipos de células de división
CONSTANTE: células lábiles, proliferan durante toda la vida, reemplazan a las células que se destruyen continuamente. A partir de una población de células madre o precursoras.
CELULAS QUIESCENTES: Células estables, actividad mitótica escasa. Se encuentran en fase G0 pero pasan a G1.
CÉLULAS PERMANENTES: No divisibles, no pueden entrar en mitosis.
Se duplica (interfase): G (grow) 11hr, S (duplica) 8hr, G2 (grow antes de la división) 4 hr.
Y se divide en en la mitosis
Apoptosis
Se reduce volumen celular
- Picnosis, cariorrexis y cariolisis
- No autofagocitosis
- Se condensa citoplasma
- Activan CASPASAS
- NO INFLAMACIÓN cicatrización con FIBROSIS
- PROGRAMADA
Necrosis
Edema celular
- Sin control
- Cromatina difusa
- Autolisis, desintegración de membranas
- Salida de citoplasma
- Liberación de enzimas proteolíticas
Membrana celular
una bicapa lipídica que es semipermeable asociada con proteínas y carbohidratos.
- Membrana flexible
- Mide 7 a 10nm
- Compuesta por proteínas, lípidos y carbohidratos
Transporte membranal pasivo
No requiere ATP
Difusión simple: a favor de un gradiente de concentración (donde hay más a menos)
Difusión facilitada: a través de proteínas de canal: sustancias pequeñas e hidrosolubles, forman poros hidrófilos llamados canales iónicos
Canales iónicos
Compuerta de voltaje Compuerta mecánica Compuerta de ligando Compuerta de proteína G Canales sin compuerta (K)
Son activados por voltaje, activados por ligando, acuaporinas (permiten la entrada de agua)
Transporte membranal activo
Se requiere ATP, en contra del gradiente de concentración
Tipos de transporte según la direccción: uniporte (1 molécula), simporte (varias moléculas), antiporte (en dirección opuesta)
Bombas:
sodio-potasio.
Calcio-ATPasa
Transporte membranal vesicular
Endocitosis -pérdida de membrana en el proceso. (fagocitosis, pinocitosis, mediada por receptores activados con ligandos), exocitosis (secreción constitutiva o regulada).
Comunicación celular
Transmisión de información entre células de señalamiento y células blanco con uniones GAP
Ligandos (fijos o de secreción, hidrofílicos o liposolubles) y receptores (citoplasmático o de enzima o proteína G).
Tipos de señalamiento para comunicación celular
Autocrino: a la misma célula
Paracrino: estimula a las cercanas
Endocrino: a través de la sangre
Uniones celulares
Laterales: Ocluyentes (zónula ocludens, estrechas) Adherentes, adherens (zónula adherens, mácula adherens o desmosoma, fascia adherens) Comunicantes, GAP, NEXO Basales: Hemidesmosomas Contacto focal
zonula ocludens
Zona de contacto entre células vecinas en forma de cinturón alrededor del plasmalema apical
Son barreras que impiden la difusión de sustancias en espacio intercelular
Suele ser la primera unión en forma de red
Proteínas integrales organizadas en crestas reticulares (como un zipper)
Ocludinas y Claudinas