Extraction acides Nucleiques Part 2

Question 1

La découverte des enzymes de restriction qui se trouvent naturellement dans les bactéries à permis la manipulation de l’ADN de manière pratique

Answer 1

Vrai

Question 2

Les enzymes de restriction sont utilisé pour?

Answer 2

Analyser la structure de l’ADN
Le clonage moléculaire

Question 3

Catégories de nucléases

Answer 3

Ribonucleases qui attaquent l’ARN
Desoxyribonucleases qui attaquent l’ADN

Question 4

Les exanucleases attaquent l’extrémité des molécules d’acide nucléiques

Answer 4

Vrai

Question 5

Les endonucleases clivent la chaîne d’acide nucléiques a l’extrémité

Answer 5

Faux au milieu

Question 6

Les enzymes de restriction sont des exonucleases extrêmement spécifiques

Answer 6

Faux c’est endonucleases extrêmement spécifiques

Question 7

Les enzymes de restriction sont le système immunitaire des bactéries

Answer 7

Vrai

Question 8

Les bactéries produisent des enzymes de restriction pour détruire l’ADN étranger

Answer 8

Vrai

Question 9

Pour protéger l’ADN, les enzyme de modification se fixent à d’autres site de reconnaissance que les enzymes de restriction

Answer 9

Faux aux même sites

Question 10

Les enzyme de restriction de type 3 coupe l’ADN a un millier de paires de bases au plus loin du site de reconnaissance

Answer 10

Faux c’est de type 1

Question 11

Les enzyme de restriction de type 3 sont peu utiles aux biologistes car la longueur exacte de la boucle n’est pas constante

Answer 11

Faux c’est celles de type 1

Question 12

Les endonucleases de type 3 sont souvent utilisées en biologie moléculaire

Answer 12

Faux rarement

Question 13

Composition enzyme de restriction type 3

Answer 13

Composé de 2 gènes ( mod et res) codant pour des sous unités protéiques

Question 14

Pour quoi fonctionne les sous unités protéiques codé par mod et res

Answer 14

Soit pour la reconnaissance et la modification de l’ADN ( Mod-M )

Soir dans la restriction ( Res-R )

Question 15

Enzyme de restriction les plus utilisé

Answer 15

Type 2 puisqu’elles clivent l’ADN à des positions fixes en respectant leur séquences de reconnaissance

Question 16

Nom enzyme de restriction d’espèces différentes qui partagent la même séquences de reconnaissance

Answer 16

Isoschizomeres

Question 17

Sous types des enzymes de restriction de type 2

Answer 17

2P
2S
2T
2C

Question 18

Le sous type 2S représente plus de 90% des enzymes utilisées en biologie moléculaire

Answer 18

Faux c’est les 2P

Question 19

Les 2S reconnaissent les séquences symétriques ou palindromiques

Answer 19

Faux c’est les 2P

Question 20

Type de coupures pour les 2P

Answer 20

EcoRI: extrémité dépassante en 5’
Pstl: extrémité dépassantes en 3’
Pvu2: extrémité franche non cohésives

Question 21

les extrémité dépassantes générés par une enzyme de restriction sont complémentaires et peuvent d’hybrider

Answer 21

Vrai on dit qu’elles sont cohésives

Question 22

Les 2C ont un site de reconnaissance palindromique

Answer 22

Faux non palindromique

Question 23

La DNase I pancréatique coupe l’arn hybridé à l’ADN

Answer 23

Faux c’est la Rnase H et elle a une activité endonucleases sur l’heteroduplex

Question 24

Que fait la nucléase S1

Answer 24

Elle fait passer de 2 brins d’ADN à 1 brins et elle a une activité endo ou exo sur l’ADN ou ARN simple brin

Question 25

Que fait la DNase pancréatique

Answer 25

Elle coupe les liaisons phosphodiester aléatoirement

Question 26

En raison de leur activité spécifique à la séquence, les exonucleases de restriction constituent un outil pratique pour la caractérisation moléculaire de l’ADN

Answer 26

Faux c’est les endonucleases de restriction

Question 27

Pour faire une carte de restriction, exposer l’ADN à une seule enzyme de restriction suffit

Answer 27

Faux il faut exposer l’adn à plusieurs enzyme séparément

Question 28

Une différence entre 2 séquences d’ADN qui affecte un site de restriction est appelée polymorphismes de longueur de fragment de restriction

Answer 28

Vrai

Question 29

L’ADN ligase lie de manière non covalente

Answer 29

Faux covalente

Question 30

Une coupure franche génère des extrémité qui ne peuvent pas s’hybrider entre elles

Answer 30

Vrai elles sont non cohésives

Question 31

Les IIP ont des séquences d’une longueur de 10 paires de bases

Answer 31

Faux 4 à 8 pb

Question 32

Étape de southern blot

Answer 32

1-Fragments séparé par électrophorese sur gel d’agarose
2-dénaturation
3-transfert de l’ADN sur membrane de nitrocellulose
4- fixation de l’ADN sur la nitrocellulose
5- révélation d’une séquence via l’hybridation a une sonde nucléique

Question 33

Le blotting c’est le transfert du contenu du gel sur un support solide

Answer 33

Vrai

Question 34

Étape de l’hybridation

Answer 34

Pré hybridation
Hybridation
LAVAGE
Révélation

Question 35

Pour le norhtern blot on effectue l’electrophorese dans des condition non dénaturantes

Answer 35

Faux dénaturante pour avoir une évaluation précise de la taille des transcrits

Question 36

Pour une révélation directe les sondes sont marquées à la digoxygenine ou à la biotine

Answer 36

Faux c’est une révélation indirecte ça

Question 37

Pour une révélation directe les sons radioactives sont autoradiographique et les sondes fluorescentes par fluorometrie

Answer 37

Vrai

Question 38

Le température de fusion hybride est la température à laquelle 100% des molécules passants de l’état double brin a simple brin

Answer 38

Faux 50% des molécules

Question 39

Formule de la température de fusion de l’hybride Tm

Answer 39

Cette formules donne une bonne approximation du Tm jusqu’en 25 nucleotides