Extraction Acide Nucleiques Et Leurs Analyses Part 1 Flashcards

1
Q

L’extraction de l’ADN a pour but de libérer les acides nucléiques pour pouvoir les utiliser dans des procédures ultérieures

A

Vrai

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Q

La libération initiale du matériel cellulaire est obtenue par rupture de l paroi cellulaire et des membranes cellulaires et nucléaires

A

Vrai c’est la lyse cellulaire

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3
Q

La lyse peut endommager l’acide nucléiques

A

Faux ne peut pas

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4
Q

Les premières expériences de recombinaison de l’ADN ont été réalisées sur des bactéries gram-positives

A

Faux négatives

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5
Q

Dans les bactéries gram-négatives les parois cellulaire ne sont pas épaisses et peuvent être lysées

A

Vrai par un pH élevé, des détergent et la digestion des protéines membraneuses

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6
Q

La paroi des champignons peut être lysée par un pH élevé

A

Faux paroi plus épaisse lysées par broyage ou digestion enzymatique avec Lysozyme

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7
Q

L’acide nucléique qu’on isole à partir du sang humain ou de la moelle osseuse provient principalement des GR

A

Faux des Globule blanc qui sont plus facile a prélever

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8
Q

L’ajout d’anticoagulants est nécessaire pour prélever les GB

A

Vrai

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9
Q

Une fois que l’acide nucléique a été libéré il y a 2 méthode

A

Vrai méthode organique et non organique

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10
Q

une solution isotonique peut être utiliser pour isoler les GB en faisant éclater les GR

A

Vrai

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11
Q

Pour l’isolation non organique on utilise une combinaison de sel élevé, de pH acide et un mélange organique de phénol et de chloroforme

A

Faux c’est pour l’isolation organique

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12
Q

La méthode organique se divise en 3 phases

A

Vrai phase organique
Interphases
Phase acqueuse

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13
Q

Le mélange phénol/chloroforme dissout les protéines contaminantes et les molécules hydrophobes

A

Vrai donc les molécules hydrophobes se retrouvent dans la phase organique

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14
Q

L’ARNase est éliminé en organique

A

Faux l’ARNase est ajouté en phase organique pour éviter la contamination de l’ARN et ensuite l’ARNase est éliminé pendant l’interphase en même temps que l’ARN

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15
Q

La méthode non organique utilise le mélange phénol/chloroforme

A

Faux

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16
Q

Le méthode inorganique utilise quoi

A

Des condition de pH acidique et de haute salinité, du sodium acétate pour acidifier l’environnement laissant que l’ADN en solution, en phase acqueuse

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17
Q

L’isolation en phase solide est plus rapide que les méthode organique et non organique

A

Vrai et d’un efficacité comparable

18
Q

Les produits à base de silice fixent efficacement l’ADN dans des conditions de forte salinité

A

Vrai

19
Q

Étape de préparation des échantillons pour l’isolement de l’ADN sur un milieu en phase solide :

A

1 lyse des cellules
2 libération des acides nucléiques

20
Q

En phase solide le lysat cellulaire est appliqué sur quoi

A

Sur une colonne dans un tampon hautement salé et l’ADN en solution est absorbé sur la silice

21
Q

Le QIasymphony utilise la colonne de spin

A

Faux il utilise les bille magnétique en silice et possède une surface plus grande pour la fixation de l’ADN

22
Q

Le problème de l’obstruction de la colonne de soin persiste avec le QIasymphony

A

Faux il est supprimé

23
Q

L’étape de lyse cellulaire pour l’isolement de l’ARN est réalisé avec le mélange phénol/chloroforme

A

Faux avec l’isothiocynate de guanidine

24
Q

L’electrophorese sur gel est la méthode physique la plus utiliser en biologie moléculaire

A

Vrai

25
Q

L’electrophorese permet de séparer et de purifier des fragments d’ADN ou d’ARN ainsi que les protéines

A

Vrai

26
Q

Idée de base de l’electrophorese

A

Séparer les molécules en fonction de leur charge électrique intrinsèque

27
Q

L’ARN a une densité plus élevé que l’ADN

A

Faux même desité de charge

28
Q

L’electrophorese où on fait migrer les protéine est appelé

A

Western Blot

29
Q

Electrophorese pour ARN

A

Northern blot

30
Q

Electrophorese ADN

A

Southern Blot

31
Q

On utilise du SDS en Northern blot

A

Faux seulement pour le Western blot donc pour les protéines pour comparer les prot en fonction de leur poids moléculaire

32
Q

On utilise de Beta mercaptoethanol pour le rompre les ponts disulfures

A

Vrai en Western blot

33
Q

en électrophones comment on visualise les bandes

A

Grâce à des colorants fluorescents qui sont des agents intercalants

34
Q

Colorants le plus utilisé dans les premières analyses ADN et ARN

A

Le bromure d’ethidium

35
Q

Colorant utilisé pour l’electrophorese de nos jour

A

Le vert SYBR et il est pas aussi mutagènes que le bromure d’ethidium et donc plus sûr à utiliser

36
Q

Pour l’electrophorese des acides nucléiques:

Dans un gel non dénaturant l’ADN simple brin ( dénaturé ) et l’ARN migrent en fonction de leur tailles

A

Faux en fonction de leur taille et conformation

37
Q

Dans un gel non dénaturant l’ADN double brin linéaire migre en fonction de sa conformation

A

Faux de sa taille

38
Q

Dans un gel dénaturant chaque brin d’ADN ou ARN migre en fonction de sa taille uniquement

A

Vrai

39
Q

l’utilisation d’un gel dénaturant simple suffit pour l’arn simple brin

A

Faux il faut un gel dénaturant à base de formamide car l’Arn peut créer des liens intermoléculaires entre ses bases hydrogènes et la formamide l’en empêche

40
Q

En électrophones, On calcule la taille des fragments grâce à la distance de migration

A

Vrai

41
Q

L’electrophorese se fait dans quel gel

A

Un gel de pilyacrylamide ( agarose )

42
Q

Les exonucleases retirent un ou plusieurs nucléarisés aux extrémités d’un adn double brin

A

Faux simple brin