Dry lab Flashcards
מהם מטרות ההפרדה כאשר משתמשים ב HPLC.
- הפרדת חומרים
- איסוף חומרים
- כימות
- זיהוי
כאשר אנחנו רוצים לאסוף חומר בנפח מסוים על מה זה בא בחשבון ?
על ריכוז החומר , ככל שהפרקציה שנאסוף תהיה בעלת נפח גדול יותר ריכוז החומר יקטן
כאשר אנחנו רוצים לאסוף חומר בעל ניצול גבוהה על מה זה בא בחשבון ?
על רמת הניקיון של הדוגמא. ככל שהניצולת גבוהה יותר דרגת ניקיון הדוגמא נמוכה יותר
ממה מורכבת מערכת ה HPLC?
פאזה ניידת/נעה - בדרך כלל ממס.
פאזה נייחת /קבועה
קולונה
למה משמש אותנו הגלאי ? איזה סוגי גלאים יש לנו
הגלאי משמש עבורנו לזיהוי של אחד/או יותר המרכיבים הנבדקים
יש גלאי הורס /לא הורס
מה היא הכרומטגרמה?
פלט/תרשים המתאר את יציאת החומרים לפי הפיקים באמצעות חישוב רוחב ושטח הפיקים לפי ציר זמן
מה קורה לחומרים
שיש להם אפיניות לפאזה הניידת
הם מתקדמים מהר יותר מחומרים שיש להם אפיניות לפאזה הנייחת
מה קורה לחומרים שיש להם אפיניות לפאזה הנייחת
הם מתקדמים לאט יותר מחומרים שיש להם אפיניות לפאזה הניידת
מה הן שני השיטות שבהם משתמשים ב HPLC
- normal phase
2. Reverse normal phase
מה המאפיינים של שיטת ה normal phase?
פאזה נייחת/קבועה פולרית
פאזה נעה/ניידת לא פולרית
מאפיינת בעיקר קולונה עם סיליקה
מה המאפיינים של שיטת reverse normal phase
- פאזה נייחת/ קבועה לא פולרית
2. פאזה ניידת/נעה פולרית
מה זה retention time ? (tR)
- זמן העצירה של חומר
- המטרה בהפרדה בין חומרים הוא שלכל חומר זמן עצירה משלו
- ככל שהפרש בזמני העצירה מחומר אחד לשני גבוהה יותר ההפרדה טובה יותר
מה זה peak resolution?
- רזולוציה של הפיק
- מדד שיש לקחת בחשבון 2 פרמטרים : זמן העצירה ורוחב הפיק
- ככל שרוחב הפיק צר יותר הפיק גבוהה יותר
כיצד מחשבים את הרזולוציה ?
tR חלקי ממוצע רוחב הפיקים
במידה ומעוניינים לשפר את תוצאות ההפרדה באילו דרכים נוכל לעשות זאת ?
- לשנות את זמן העצירה כדאי שהפיקים יתרחקו זה מזה בהנחה שרוחב הפיקים טוב
- לשנות את רוחב הפיק (להצר אותו) בלי לשנות את זמן העצירה בהנחה שהוא טוב