Expérience 1: Initiation à la ccm Flashcards
Quelle technique est utilisée pour suivre l’avancement d’une réaction ou évaluer la pureté d’un composé ?
La chromatographie sur couche mince
La chromatographie sur couche mince (CCM) est une méthode analytique de séparation des composés.
Quelles substances peuvent constituer l’échantillon inconnu ?
Acétate de naphtyle, benzoïne, ou un mélange des deux
L’échantillon peut également être un autre composé inconnu.
Quel mélange d’éluant doit être préparé pour l’expérience ?
90% d’acétate d’éthyle et 10% d’hexanes
Ce mélange doit être préparé dans un cylindre gradué de 10 mL.
Pourquoi est-il important de couvrir le bécher avec un verre de montre ?
Pour éviter la perte d’éluant par évaporation. On veux saturer la chambre en vapeur d’éluant.
La perte d’éluant peut modifier les proportions et l’effet sur la CCM.
À quelle distance du bas de la plaque doit-on faire un trait au crayon ?
À environ 1,5 cm du bas de la plaque
Cela permet de marquer la ligne de départ pour les échantillons.
Quel type de tube est utilisé pour déposer les gouttes sur la plaque ?
Un tube capillaire
Il doit être manipulé avec précaution pour éviter d’étendre l’éluant.
Que doit-on faire après avoir déposé les gouttes d’acétate de naphtyle et de benzoïne ?
Rincer le capillaire avec de l’acétone
Cela permet d’éviter la contamination entre les échantillons.
Comment doit-on positionner la plaque dans le bécher ?
En angle, sans que l’éluant soit plus haut que le trait
Cela est crucial pour le bon fonctionnement de la CCM.
Que doit-on faire lorsque l’éluant a migré jusqu’à environ 1 cm du bord supérieur de la plaque ?
Retirer la plaque et marquer l’emplacement du front de l’éluant
Cette étape est essentielle pour l’analyse des résultats.
Quel est le rôle de la lampe UV dans le protocole ?
Observer la position des produits sur la plaque
Cela aide à identifier les composés présents.
Quel révélateur chimique est utilisé dans l’expérience ?
KMnO4
Le KMnO4 est utilisé pour révéler les spots sur la plaque après la chromatographie.
Que faire si la CCM ne permet pas d’identifier clairement le composé inconnu ?
Préparer un autre éluant pour obtenir une CCM plus concluante
Il est possible de tester plusieurs éluants pour affiner l’analyse.
C’est quoi la CCM?
La chromatographie sur couche mince est une technique utilisée pour séparer et analyser les constituants d’un mélange. Elle repose sur deux phase la phase stationnaire (plaque de silice Si02, très polaire = réseaux covalents, london, keesom, ponts H,) et d’une phase mobile (éluant) qui migre par capillarité sur la plaque et entraine les composés.
Révélateurs possibles
1) Lumière UV : spot pas de fluorescence
2) Chimique : KMn04 qui se transforme en Mn02 qui est jaune
Un révélateur sert à révéler la présence des composés chimique sur la ccm, une fois l’élution
terminée. Il peut s’agir de lumière ultraviolette, qui est un révélateur non destructif ou encore de
divers révélateurs chimiques, tel que le KMnO4 (oxydant).
Comment les composés vont se séparer? Analyte et Éluant
Les composés se séparent selon leur affinité avec la phase stationnaire (plaque de silicate). Ils vont donc se séparer par polarité : plus un analyte est polaire, moins il va migrer haut sur la CCM. Plus il monte haut, moins il est polaire. Pourquoi? Puisque la plaque (Si02) est polaire. Ainsi, si l’analyte est également polaire, il va s’absorber plus fortement et donc bouger moins facilement. La polarité de l’éluant, elle, représente la force d’entrainement de l’éluant. Plus l’éluant est polaire, plus il va entrainer les composés haut et donc donner un Rf plus élevé.
Rf, c’est quoi?
Rf = distance analyte (spot, en cm) / distance front d’éluant (cm)
Rapport frontal :
Substance polaire : affinité forte pour la phase stationnaire = Rf faible
Substance apolaire : affinité faible pour la phase stationnaire = Rf grand
Utilité d’une CCM?
- nature
- pureté
** Même Rf = même nature. Plus il y a de points, moins le composé est pur.
- suivi de réaction : après un certains temps, on peux comparer le mélange expérimentale au réactif pour voir si il y a d’autre produits formés, mais aussi si notre réactif de départ est encore présent. Si il n’y a plus de réactif, il y a donc l’absence de réactif limitant ce qui veux dire que la réaction est finie.
