Fécondation

Question 1

Quelles sont les caractéristique de l’ovocytes au moment de la fécondation ?

Answer 1

• taille 120 µm
• chromatine décondensée + histone
• haploïde
• cytoplasme ++

Question 2

Quelles sont les caractéristique du spz au moment de la fécondation ?

Answer 2

• taille :
• chromatine condensée + protamine
• haploïde
• cytoplasme réduit

Question 3

Quelle est l’intervalle où peut avoir lieu la fécondation ? ²

Answer 3

entre J11 et J15

Question 4

De quel facteur dépend la période de fécondabilité ?

Answer 4

• de la date d’ovulation.
• de la durée de survie des spermatozoïdes : 3 à 4 jours dans les cryptes cervicales.
• de la durée de survie de l’ovocyte : 10 à 24 heures post-ovulation.

Question 5

Où est capté l’ovocyte pour la fécondation ?

Answer 5

L’ovocyte ovulé, au sein du complexe cumulo-ovocytaire (CCO), est capté à la surface de l’ovaire par les franges du pavillon de la trompe.

Question 6

Vers où est transporté le CCO ?

Answer 6

Vers l’ampoule

Question 7

Qu’es qui permet le mouvement du CCO vers l’ampoule ?

Answer 7

Grâce aux cils des cell. tubaires et à la motricité tubaire (péristaltisme).

Question 8

Quelles est la durée de vie du COO dans l’ampoule ?

Answer 8

• 72h survie.
• dégénère au bout de 24h si pas de fécondation.

Question 9

Quels sont les facteurs qui bloquent le CCO dans l’ampoule ?

Answer 9

• activité contractile + faible à cause de la progestérone.
• fermeture de la jonction entre l’isthme et l’ampoule = CCO captif.

Question 10

Qu’es que l’éjaculation ?

Answer 10

L’éjaculation correspond à un dépôt au fond du vagin de 2 à 6 mL de sperme (40 à 600 millions de spz) en suspension dans le plasma séminal.

Question 11

Quels sont les buts de la traversée du tractus féminin par le spz ?

Answer 11

ut de :
- éliminer le liquide séminal
- filtrer les cellules germinales immatures
- sélectionner les spz
- contrôler le nombre des spz sur le lieu de la fécondation
- capaciter les spz

Question 12

Quels sont les Paramètres du mouvement et interaction avec le mucus cervical ?

Answer 12

• Glaire cervicale produite par cellules de l’endocol
• Texture variable selon cycle
• Environ 1% des spz ( 3m) pénètrent le canal cervical en se déplaçant à contre-courant : il s’agit de la première barrière physiologique.
• Ils colonisent ensuite les cryptes des glandes endocervicales puis sont soumis à une libération progressive = 1er lieu de stockage.

Question 13

Quels est la structure de la glaire cervicale en période ovulatoire ?

Answer 13

-(œstrogènes), les fibres sont orientées parallèlement à l’axe du canal cervical et forment un filet à mailles larges (30 µm) qui guide les spz et sélectionne les spz mobiles à trajet progressif linéaire en les isolant du plasma séminal
- Les spz qui n’ont pas pénétré la glaire sont rapidement détruits par l’acidité vaginale

Question 14

Quels est la structure de la glaire cervicale en période ovulatoire ?

Answer 14

(progestérone), la production de la glaire diminue et sa structure change = les mailles sont rétrécies et enchevêtrées (3 à 4 µm) produisant ainsi une glaire collante imperméable aux spz.

Question 15

Quelle est la 2ème barrière physiologique au trajet des spz ?

Answer 15

sphincter utéro-tubaire contrôle la pénétration dans la trompe.

Question 16

Quel est le 2ème lieu de stockage des spz dans le tractus féminin ?

Answer 16

isthme tubaire, les spz ralentissent et s’immobilisent (environ 10 000) :
par liaison temporaire aux cellules épithéliales, hyperviscosité.

Question 17

Comment et combien de spz atteignent l’ampoule tubaire ?

Answer 17

Lors de l’ovulation, environ 100 spz sélectionnés gagnent l’ampoule tubaire (par vagues d’une dizaine d’unités) grâce aux contractions de la trompe utérine, aux cellules ciliées tubaires et aux molécules chémo-attractives contenues dans le liquide folliculaire.

Question 18

Où finissent les spz ?

