Extracción de DNA Flashcards
1
Q
De qué depende el método de extracción de ácido nucleico?
A
- tipo de ácido nucleico a extraer
- organismo origen del ácido nucleico
- fuente de ácido nucleico
- técnica en la que se usara el ácido nucleico extraído
2
Q
Cuáles son los pasos de la extracción de DNA?
(6)
A
- lisis de la célula
- separación
- purificación
- precipitación
- lavado
- disolución
3
Q
Cómo se extrae DNA de sangre por la técnica de fenol-cloroformo?
A
- lisis: eritrocitos con cloruro de amonio y membranas con SDS
- separación de proteínas y lípidos: con solvente fenol : cloroformo : alcohol isoamílico 25:24:1
- precipitación: con solución salina y etanol 100%
- lavado: con etanol 70% y agua
4
Q
Cómo funciona la extracción de ADN por columnas o perlas?
A
Después de la lisis las proteínas y lípidos se lavan de la solución reteniendo el DNA con una membrana filtro o perlas magnéticas.
5
Q
Cómo se puede cuantificar las muestras de DNA?
A
- espectrofotometría
- fluorometría (tinción Hoechst 33258)