Cours #4

Question 1

C’est quoi le clonage

Answer 1

°Effectuer des copies identiques d’ADN via E.coli

Question 2

3 généralités sur la synthèse chimique de l’ADN pour les amorces

Answer 2

°Synthèse simple brin
°Bout 5’ non phosophorylé
°Longueur environ 100b

Question 3

3 applications du PCR

Answer 3

°Clonage moléculaire
°Science forensique
°Séquencage

Question 4

5 composantes du PCR

Answer 4

°ADN matrice
°Amorces
°dNTPs
°Tampon physiologique
°Polymérase thermophile

Question 5

3 grandes étapes du PCR

Answer 5

1) Dénaturation (30s à 94°C) séparer double brin
2) Renaturation (30s à 5°C sous Tm des amorces) liaison des amorces
3) Élongation (5 à 7 min à 72°C)

Question 6

Les amorces:
°Qu’est qui influence leur température d’hybridation (2)
°Longueur habituelle
°Tm (température de fusion) habituelle

Answer 6

°Longueur et %GC
°18-25b
°50-60°C

Question 7

C’est quoi Tm

Answer 7

Température à laquelle 50% des molécules d’ADN sont hybridées

Question 8

Que permet polymérase thermophile (2)

Answer 8

°Plusieurs cycle sans l’ajout de d’autres
°Utilisation de température d’hybridation élevé pour les amorces