Answer 18

Les spz traversent l’ampoule et finissent par traverser la trompe dans toute sa longueur, jusqu’à la cavité péritonéale et s’accumulent dans le cul de sac de Douglas dans le liquide péritonéal.

Question 19

Qu’es que la capacitation des spz ?

Answer 19

La capacitation des spz permet l’acquisition de la fécondance

Question 20

Quelles sont les modifications induites par la capacitation ?

Answer 20

o Enlèvement des protéines de revêtement ou de dé-capacitation.
o Enlèvement d’une partie du cholestérol libre.
o Elimination des résidus glucidiques.

Question 21

Décrire le processus qui permet l’enlèvement des prot de revêtement lors de la capacitation ?

Answer 21

acquises lors du trajet dans l’épididyme (maturation épididymaire) et/ou apportées par les glandes annexes, elles permettent la protection durant le transit épididymo-déférentiel.

Question 22

Décrire le mécanisme d’enlèvement d’une partie du cholestérol libre lors de la capacitation ?

Answer 22

le cholestérol est intercalé entre les phospholipides membranaires par des accepteurs du cholestérol (albumine, lipoprotéines) présents dans les sécrétions génitales. Le retrait du cholestérol augmente la fluidité membranaire par mobilité des phospholipides membranaires, favorisant la pénétration massive des ions Ca2+.

Question 23

Décrire comment se fait l’élimination des résidus glucidiques lors de la capacitation ?

Answer 23

par des enzymes des voies génitales féminines permettant le remaniement des chaînes oligosaccharidiques des protéines de structure.

Question 24

Quelles sont les conséquence des modification induite par la capacitation ?

Answer 24

• Déstabilisation de la membrane plasmique
• Le démasquage des récepteurs spermatiques permet la reconnaissance et fixation à la zone pellucide.
• La mobilisation des protéines et la
  perméabilité́ au calcium, préparent à la réaction acrosomique.
  o Hyper-activation du mouvement.

Question 25

Quelles sont les caractéristiques de la capacitation in vivo ?

Answer 25

la capacitation est progressive dans l’utérus et les trompes, continue, réversible et non spécifique. Plus
l’ovulation approche, plus la durée de capacitation sera courte. Les spz n’achèvent pas leur capacitation ensemble mais par groupes hétérogènes.

Question 26

Quelles sont les caractéristiques de la capacitation in vitro ?

Answer 26

la capacitation est rapide, continue, éphémère et réversible (élimination du plasma séminal après lavage par
centrifugation douce). Elle peut être induite par la progestérone, le liquide folliculaire ou d’autres composés (pentoxifylline).

Question 27

Quelle est la chronologie de la phase de fécondation ?

Answer 27

• T0 : mise en contact CCO et spz
• T = 2h : fusion gamétique
• T = 30h : 1ère division

Question 28

Qu’est-ce que le cumulus oophorus expansé ?

Answer 28

t 3000 à 6000 cellules folliculeuses
enchâssées dans une matrice cellulaire, riche en acide hyaluronique.
Elle entoure l’ovocyte.

Question 29

Comment se fait la traversée du cumulus oophorus in vivo ?

Answer 29

In vivo, seuls les spz capacité pénètrent le cumulus puis la corona radiata, tout en conservant un acrosome intact ; la hyaluronidase contenue dans leur acrosome ne semble pas indispensable à cette traversée.

Question 30

Comment se fait la traversée du cumulus oophorus in vitro ?

Answer 30

In vitro, la préparation du sperme induit une capacitation et une RA : ainsi, la grande quantité́ d’hydrolase, libérée lors de la réaction acrosomique d’une centaine de spz capacités, dissout la matrice hyaluronique et facilite le passage du spz fécondant (son acrosome est intact)

Question 31

Qu’est-ce que la zone pellucide ?

Answer 31

Coque acellulaire de glycoprotéines entourant l’ovocyte, secrétée par l’ovocyte I au stade du follicule primaire
Ses glycoprotéines possèdent des branchements sucrés (chaines glucidiques oligosaccharidiques, OS) multiples et hétérogènes, impliqués dans la reconnaissance avec le spz; elles sont le support de la spécificité d’espèce.

Question 32

Quels sont les 4 glycoprotéine de l’espèce humaine ?

