Extraction Acide Nucleiques Et Leurs Analyses Part 1 Flashcards
L’extraction de l’ADN a pour but de libérer les acides nucléiques pour pouvoir les utiliser dans des procédures ultérieures
Vrai
La libération initiale du matériel cellulaire est obtenue par rupture de l paroi cellulaire et des membranes cellulaires et nucléaires
Vrai c’est la lyse cellulaire
La lyse peut endommager l’acide nucléiques
Faux ne peut pas
Les premières expériences de recombinaison de l’ADN ont été réalisées sur des bactéries gram-positives
Faux négatives
Dans les bactéries gram-négatives les parois cellulaire ne sont pas épaisses et peuvent être lysées
Vrai par un pH élevé, des détergent et la digestion des protéines membraneuses
La paroi des champignons peut être lysée par un pH élevé
Faux paroi plus épaisse lysées par broyage ou digestion enzymatique avec Lysozyme
L’acide nucléique qu’on isole à partir du sang humain ou de la moelle osseuse provient principalement des GR
Faux des Globule blanc qui sont plus facile a prélever
L’ajout d’anticoagulants est nécessaire pour prélever les GB
Vrai
Une fois que l’acide nucléique a été libéré il y a 2 méthode
Vrai méthode organique et non organique
une solution isotonique peut être utiliser pour isoler les GB en faisant éclater les GR
Vrai
Pour l’isolation non organique on utilise une combinaison de sel élevé, de pH acide et un mélange organique de phénol et de chloroforme
Faux c’est pour l’isolation organique
La méthode organique se divise en 3 phases
Vrai phase organique
Interphases
Phase acqueuse
Le mélange phénol/chloroforme dissout les protéines contaminantes et les molécules hydrophobes
Vrai donc les molécules hydrophobes se retrouvent dans la phase organique
L’ARNase est éliminé en organique
Faux l’ARNase est ajouté en phase organique pour éviter la contamination de l’ARN et ensuite l’ARNase est éliminé pendant l’interphase en même temps que l’ARN
La méthode non organique utilise le mélange phénol/chloroforme
Faux
Le méthode inorganique utilise quoi
Des condition de pH acidique et de haute salinité, du sodium acétate pour acidifier l’environnement laissant que l’ADN en solution, en phase acqueuse