El laboratorio, normas de seguridad y control de crecimiento bacteriano Flashcards
Si los microorganismo de estudio no son patógenos no es necesario cumplir a rajatabla con las precauciones de durante el manejo de cultivos
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Aunque los microorganismos que se manipulen no sean considerados patógenos, todos los cultivos de todos los microorganismos deben ser manejados con precaución por su potencial patogenicidad.
¿Cómo generamos unas condiciones de asepsia y esterilidad para trabajar en el laboratorio de microbiología?
Trabajando junto a la llama de un mechero de alcohol/gas o bien trabajando en cabinas de flujo.
El principal objetivo que perseguimos al trabajar en condiciones de asepsia y esterilidad es evitar la contaminación de cultivos por parte de microorganismos del ambiente.
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a) Restringir la presencia de microorganismos en estudio a sus recipientes y medios de cultivo para evitar el riesgo de contaminarse uno mismo o a un compañero.
b) Evitar que los microorganismos ambientales (presentes en piel, pelo, aire, ropa…) contaminen nuestras muestras.
(hipoclorito sódico 0,5%)Los desinfectantes más habituales son lejía y etanol 96%
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Lejía y etanol 70%
¿Cómo nos deshacemos de material contaminado?
No tirar nunca por el fregadero/basura común. Usar recipientes adecuados que serán esterilizados (autoclave).
Los materiales de plástico contaminados y los animales muertos infectados son incinerados en hormos crematorios.
Define control del crecimiento bacteriano
Tanto la inhibición del crecimiento como la destrucción de los microorganismos. Se consigue en mayor o menor grado mediante agentes esterilizantes, desinfectantes o asépticos.
Diferencia entre esterilización y desinfección
Esterilizar supone destruir el 100% de las formas viables de cualquier vida microbiana (vegetativas, esporas, virus…)
Desinfectar destruye las formas vegetativas pero no necesariamente las esporas
Diferencia entre desifectante y antiséptico
Ambos destruyen las formas vegetativas de los microorganismos más comunes, pero no necesariamente las esporas. La diferencia es que el desinfectante es excesivamente tóxico para usarse en tejidos vivos mientras que el antiséptico se aplica sobre mucosas, piel y otros tejidos vivos.
Asepsia y antisepsia son sinónimos.
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La asepsia es la ausencia de microorganismos en un espacio. Las técnicas asépticas evitan la contaminación del trabajador y los materiales durante el trabajo.
La antisepsia es la destrucción de las formas vegetativas de los microorganismos más comunes, pero no necesariamente esporas, sobre los tejidos vivos.
Al eliminar un agente microbiostático, el crecimiento de microorganimos puede resurgir.
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En microbiostasis el crecimiento está inhibido, pero los microorganismos no son necesariamente destruidos, por lo que si se elimina el agente microbiostático, el cultivo puede volver a crecer.
A una misma temperatura, el calor húmedo es mejor esterilizante que el seco
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¿Limitaciones del autoclave?
No se puede aplicar para:
- Materiales y medios termolábiles
- Lïpidos (hidrofóbicos = baja penetración del vapor de H2O)
Si se autoclava un medio líquido se debe taponar la boca del envase con algodón/tapón no hermético.
Fundamento del autoclave
El H2O hirviendo es desinfectante, pero no destruye algunas endosporas gram+.
Se puede subir el punto de ebullición del agua sometiéndola a elevada presión, para mantenerla hirviendo a temperaturas superiores a 100ºC i aumentar así su capacidad de destrucción de microorganismos.
El autoclave lo consigue calentando agua, cuando el vapor de agua ha saturado el interior de la cámara se cierra una válvula manométrica y por tanto empieza a aumentar la presión. A 121ºC y 1,1 atm basta dejar los materiales esterilizando durante 15-20’.
Para una Tº o presión de vapor fija, el tiempo requerido para esterilizar depende de la naturaleza del material, el tipo de envase y el volumen del material que se ha de esterilizar. A mayor volumen es necesario + tiempo.
Fundamento de la esterilización fraccionada
Esterilizar materiales que no resisten las Tº del autoclave.
Se realizan ciclos de:
- Tratamiento con vapor de agua a presión atm (100ºC)
- Incubación a Tº ambiente
A altas Tº se destruyen las formas vegetativas, durante las incubaciones se permite que las esporas termoresistentes germinen, de modo que serán destruidas en el ciclo siguiente.
La pasteurización reduce los niveles de microorganismos en líquidos termolábiles, pero no elimina la totalidad de ellos
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Se tratan a Tº que no causan esterilización pero se reduce la población microbiana a los niveles deseados. A efectos sanitarios, la Tº y el tiempo dependen del patógeno más resistente que se deba destruir.