Answer 32

4 glycoprotéines dans l’espèce humaine : ZP2 (120 kD), ZP3 (83 kD) + ZP4 disposées en alternance et formant une trame dont les mailles sont reliées par ZP1 (200 kD).

Question 33

Quels OS assure la spécificité de l’espèce ?

Answer 33

Spécificité d’espèce assurée par oligosaccharides de la zone pellucide (ZP3-OS).

Question 34

Décrire la fixation primaire et induction de la réaction acrosomique ?

Answer 34

• Fixation primaire d’un spermatozoïde à membrane intacte avec ZP3 et ZP4 de la zone pellucide.
• Débute par l’apex du spermatozoïde.
• La réaction acrosomique (RA) commence aussitôt.

Question 35

Qu’es-ce que la réaction acrosomique ?

Answer 35

La RA est un fusion ponctuelle des membrane acrosomique ext à la MP du spz, créant des orifices par lesquels sont libérée les enzymes de l’acrosome par exocytose.

Question 36

Quels sont les inducteurs de la RA ?

Answer 36

• Inducteur physiologique = ZP3-OS de la zone pellucide
• Inducteur in vitro = progestérone et ionophore calcique
• de plus elle est calcium dépendante.

Question 37

Quelles sont les conséquence de la RA ?

Answer 37

• Les enzymes libérés (ex : acrosine) préparent la fusion en agissant :
  o sur la zone pellucide.
  o sur la zone équatoriale du spz.
• Exposition des récepteurs situés dans la membrane acrosomique interne => liaison secondaire

Question 38

Décrire la fixation secondaire à la ZP ?

Answer 38

une liaison irréversible impliquant la glycoprotéine ZP2 et des protéines de la membrane acrosomique interne dont la proacrosine et SPAM-1 de la famille des CAM.

Question 39

Comment se fait la traversée de la zone pellucide ?

Answer 39

Le spermatozoïde traverse (15 min) la zone pellucide en biais, creusant ainsi un tunnel à bords nets qui se referme derrière lui.

Question 40

Quelles sont les acteurs de la traversée de la ZP

Answer 40

Sa progression est mécanique : elle est liée à son hyperactivation et aux enzymes acrosomiques telles que :
- La β-N-acétylglucosaminidase
- La hyaluronidase
- L’acrosine

Question 41

Que permet la β-N-acétylglucosaminidase dans la traversée de la ZP ?

Answer 41

elle permet de rompre les liens entre le spermatozoïde et les glycoprotéines ZP2/ZP3.

Question 42

Que permet la hyaluronidase dans la traversée de la ZP ?

Answer 42

elle permet de dissoudre l’acide hyaluronique compris entre les mailles de la glycoprotéine ZP3.

Question 43

Que permet l’acrosine dans la traversée de la ZP ?

Answer 43

elle permet de rompre les ponts disulfures entre la glycoprotéine ZP1 et les glycoprotéines ZP2/ZP3. Elle permet également l’activation les protéines fusiogènes des deux gamètes.

Question 44

Décrire la fusion des 2 MP ?

Answer 44

Le premier spz acrosome réagi ayant pénétré dans l’espace périvitellin se place contre la zone microvillaire de la MP de l’ovocyte, tangentiellement, adhère et fusionne aussitôt. C’est donc le segment équatorial du spz qui fusionne avec la MP ovocytaire.

Question 45

Quel est le rôle du segment équatorial ?

Answer 45

Ce segment équatorial du spz dialogue avec les microvillosités de la
membrane ovocytaire, et les granules corticaux en position périphérique.

Question 46

Quelles sont les caractéristiques de cette fusion ?

Answer 46

Processus non spécifique d’espèce, qui fait intervenir plusieurs ligands.

Question 47

Quels sont les ligans qui interviennent dans la fusion des MP ?

Answer 47

• spermatiques
  o Métalloprotéases ADAM (fertilines)
  o Izumo1 (glycoprot mbranaire spz)
• ovocytaires :
  o tétraspanines : essentiellement CD9 +++ et CD81
  o intégrine α6β1, partenaire de CD9
  o Juno (récepteur à folate présent sur membrane ovocytaire et liant Izumo)

Question 48

Quelles sont les caractéristiques de l’activation ovocytaire ?

Answer 48

La fusion des membranes plasmiques gamétiques entraîne l’activation ovocytaire à l’origine de modifications moléculaires au niveau du noyau, du cortex et du cytoplasme. Cette activation ovocytaire s’achève par la première division de segmentation.

