Cultures de cellules bactériennes suite Flashcards
quels sont les types de stérilisation par chaleur?
A. Feu (flamme)
B. Stérilisation de l’air chaud (four à air chaud)
C. Chaleur humide ( + pénétrante)
décrit la stérilisation à la flamme.
1) 1275 deg Cel — au bouc du premier bec cleu (assez élevé pour tuer microorg.) *Bec Bunsen
2) fil à boucle— manipulation à proximité —-champs stérile (+- 30 cm) donc pas de contamination.
Décrit la stérilisation à l’air chaud.
160-170 deg Cel Utilisation pour stériliser verreries, pipettes, objets de métal. pas d’humidité.
Lorsque sortie —-contact avec microorg., dont doit isoler avant (enveloppe) Nb. pas de microondes( t pas uniforme)
Décrit la stérilisation par chaleur humide.
Autoclave– vapeur d’eau (121 deg Cel èa pression 1 kg/cm^2)
15 min—-période requise pour stériliser (si vol aug., temp aug) endospores
Nécessite préparation de liquide thermorésistants (propriété croissance stables)
Conserves
Qu’est-ce que la radiation ionisante?
(dommages ADN)
Rayons gamma pénétrants — bris des brins d’ADN (les 2 et diff. à réparer)
Utilisé sur :
objet à usage unique: plastique thermosensibles (pipettes, pétris,etc.)
conserves épices
installations: parois couvertes de plomb.
Qu’est-ce que la radiation UV?
non pénétrante
exposé directement
surfaces (enceintes stériles(milieu e travail ou manip microorg.) + usine traitement d’eau)
Lorsqu’on parle de filtration, on parle de…
d’un filtre de nitrocellulose (0,22-0,45 um)
rétention des bactéries( virus traverse le filtre)
Liquide thermosensibles (sérum, vitamines, tétracyclines,etc)
Décrit les substances chimiques utile à la stérilisation.
élimine bactérie sur appareil sensible à la chaleur
Gaz stérilisants
-oxyde d’éthylène (explosif) dénature bactérie
- Ozone (toxique)
tout deux: enceintes hermétiques/instruments chirurgicaux (cathéters, prothèses, laparoscope)
qu’est-ce qui est essentiel pour milieux et instruments sinon il y a contamination par d’autres organismes. Mauvaises interprétation des résultats ou lors de chirurgie
stérilisation
De quoi parle-t’on lorsqu’on parle de risque biologique?
La culture et l’étude de microorganisme—- risque selon le microorg. et l’utilisation.
Infection répertoriées (plus grand de 10^4)
Normes : réduire à un niveau acceptable le risque d’infection.
-Agents transmissible
-voies d’exposition : orale, respiratoire, blessure cutanée, trans. transdermique. présence de vecteurs (insectes).
80% d’expositions—aérosols
combien de niveau de biosécurité y a t’il?
4
Dans ce laboratoire, on étudie des microorg non pathogènes chez les humains/animaux en santé.
Il n’y a pas de caractéristique spéciale par rapport au niveau de confinement.
Comprend: Bacillus subtilism E.coli, Micrococcus luteus, Lactococcus lactis… bactéries utilisées dans l’industrie alimentaire. tous les microorg absent des listes des autres niveaux.
liste réévalués par la cste par Santé Canada.
exigences?
niveau 1
exigences:
- Aucune restriction pour l’emplacement du local
- Garder les portes fermées
- Pas d’exigences pour le traitement de l’air
- Vestiaires séparés pour les vêtements d’extérieur et pour les sarraus.
Dans ce laboratoire, on étudie des microorg. causant des infections mais qui ne constituent pas des dangers importants pour les humains/animaux
existence de traitements efficaces et mesures préventives pour limiter le risque de propagation.
Comprend:
bactéries pathogènes + microorg. eucaryotes(mycètes causant infections) .
Bacillus cereus, clostridium difficile, cilostridium botulinum
Helicobacter pylori
legionella, pseudomonas aeruginosa
streptococcus spp.
vibrio cholera
Candida albicans, plasmodium (eucaryotes)
Coronavirus(SRAS), Hépatite B et C, herpes simplex, rage rubéole
exigences?
Niveau 2
Exigences: Panneau de mise en garde autoclave à proximité Porte automatiques accès limité utilisation d'une enceinte de biosécurité.
Dans ce laboratoire, on étudie des microorg. causant des infection graves chez les humains/animaux ou qui peuvent avoir de répercussions économique importantes.
transmission humain/humain/animaux possible
Existence des traitements efficaces par des agents antimicrobiens
niveaux de confinement supérieur à 1 et 2
Employé ont une formation spéciale
Laboratoire est conçu pour réduire au maximum la libération de microorganismes dans l’environnement et pour s’assurer une protection maximale du travailleur.
niveaux 3
Quels sont les exigences physiques pour un laboratoire de niveaux 3?
- situé à l’écart des zones de travail usuelles
- Douche à l’intérieur du confinement et pression négative
- Système étanche et indépendant d’approvisionnement et évacuation de l’air
- L’air évacué ne peut être évacué à proximité de zones habités. Si c’est le cas, filtré par HEPA
- Enceinte de sécurité.
Quelles sont les exigences opérationnelles majeures en laboratoire de niveau 3?
- SAS ou autoclave à l’intérieur du confinement
- Vêtement de protection sans ouverture devant, retirés et autoclavés (lavé après chaque utilisation)
- Bonnets, chaussures spéciales, couvre chaussures
- Protection respiratoire
- Surveillance médicale du personnel
Quelles sont les microorganismes que l’on peut rencontrer en laboratoire de niveau 3?
Bactérie: Baccillus anthracis, Mycobactérium tuberculosis, Yersinia pests
Protistes: Histoplasma
Virus : Fièvre jaune, VIH
Prions: Kreutzfeld-Jacob
Dans ce laboratoire , on étudie des microorganismes causant des infections très graves chez les humains/animaux ou qui peuvent avoir des répercussions économiques importantes. Transmmision chz les humains/animaux Absences de traitements efficaces Exigence physique très poussées Plus haut niveau de confinement 1 seul Laboratoire au Canada à WInnipeg
Niveau 4
exigences physiques majeures d’un laboratoire niveau 4?
- Laboratoire complètement isolé
- toutes les ouvertures scellées
- Suffisamment grand pour accommoder au moins 2 personnes, tout l’équipement de laboratoire, l’entreposage à long terme des cultures et l’entretion des animaux infectés
- Conduits de gaz munis de filtres HEPA
- Télévision à circuit fermé
- Ventilation indépendante et scellée ( air évacué filtré 2 fois sur HEPA)—décontamination in situ.
- Personne à l’extérieur qui supervise le travail en cas d’urgence
En laboratoire de niveau 4, on voit quel genre de microorganismes?
aucune bactérie, mycète, protiste
que des virus comme Ebola et Variole pour l’instant.
Qu’est-ce qu’un laboratoire niveau 4+
étudie l’exobiologie
- en construction
- NASA
- Échantillon de Mars (2020)
- Manipulation robotisées
note: en ce moment sur le campus il y a un comité de gestions des risques biologiques.