Exercice 8-restriction digestion of genomic DNA and plasmid vector

Question 1

c’est quoi le shotgun cloning et comment le faire

Answer 1

une méthode pour créer une librairie génomique. Elle n’est pas précise.

C’est basically l’ADN génomique est digéré en fragments par une enzyme de restriction. le vecteur est digéré avec la même enzyme et l’ADN chromosomal est ligué dans le vecteur

Question 2

c’est quoi les 5 vecteurs qui peuvent être utilisés pour créer une librairie génomique

Answer 2

1) plasmides
2) cosmides
3) bactériophages
4) chromosomes artificiels
5) phagemids

Question 3

c’est quoi le gène LacZα

Answer 3

gène qui permet le criblage visuel des clones qui contiennent des inserts par l’α-complémentation

Question 4

comment éviter la ligation involontaire des bouts d’un vecteur (qui forme juste un vecteur fermé sur lui-même)

Answer 4

en utilisant des phosphatases comme le CIAP pour empecher la ligation des 2 bouts du vecteur

Question 5

1 avantage et 1 desavantage pour l’utilisation des phosphatases

Answer 5

avantage=résulte en grande quantités de transformants avec les inserts

Desavantage=réduit le nombre de transformants