DNA recombinante Flashcards
qué es un vector
Es una molécula de DNA de doble cadena que puede albergar DNA de origen exógeno
de dónde provienen las enzimas de restricción para DNA recombinante
de las bacterias
enzimas del sistema de modificación
Metilasas
qué hacen las metilasas como parte del sistema de modificación
- Metilan el ADN propio en residuos de Adenina o Citosina
- Para que el pedazo nuevo que se sintetizó no se reconozca como extraño
uso de las endonucleasas de restricción
Cortar el fragmento del gen deseado
que son las endonucleasas de restricción
Es un mecanismo de defensa de las bacterias frente a la entrada de ADN foráneo.
que le confiere la metilación al DNA
es inmune, si no sería degradado
tipos de endonucleasas de restricción
- I
- II
- II
- IV
características del corte de la endonucleasa de restricción tipo I
- Asimétrico
- Reconoce el sitio pero corta 1000pb lejos
- Aleatorio (río abajo o arriba)
características del corte de la endonucleasa de restricción tipo II
- Reconoce secuencias palindrómicas
- Sitio de reconocimiento es igual al de corte
características del corte de la endonucleasa de restricción tipo III
- Corte asimétrico
- Reconoce y corta 20pb rio arriba o abajo
características del corte de la endonucleasa de restricción tipo IV
Reconoce DNA metilado
Tipos de corte
- asimétrico - cohesivo
- simétrico - Romos
Relación entre la enzima que se usa para cortar el plásmido y el DNA de la bacteria
- Se usa la misma enzima para que sean complementarios
Tipos de vectores
- Clonación
- Expresión
cuales son los vectores de clonación
- plásmidos
- bacteriófagos
- fagémidos
- cósmidos
- cromosomas artificiales
cuales son los vectores de expresión
- plásmidos
- bacteriófagos
funciones de los vectores de clonación
Almacenan secuencias y se obtienen grandes cantidades de DNA
funciones de los vectores de expresión
- Transportar un gen porque se puede retirar el gen externo
- Producir una proteína
partes de un vector de clonación
- ORI
- Sitio múltiple de clonación
- Marcaje de selección
qué es el sitio múltiple de clonación
Secuencia especifica que es reconocida por las enzimas de restricción para poder insertar el DNA complementario
Tipos de marcaje de selección
- Un gen que le de resistencia a un antibiotico
- Enzima para que tome alimento - Gen de β-galactosidasa
- Proteína y tinte para observarlo - Proteína verde fluorescente
partes de un vector de expresión
- Origen de replicación
- Sitio múltiple de clonación
- Marcador de selección
- Promotor
- IRES
- Secuencia de poliA
que significa IRES
Sitio de entrada a ribosoma