Cours #1 Flashcards
Résume clonage moléculaire classique (4)
°Couper bout ADN d’intérêt
°Coller le bout sur un vecteur
°Transformer dans un hôte
°Extraire et purifier
C’est quoi une enzyme de restriction
°Des nucléases spécifiques qui hydrolysent l’ADN à une séquence spécifique qui correspond à son site de restrition
L’hydrolyse: °Coupe où
°Laisse quoi
°Lien entre sucre et phosphate
°Extrémité phosphate en 5’ et hydroxyl en 3’
Comment recoller l’ADN
T4 liguase
Klenow (2)
*besoin de dNTPs
°Activité polymérase 5 vers 3
°Activité exonucléase 3 vers 5
Enzyme exonucléase 5 vers 3 et 3 vers 5
Nucléase S1
Activité étoile des enzymes de restriction:
°C’est quoi
°Pk arrive
°Coupe des sites qui ne sont pas le palindrome normal
°Conditions d’incubations non-optimales
C’est quoi la méthylation des sites
Pour bloquer les sites de restriction
3 applications génie génétique
°Résistance des espèces aux parasites
°Élimination de déchets
°Production d’insuline