Question 49

Quel est le facteur de déclenchement de l’activation ovocytaire ?

Answer 49

On peut citer comme facteur de l’activation ovocytaire le facteur spermatique : il est universel. Le facteur spermatique correspond à une phospholipase C zêta.

Question 50

Qu’entraîne la cascade moléculaire de l’activation ovocytaire ?

Answer 50

Elle entraîne une libération IP3 puis libération brutale de calcium stocké depuis le RE présent dans le cytoplasme ovocytaire.

Question 51

Qu’entraîne l’augmentation brutale du calcium dans la cell ?

Answer 51

L’augmentation brutale du calcium intracellulaire déclenche la réaction corticale = exocytose des granules corticaux.

Question 52

Que contiennent les granules corticaux ?

Answer 52

Les granules corticaux contiennent des hydrolytiques (protéases) qui sont libérées dans l’espace périvitellin, provoquant ainsi des modifications physico-chimiques de la zone pellucide.

Question 53

Quelles sont les modification induite par la réaction corticale ?

Answer 53

• Imperméabilisation de ZP (par protéolyse ZP2 et dé-glycosylation de ZP3) à d’autres spz = blocage de la polyspermie.
• Durcissement de la ZP = protection du futur zygote puis de l’embryon pré-implantatoire.

Question 54

Quelle est la conséquence de la réaction corticale ?

Answer 54

Le spz s’enfonce dans le cytoplasme ovocytaire : le noyau perd son enveloppe nucléaire et la chromatine se décondense (protamines remplacées par des histones ovocytaires). Une nouvelle enveloppe nucléaire se reconstitue permettant la formation du pronucléus mâle (24 µm), plus gros que le PN femelle, localisé au point de fusion.

Question 55

Quelle autre évènement a lieu en parallèle de la formation du PN masculin ?

Answer 55

En parallèle, l’ovocyte reprend et achève sa 2ème division de méiose (jusqu’alors, ovocyte bloqué en métaphase II). Le 2nd globule polaire est expulsé, la chromatine se décondense et s’entoure d’une enveloppe nucléaire : c’est la formation
du pronucléus femelle (22µm) en regard du globule polaire.

Question 56

Quelle sont les caractéristiques des pronucléus ?

Answer 56

Chaque pronucléus présente entre trois et sept nucléoles de taille similaire, lieu de synthèse des ARNr. A partir de la formation des pronucléi, l’ovocyte prend alors le nom de zygote.

Question 57

Comment se déroule la distribution des mitochondrie ?

Answer 57

• Avant la fécondation, les mitochondries sont réparties uniformément dans le cytoplasme
• Au moment de la fécondation, les mitochondries se regroupent autour des pronucléi, assure fourniture de l’énergie nécessaire à la réplication des génomes des pronucléi
• Les mitochondries migrent à chacun des pôles du fuseau de 1ère division de segmentation.

Question 58

Que devient le centriole proximal du spz ?

Answer 58

• Fonctionne comme un centrosome ou centre organisateur des microtubules
• Formation d’un demi-fuseau mitotique appelé spermaster. Ce dernier s’étend progressivement sous forme de microtubules disposés de façon radiaire. Ce demi-fuseau permet d’attirer les pronucléi au centre de la cellule.

Question 59

Quelles sont les caractéristiques de la phase S de la 1ère division cell ?

Answer 59

La phase S correspond à la phase de réplication de l’ADN et se déroule dans chaque pronucléus de manière indépendamment. Elle débute quelques heures après leur formation et dure 12 heures à 18 heures.

Question 60

Qu’es que le stade de syngamie ?

Answer 60

Les chromosomes paternels et maternels restent groupés séparément, se placent sur la plaque équatoriale du fuseau de première division de segmentation.

Question 61

Combien de temps dure le stade de la syngamie ?

Answer 61

Le stade de syngamie, en moyenne 30 heures après insémination, signe l’achèvement de la fécondation. Le développement embryonnaire peut alors commencer.

Question 62

Quand à lieu la 1ère division de segmentation embryonnaire ?

Answer 62

La première division de segmentation du zygote se déroule en moyenne 30 à 36 heures après le premier contact entre spz et complexe cumulo-ovocytaire et aboutira à la formation d’un embryon à deux cellules filles ou blastomère.