Polarité de l’hexane et de l’acétate d’éthyle
Hexane = très apolaire !!
Acétate d’éthyle = moyennement polaire
Résumé du laboratoire
- La chromatographie sur couche mince (CCM) est utilisée pour suivre l’avancement d’une réaction ou évaluer la pureté d’un composé.
- L’objectif est de tester différents éluants (acétate d’éthyle et hexanes) et révélateurs (UV ou chimique) pour identifier un composé inconnu.
- Un échantillon inconnu (acétate de naphtyle, benzoïne, un mélange, ou autre) est comparé à de l’acétate de naphtyle pur et de la benzoïne pure.
Protocole :
- Préparer 10 mL d’un éluant (90% acétate d’éthyle, 10% hexanes) dans un bécher de 100 mL, couvert pour éviter l’évaporation. Après voltailiser, il reste juste l’analyte sur la plaque et celui-ci fait des interactions moléculaires.
- Déposer délicatement des gouttes d’acétate de naphtyle, de benzoïne et de l’inconnu sur une plaque CCM avec un capillaire, en laissant sécher entre chaque dépôt.
- Placer la plaque dans le bécher avec l’éluant, attendre la migration de l’éluant, marquer le front, sécher, observer sous UV, révéler chimiquement avec KMnO4 et recopier la CCM.
Quels sont les composants de l’éluant préparé pour cette expérience, et pourquoi est-il important de respecter ces proportions ?
L’éluant préparé pour cette expérience est constitué de 90 % d’acétate d’éthyle et de 10 % d’hexanes.
Il est important de respecter ces proportions pour plusieurs raisons :
- Polarité de l’Éluant : L’acétate d’éthyle est un solvant relativement polaire, tandis que les hexanes sont non polaires. En combinant ces deux solvants dans les proportions spécifiées, on crée un éluant dont la polarité peut être ajustée. Cela influence la séparation des composés sur la plaque CCM, car les composés avec des polarités similaires à celle de l’éluant migreront plus rapidement.
- Optimisation de la Séparation : Les proportions maximisent l’efficacité de la séparation des composés en fonction de leur affinité pour la phase stationnaire (la plaque). Un éluant trop polaire ou trop non polaire peut conduire à des résultats peu concluants, tels qu’une mauvaise séparation ou un étalement excessif des taches.
Expliquez la procédure correcte pour déposer les gouttes des échantillons sur la plaque CCM. Pourquoi est-il crucial de limiter le temps de contact entre le capillaire et la plaque ?
- Préparation du Capillaire : Avant de déposer un échantillon, il est important de rincer le capillaire avec de l’acétone pour éviter toute contamination venant de manipulations précédentes.
- Dépôt de la Goutte :
- Utilisez le capillaire pour prélever une petite quantité de l’échantillon (acétate de naphtyle, benzoïne ou le composé inconnu).
- Appliquez délicatement une goutte sur le premier point marqué sur la plaque, en veillant à ce que la goutte soit la plus petite possible.
- Répétez ce processus pour les autres échantillons sur les points marqués (deuxième point pour la benzoïne et troisième pour le composé inconnu).
- Manipulation de la Plaque : Évitez de toucher la surface de la plaque avec vos doigts pour ne pas contaminer les échantillons ou altérer les résultats.
- Séchage : Après le dépôt, laissez sécher les gouttes avant de plonger la plaque dans l’éluant.
Importance de Limiter le Temps de Contact :
Il est crucial de limiter le temps de contact entre le capillaire et la plaque pour plusieurs raisons :
- Contrôle de la Taille de la Goutte : Un contact prolongé peut entraîner un étalement excessif de l’échantillon, ce qui rendra difficile l’analyse et la séparation des composés. Une goutte trop étendue peut se combiner avec d’autres taches sur la plaque, rendant l’identification imprécise.
- Précision dans l’Analyse : Un temps de contact bref aide à garantir que seul un volume restreint d’échantillon est déposé, ce qui est essentiel pour obtenir des résultats fiables et reproductibles.
C’est quoi l’élution?
C’est le déplacement de la phase mobile à la surface de la phase stationnaire, ce qui entraine le produit à migrer sur cette dernière.
Comment conclure une ccm
Le Rf doit être entre 0 et 1
Il faut qu’il ait une bonne séparation des spots
Pur = 1 composé (un spot)
Non pur = plusieurs composés (plusieurs spots)
